阻斷CXCR2對宮內(nèi)絨毛膜羊膜炎大鼠胎盤組織NLRP3信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及Th1/Th2平衡的影響*

林建麗 李慧 吳小妹 周玉華

(海南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院產(chǎn)科,海南 ?？?570100)

早產(chǎn)是導(dǎo)致大約85%新生兒死亡的主要原因,而宮內(nèi)感染是誘發(fā)早產(chǎn)的原因之一,占全球所有早產(chǎn)病例的40%左右[1]。絨毛膜羊膜炎(Chorioamnionitis,CA)是一種常見的妊娠并發(fā)癥,是世界范圍內(nèi)早產(chǎn)、死產(chǎn)的主要原因。CA作為一種特異性的宮內(nèi)感染性疾病,還與胎兒生長發(fā)育密切相關(guān),此外,其能增加腦室內(nèi)出血、腦室周圍白質(zhì)軟化、支氣管肺發(fā)育不良等疾病的發(fā)生率[2-5],給個人和家庭造成較大壓力,并給社會帶來沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。胎盤組織對于胎兒多器官和系統(tǒng)的發(fā)育均十分重要,胎盤功能障礙會導(dǎo)致胎兒生長受限、早產(chǎn)、流產(chǎn)以及神經(jīng)發(fā)育異常等[6-7]。已知CA會導(dǎo)致胎盤組織出現(xiàn)炎癥反應(yīng),炎癥細(xì)胞和炎癥因子均可誘導(dǎo)血管內(nèi)皮發(fā)生損傷,導(dǎo)致胎盤血液灌注不良,這一現(xiàn)象與早期早產(chǎn)密切相關(guān)[8]。趨化因子配體1(Chemokine ligand 1,CXCL1)及其同源受體(CXC receptor 2,CXCR2)與CA的病理生理學(xué)過程有關(guān),隨著宮內(nèi)炎癥加劇而表達(dá)上調(diào),此外,胎盤組織內(nèi)炎癥的嚴(yán)重程度與CA中CXCL1水平呈正相關(guān)[9]。CXCR2是典型的G蛋白偶聯(lián)受體,作為特征明確的趨化因子受體之一,顯示出強(qiáng)大的嗜中性粒細(xì)胞或髓源性抑制細(xì)胞趨化性,在不同疾病中參與免疫介導(dǎo)的炎癥性病理過程[10-11]。目前,CXCR2被認(rèn)為是控制發(fā)病機(jī)制中炎癥損傷的潛在藥理學(xué)靶點(diǎn)。關(guān)于CXCR2在CA進(jìn)程中的作用及機(jī)制尚未明確,本研究旨在通過給予孕鼠羊膜腔注射脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)誘導(dǎo)CA模型,觀察CXCR2 拮抗劑SB225002對CA的影響并探討可能的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗動物 清潔級健康成年SD大鼠,雌性50只,雄性25只,體質(zhì)量270～310 g,由海南藥物研究所有限責(zé)任公司[生產(chǎn)許可證號:SCXK(瓊)2020-0007]提供,雌鼠和雄鼠分籠飼養(yǎng)。動物房溫度保持在22～26 ℃之間,相對濕度為40%～60%,每天照明12 h,按時清潔排泄物,并補(bǔ)充食物,期間所有大鼠均自由攝食、飲水。本研究獲得我院倫理委員會審核批準(zhǔn)(批準(zhǔn)文號:KT20210610188)

1.2 主要材料與試劑 CXCR2拮抗劑SB225002(英國Biorbyt公司),LPS(美國Sigma公司),HE染色試劑盒(北京雷根生物技術(shù)公司),Trizol試劑盒(美國Invitrogen公司),第一鏈cDNA合成試劑盒(上海生工生物工程公司),熒光定量SYBR?Premix Ex TaqTMII(Tli RNaseH Plus)試劑盒(日本Takakra公司),IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-5及IL-10特異性ELISA試劑盒(北京索萊寶科技公司),RIPA裂解液、BCA蛋白測定試劑盒和DAPI染料(上海碧云天生物研究所),高敏型ECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒(南京諾唯贊生物公司),大鼠外周血淋巴細(xì)胞分離液(北京凱詩源生物科技公司),免疫熒光染色試劑(上海晶萊生物公司),兔抗NLRP3單克隆抗體、兔抗ASC多克隆抗體及兔抗Caspase-1多克隆抗體(英國Abcam公司),FITC標(biāo)記山羊抗兔IgG抗體、FITC標(biāo)記的CD4抗體、PE-A標(biāo)記的IFN-γ抗體以及PE-A標(biāo)記的IL-4抗體(北京百奧萊博科技有限公司)。

