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      利用GC-IMS分析3個核桃品種葉片揮發(fā)性物質指紋差異

      2023-12-18 09:28:14王如月羅莎莎虎海防孫雅麗
      新疆農(nóng)業(yè)科學 2023年11期
      關鍵詞:醇類山核桃揮發(fā)性

      王如月,羅莎莎,王 茹,虎海防,孫雅麗

      (1.新疆農(nóng)業(yè)大學,烏魯木齊 830052;2.新疆佳木果樹學長期科研基地,新疆溫宿 843100;3.新疆林業(yè)科學院,烏魯木齊 830062)

      0 引 言

      【研究意義】核桃(JuglansregiaL.)為胡桃科(Juglandaceae)核桃屬(Juglans),是世界四大干果之一[1]。核桃在我國分布廣泛,種質資源豐富[2],核桃有健脾補血等功效[3],核仁富含蛋白質、脂肪、膳食纖維、微量元素等物質,具有較高的營養(yǎng)價值[4]。核桃除核仁具營養(yǎng)價值之外,其枝、葉、果均具有較高的利用價值?!厩叭搜芯窟M展】核桃葉片中存在大量黃酮類化合物、萜類化合物及胡蘿卜素[5],黃酮具有抗氧化、調節(jié)細胞增殖等作用[6],萜類化合物是核桃葉片中的揮發(fā)油組分中的主要化合物,是揮發(fā)性成分的活性部分[7]。目前大多研究集中在核桃品質、藥用、加工及育種等方面,張銳等[8]通過研究水肥耦合對核桃品質的影響,表明適當水肥耦合處理可以提高核桃品質;王新平等[9]研究認為核桃枝葉中含有大量香精油、鞣質、VC、多酚復合物等物質,其內含物質有一定的藥用價值。但對核桃葉片相關研究較少,張博等[10]以水浸提法提取兩種核桃葉片中內含物胡桃醌;結果表明其內含物質可抑制蘿卜、小麥等植物種子的萌發(fā)及幼苗生長,且薄殼山核桃中胡桃醌含量明顯高于山核桃。張捷莉等[11]利用毛細管氣相色譜-質譜-計算機聯(lián)用法(GC-MS)法從核桃葉片揮發(fā)油中分離鑒定了32種化學成分,有一定的藥用及營養(yǎng)價值;王淑萍[12]采用氣相色譜-質譜聯(lián)用法(GC-MS)從核桃楸葉片揮發(fā)油中鑒定了51種化合物及7大類化合物,其中已知藥用成分有27種,占總成分的51.19%。陳友吾等[13]對浙江栽培的美國山核桃、山核桃葉片中的揮發(fā)性物質進行采集,利用鑒定出50種化合物質。核桃葉葉片的揮發(fā)物質有增強細胞活性作用[14];以及對細菌有著明顯抑制作用[15];且隨著葉片時期的不同其揮發(fā)性物質成分及種類也有所差異[16],以及對細菌有著明顯抑制作用[15];對不同核桃品種葉片的揮發(fā)性成分差異進行研究,對核桃葉片資源多功能開發(fā)有著現(xiàn)實意義?!颈狙芯壳腥朦c】對核桃葉片中揮發(fā)性化合物的檢測及鑒定最常用的方法是氣相色譜-質譜-計算機聯(lián)用法[17],但氣相色譜-質譜-計算機聯(lián)用(GC-MS)法因環(huán)境因子及品種的不同對其揮發(fā)性物質的檢測及鑒定較為困難且差異較大,而氣相色譜—離子遷移譜(Gas chromatographyion mobility srectorscopy,GC-IMS)是一種高靈敏度、快速響應、二維分離核痕量分析等檢測特點的氣象分離檢測技術,既彌補了GC-MS對痕量小分子檢測靈敏度與質譜信息量不足問題,又可以精確地檢測到極其微量成分,且樣品不需任何前處理,目前已用于食品成分[18-20]、產(chǎn)地[21]及品種[22]及藥材品種產(chǎn)地[23]、成分[24]揮發(fā)成分檢測等不同領域中,但對不同核桃品種葉片揮發(fā)物質檢測鮮有報道。需更加快速、全面系統(tǒng)的鑒定不同品種樣品揮發(fā)性成分?!緮M解決的關鍵問題】利用GC-IMS對3個核桃品種葉片釋放的揮發(fā)性有機圖譜信息分析其組成成分及其含量差異,研究不同核桃品種葉片揮發(fā)性物質的釋放規(guī)律及其含量差異,為核桃葉片揮發(fā)性有機物的提取、氣味資源利用及區(qū)分不同核桃品種提供途徑。

      1 材料與方法

      1.1 材 料

      1.1.1 核桃品種

      試驗樣品采集于新疆佳木果樹學國家長期科研基地,收集3個核桃品種葉片為材料,試材品種為山核桃、溫185和美國紅核桃。采樣樹齡為9 a,株行距為4 m×6 m,生長健壯、無病蟲害。于2021年采摘相同部位且采摘的葉片完整,每個樹種選3棵樣樹,樹形為開心形,從核桃樹的東、西、南、北 4個方位收集,每個采樣點隨機取葉片數(shù)20片,每品種采樣共80片,樣品采摘大小相似。收集的葉片進行篩選,去除灰塵及其他雜質。按樣品號分別標記,稱重,液氮處理,-80℃低溫冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

      1.1.2 儀器與設備

      CTC Combi-PAL自動頂空進樣器丹麥Densensor公司;Flavour Spec?氣相色譜-離子遷移譜聯(lián)用儀:配有Laboratory Analytical Vievwer(LAV)分析軟件及GC-IMS Library Search定性分析德國G.A.S公司。

      1.2 方 法

      1.2.1 分析條件

      試驗所用的Flavour Spec 1H1-00053型GC-IMS的可控參數(shù)包括:IMS溫度控制、色譜柱選擇、進樣器溫度、漂流氣和載氣流速、正、負兩級離子化模塊切換;配備的頂空進樣裝置可調的參數(shù)有孵化溫度、孵化時間和進樣。表1

      表1 分析條件[26-27]

      1.2.2 GC-IMS技術檢測

      每個品種取20片核桃葉,取5.0 g樣品,放入20.0 mL頂空進樣瓶中45°C孵化15.0 min,經(jīng)頂空進樣用FlavourSpec?風味分析儀進行測試,每個品種做3個平行樣品,給出樣品中揮發(fā)性有機物的差異譜圖;軟件內置的NIST數(shù)據(jù)庫和IMS數(shù)據(jù)庫可對物質進行定性分析。

      1.3 