1.3 方法

1.3.1 實(shí)驗動物模型制備與分組處理 將雌雄大鼠按2∶1的數(shù)目比例進(jìn)行合籠飼養(yǎng),記錄時間,以發(fā)現(xiàn)雌性大鼠陰道栓形成或顯微鏡下觀察到陰道分泌物涂片有大量精子則視為交配成功,記為受孕第1天。將孕鼠單籠飼養(yǎng),隨機(jī)選取48只分為4組:對照組、SB225002組、LPS組、LPS+SB225002組,每組12只。LPS組和LPS+SB225002組的孕鼠在受孕第18天時,10%水合氯醛腹腔麻醉,無菌環(huán)境下備皮開腹,向孕鼠羊膜腔內(nèi)分別注射0.5 mg/kg的LPS,對照組和SB225002組的孕鼠同時注射等體積生理鹽水;接著給予SB225002組和LPS+SB225002組的孕鼠羊膜腔內(nèi)注射3 mg/kg的CXCR2拮抗劑SB225002,對照組和LPS組同時注射等體積生理鹽水。注射完畢后,將胚胎放回腹腔中,無菌生理鹽水沖洗腹腔并分層關(guān)閉,監(jiān)測孕鼠活動、攝食、陰道流血和感染等情況,各孕鼠實(shí)驗前的體質(zhì)量無統(tǒng)計學(xué)差異。

1.3.2 胎盤組織形態(tài)學(xué)檢查 將各組孕鼠麻醉,剖腹留取胎盤組織,生理鹽水清洗后濾紙吸干水分,置入4%多聚甲醛固定24 h,通過梯度酒精脫水與二甲苯透明后,浸蠟包埋,在病理切片機(jī)上制備4 μm 厚的組織切片。將切片脫蠟至水,置入蘇木精水溶液中染色5 min,在酸水與氨水中進(jìn)行分色,浸泡數(shù)秒鐘,流水沖洗,再置入伊紅染色液染色2 min,進(jìn)行脫水、透明,滴加樹膠在已透明的組織切片上,晾干,在光學(xué)顯微鏡下觀察胎盤組織病理學(xué)形態(tài)變化并采集圖像。每張切片隨機(jī)選取3個視野,通過Image-Pro Plus軟件分析血竇面積,結(jié)果取平均值。

1.3.3 免疫熒光染色 取制備的胎盤組織切片,經(jīng)梯度酒精脫水與二甲苯透明后,放入檸檬酸修復(fù)液里微波爐加熱煮沸,室溫冷卻,PBS洗滌,浸入0.3% TritonX-100中孵育處理15 min,滴加10%山羊血清覆蓋切片,37 ℃封閉2 h。甩去殘液,加入兔抗NLRP3單克隆抗體(1∶200)作為一抗進(jìn)行標(biāo)記,4 ℃孵育過夜;次日,甩去殘液,PBS洗滌,以FITC標(biāo)記山羊抗兔IgG(1∶1 000)作為二抗,37 ℃濕盒避光孵育1 h,PBS洗滌后,加入DAPI染料,37 ℃濕盒避光染色10 min,滴加熒光抗淬滅劑封片,晾干,在熒光顯微鏡下觀察各組大鼠胎盤組織內(nèi)染色情況,并采集圖像,每張切片隨機(jī)取5個視野,計數(shù)該視野下NLRP3陽性表達(dá)數(shù)目,結(jié)果取平均值。

1.3.4 實(shí)時熒光定量PCR反應(yīng) 取胎盤組織剪碎并研磨勻漿,Trizol試劑液提取總RNA,按說明步驟操作,經(jīng)分光光度計檢測樣品純度與濃度。根據(jù)第一鏈cDNA合成試劑盒將總RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。以cDNA為模板,在熒光定量PCR系統(tǒng)進(jìn)行定量擴(kuò)增,檢測目的基因在mRNA上的表達(dá),具體按照SYBR?Premix Ex TaqTMII(Tli RNaseH Plus)試劑盒說明書來配制反應(yīng)體系,依次加入各試劑和引物,GAPDH基因作為內(nèi)參。擴(kuò)增程序設(shè)置如下: 95 ℃ 30 s,1個循環(huán);95 ℃ 5 s、60 ℃ 30 s,40個循環(huán)。引物序列由上海生工生物工程有限公司合成,具體如下:NLRP3,上游引物5’-CCATCGGCAAGACCAAGA-3’,下游引物5’-ACAGGCTCAGAATGCTCATC-3’; ASC,上游引物5’-AACCCAAGCAAGATGCGGAAG-3’,下游引物5’-TTAGGGCCTGGAGGAGCAAG-3’;Caspase-1,上游引物5’-CAGACAAGGGTGCTGAACAA-3’,下游引物5’-TCGGAATAACGGAGTCAATCA-3’;GAPDH,上游引物5’-TGACTTCAACAGCGACACCCA-3’,下游引物5’-CACCCTGTTGCTGT AGCCAAA-3’,擴(kuò)增結(jié)束后,采用2-ΔΔCt法計算基因相對表達(dá)量。

1.3.5 Western blot法 取胎盤組織剪碎并研磨勻漿,預(yù)冷的RIPA裂解液裂解組織提取總蛋白,BCA法測定濃度。制備10% SDS-PAGE,將上樣緩沖液與樣本混合,沸水煮10 min使蛋白變性,取等量蛋白樣品加入SDS-PAGE膠孔內(nèi),經(jīng)電泳分離蛋白,電轉(zhuǎn)至PVDF膜。制備封閉液,將轉(zhuǎn)好的膜浸入5%脫脂奶粉中封閉2 h,TBST洗膜,加入一抗工作液,4 ℃孵育過夜。次日,TBST洗膜,加入二抗工作液,室溫孵育2 h。TBST再次洗膜后,利用ECL試劑顯色,在凝膠成像系統(tǒng)下曝光,通過Image-Pro Plus分析軟件統(tǒng)計各蛋白條帶灰度值,GAPDH蛋白作為內(nèi)參,以目的蛋白與內(nèi)參蛋白的灰度值之比作為目的蛋白的相對表達(dá)量。

1.3.6 酶聯(lián)免疫吸附法 各組大鼠眼眶靜脈叢采血,樣品室溫靜置2 h,以4 000 r/min離心15 min,獲取上清,使用特異性ELISA試劑盒測定各組樣本血清中IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-5以及IL-10的水平,實(shí)驗步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行,并制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,計算各細(xì)胞因子的含量。

1.3.7 流式細(xì)胞術(shù) 采集各組大鼠外周血,將100 μL血液樣本與200 μL PBS緩沖液混合,加入大鼠淋巴細(xì)胞分離液分離單核細(xì)胞,以4 000 rpm離心30 min,吸取上中層交界處含淋巴細(xì)胞與單核細(xì)胞混合液,繼續(xù)以4 000 rpm離心30 min,保留沉淀。重懸沉淀,添加FITC標(biāo)記的CD4抗體,室溫避光靜置30 min,再使用固定劑與破膜劑處理,分別加入PE-A標(biāo)記的IFN-γ抗體、PE-A標(biāo)記的IL-4抗體,室溫避光靜置30 min,離心后棄上清,PBS緩沖液重懸,通過流式細(xì)胞儀檢測Th1、Th2細(xì)胞比例變化情況,并計算Th1/Th2比值。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠胎盤組織病理學(xué)形態(tài)觀察結(jié)果 通過HE染色觀察各組大鼠胎盤組織形態(tài)學(xué),可見對照組大鼠胎盤組織結(jié)構(gòu)正常,血管規(guī)則,未見明顯的炎癥細(xì)胞浸潤;相較于對照組,SB225002組大鼠胎盤組織未發(fā)生明顯變化(P>0.05),而LPS組大鼠胎盤組織內(nèi)蛻膜炎癥細(xì)胞浸潤及絨毛膜炎癥程度明顯,血管管腔不規(guī)則,胎盤血竇面積顯著增加(P<0.05),胎盤結(jié)構(gòu)發(fā)育受到破壞;與LPS組比較,LPS+SB225002組大鼠胎盤組織內(nèi)蛻膜炎癥細(xì)胞浸潤減輕,絨毛膜炎癥現(xiàn)象也得到改善,胎盤血竇面積顯著減小(P<0.05),見圖1。

2.2 各組大鼠胎盤組織內(nèi)NLRP3表達(dá)水平比較 通過免疫熒光染色觀察各組大鼠胎盤組織內(nèi)NLRP3表達(dá),圖中紅色熒光代表NLRP3陽性表達(dá),相較于對照組,SB225002組大鼠胎盤組織內(nèi)紅色熒光強(qiáng)度未發(fā)生明顯變化,NLRP3陽性表達(dá)率變化無顯著差異(P>0.05),LPS組大鼠胎盤組織內(nèi)紅色熒光強(qiáng)度明顯增強(qiáng),NLRP3陽性表達(dá)率顯著升高(P<0.05);而LPS+SB225002組大鼠胎盤組織內(nèi)紅色熒光強(qiáng)度明顯減弱,NLRP3陽性表達(dá)率顯著低于LPS組(P<0.05),見圖2。

圖2 各組大鼠胎盤組織NLRP3表達(dá)檢測

2.3 各組大鼠胎盤組織內(nèi)NLRP3信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑相關(guān)基因及蛋白表達(dá)水平比較 實(shí)時熒光定量PCR檢測結(jié)果顯示,與對照組比較,SB225002組大鼠胎盤組織內(nèi)NLRP3、ASC及Caspase-1的mRNA相對表達(dá)量變化無顯著差異(P>0.05),LPS組大鼠胎盤組織內(nèi)NLRP3、ASC及Caspase-1的mRNA相對表達(dá)量均顯著上調(diào)(P<0.05);與LPS組比較,LPS+SB225002組大鼠胎盤組織內(nèi)NLRP3、ASC及Caspase-1的mRNA相對表達(dá)量均顯著下調(diào)(P<0.05)(圖3)。Western blot檢測結(jié)果顯示,SB225002組大鼠胎盤組織內(nèi)NLRP3、ASC及Caspase-1的蛋白相對表達(dá)量與對照組之間均無顯著差異(P>0.05),而LPS組大鼠胎盤組織內(nèi)NLRP3、ASC及Caspase-1的蛋白相對表達(dá)量均顯著高于對照組(P<0.05);與LPS組比較,LPS+SB225002組大鼠胎盤組織內(nèi)NLRP3、ASC及Caspase-1的蛋白相對表達(dá)量均顯著下調(diào)(P<0.05),見圖4。

圖3 各組大鼠胎盤組織NLRP3、ASC及Caspase-1 mRNA表達(dá)水平比較

圖4 各組大鼠胎盤組織NLRP3、ASC及Caspase-1蛋白表達(dá)水平比較

2.4 各組大鼠血清炎性因子水平比較 ELISA檢測各組大鼠血清內(nèi)IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-5及IL-10水平結(jié)果顯示,與對照組比較,SB225002組大鼠血清內(nèi)IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-5及IL-10水平變化均無顯著差異(P>0.05),LPS組大鼠血清IL-2、IFN-γ水平顯著升高,IL-4、IL-5及IL-10水平顯著降低(P<0.05);與LPS組比較,LPS+SB225002組大鼠血清IL-2、IFN-γ水平顯著降低,而IL-4、IL-5及IL-10水平均顯著升高(P<0.05),見表1。

表1 各組大鼠血清細(xì)胞分泌因子水平比較

2.5 各組大鼠外周血Th1/Th2細(xì)胞比例分布比較 流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示,與對照組比較,SB225002組大鼠外周血Th1細(xì)胞比例、Th2細(xì)胞比例及Th1/Th2比值變化均無顯著差異(P>0.05),LPS組大鼠外周血Th1細(xì)胞比例和Th1/Th2比值均顯著升高,Th2細(xì)胞比例顯著降低(P<0.05);與LPS組比較,LPS+SB225002組大鼠外周血Th1細(xì)胞比例和Th1/Th2比值均顯著降低,Th2細(xì)胞比例顯著升高(P<0.05),見圖5。

圖5 各組大鼠外周血Th1/Th2細(xì)胞比例分布

3 討論

CA主要表現(xiàn)為母體發(fā)熱、白細(xì)胞增多、心動過速、子宮壓痛以及胎膜早破等,臨床CA的診斷最常在臨產(chǎn)或足月分娩時進(jìn)行。CA可引起胎兒炎癥反應(yīng)綜合征,這是由于胎兒免疫系統(tǒng)被激活后釋放了大量炎癥因子,這些炎癥因子會干擾胎兒腦細(xì)胞因子的正常表達(dá),導(dǎo)致早產(chǎn)兒腦損傷[12]。也有一些臨床前研究表明,CA引起的胎兒肺上皮損傷導(dǎo)致血管滲透壓受損和細(xì)胞凋亡,使肺泡壁變薄,此外,炎癥因子也會損傷胎兒肺毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞,使得肺泡及血管結(jié)構(gòu)受損,最終引起支氣管肺發(fā)育不良[13-14]。LPS是革蘭氏陰性菌致炎的主要成分,用于建立妊娠相關(guān)的炎癥性疾病模型,本研究采用孕鼠羊膜腔注射LPS誘導(dǎo)構(gòu)建宮內(nèi)CA模型,探討了使用SB225002阻斷CXCR2可對CA胎盤組織損傷起到明顯的改善作用,為CA的臨床診療提供新思路。

CXCR2作為一種在嗜中性粒細(xì)胞中表達(dá)的趨化因子受體,在癌癥和各種炎癥或免疫疾病中都起著至關(guān)重要的作用,阻斷CXCR2是多種疾病治療的潛在新途徑。Saintigny等[15]研究表明CXCR2的表達(dá)水平與肺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移有關(guān),肺癌細(xì)胞中CXCR2高表達(dá)與臨床患者的預(yù)后不良有關(guān),抑制 CXCR2 及其配體CXCL8可顯著抑制肺癌細(xì)胞的增殖和遷移,并減少腫瘤血管生成。Zhu等[16]研究指出在活動性潰瘍性結(jié)腸炎患者的結(jié)腸黏膜組織和外周血細(xì)胞中CXCR2的表達(dá)顯著增加,CXCR2在中性粒細(xì)胞中也高表達(dá),并與疾病活動度呈正相關(guān),用SB225002阻斷CXCR2可以顯著改善DSS誘導(dǎo)的小鼠潰瘍性結(jié)腸炎,并降低了中性粒細(xì)胞中促炎介質(zhì)的產(chǎn)生,該研究表明了CXCR2通過調(diào)節(jié)中性粒細(xì)胞的免疫反應(yīng)在潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)病機(jī)制中起關(guān)鍵作用。Sharma等[17]研究表明CXCR2在乳腺癌骨轉(zhuǎn)移過程中調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞活化,利用Cl66-shCXCR2敲低乳腺癌細(xì)胞中CXCR2表達(dá)并植入雌性Balb/c小鼠顱骨背側(cè)皮瓣上后發(fā)現(xiàn)腫瘤生長和腫瘤誘導(dǎo)的骨溶解顯著減少,同時,觀察到注射乳腺癌Cl66-Luc細(xì)胞的CXCR2-/-小鼠骨骼中的骨破壞和轉(zhuǎn)移也較野生型小鼠中明顯減少。Nie等[18]研究發(fā)現(xiàn)在血管緊張素II誘導(dǎo)的腹主動脈瘤組織中的CXCR2表達(dá)增加,利用SB265610阻斷CXCR2可減輕腹主動脈瘤中膠原沉積、彈性蛋白降解、金屬基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá)以及巨噬細(xì)胞積累,從而降低腹主動脈瘤的形成。在本研究中,通過SB225002阻斷CXCR2后CA大鼠胎盤組織內(nèi)蛻膜炎癥細(xì)胞浸潤和絨毛膜炎癥現(xiàn)象減輕,胎盤血竇面積也減小,由此推測,CXCR2可能在CA的發(fā)病機(jī)制中起著重要作用。

NLRP3炎性體可作為多種炎性疾病的潛在治療靶點(diǎn)。在羊膜腔感染或炎癥下,絨毛膜羊膜中NLRP3炎性體激活與自發(fā)性早產(chǎn)有關(guān),此外,在患有CA的自發(fā)性早產(chǎn)婦女的胎膜組織中也已檢測到炎癥小體相關(guān)基因NLRP3和Caspase-1的表達(dá)上調(diào),同時表明了抑制NLRP3炎性體可延長妊娠期,不僅可以將CA誘發(fā)的早產(chǎn)率降低30%,而且還可以顯著提高新生兒存活率[19]。奇異變形桿菌、陰道加德納菌和B族鏈球菌是羊膜腔內(nèi)感染常見的微生物,可誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞中NLRP3炎性體激活[20-22],這進(jìn)一步暗示該途徑與導(dǎo)致早產(chǎn)的機(jī)制有關(guān),阻斷NLRP3炎性體激活可作為相關(guān)疾病的治療方案。本研究結(jié)果顯示,利用SB225002阻斷CXCR2后發(fā)現(xiàn)CA大鼠胎盤組織內(nèi)NLRP3表達(dá)的熒光強(qiáng)度明顯減弱,NLRP3、ASC及Caspase-1的mRNA相對表達(dá)量和蛋白相對表達(dá)量均顯著下調(diào),說明阻斷CXCR2抑制了NLRP3途徑的激活,這可能是其在CA中發(fā)揮保護(hù)作用的途徑之一。

在CA中各種交聯(lián)免疫因素從而導(dǎo)致患者的適應(yīng)性免疫系統(tǒng)被激活,各細(xì)胞因子分泌及釋放的變化可能會改變T細(xì)胞發(fā)育以促進(jìn)T輔助細(xì)胞效應(yīng)反應(yīng)的發(fā)展[23-25]。母體與胎兒間的免疫相容是妊娠成功的必備條件,其中Th1/Th2細(xì)胞極性的調(diào)節(jié)是保證胎兒健康生長的關(guān)鍵。已知CA孕婦外周血中Th1細(xì)胞分泌因子IL-2、TNF-ɑ及IFN-γ水平均升高,而Th2細(xì)胞分泌因子IL-4和IL-6水平降低,說明Th1/Th2細(xì)胞極性狀態(tài)向Th1偏移,Thl/Th2平衡狀態(tài)被打破[26]。本研究同樣顯示,CA大鼠血清IL-2、IFN-γ水平顯著升高,IL-4、IL-5及IL-10水平顯著降低,外周血Th1細(xì)胞比例和Th1/Th2比值均顯著升高,Th2細(xì)胞比例顯著降低;而在CXCR2阻斷劑SB225002作用下,CA大鼠血清IL-2、IFN-γ水平表現(xiàn)為降低,IL-4、IL-5及IL-10水平均表現(xiàn)為升高,同時,外周血Th1細(xì)胞比例和Th1/Th2比值均顯著降低且Th2細(xì)胞比例顯著升高,由此推測,阻斷CXCR2參與調(diào)控CA中Th1/Th2失衡現(xiàn)象,抑制了Th1/Th2向Th1偏移。

4 結(jié)論

CXCR2可能參與了孕鼠CA進(jìn)程,阻斷CXCR2可通過抑制NLRP3信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑及調(diào)控Th1/Th2趨于平衡狀態(tài),從而對CA孕鼠起到一定的保護(hù)作用。由于受到產(chǎn)前產(chǎn)后諸多因素的干擾,CA在妊娠中多發(fā),對母嬰結(jié)局造成了不良影響,本研究通過構(gòu)建CA孕鼠大鼠模型并給予CXCR2拮抗劑SB225002處理后,取得了良好的實(shí)驗效果,這為CA的治療提供了提供理論依據(jù)與實(shí)驗支持。但也存在一定不足,需進(jìn)一步從新生幼鼠角度進(jìn)行相關(guān)功能檢測,并深入探究相關(guān)的調(diào)控機(jī)制,以期為臨床上治療CA提供新思路。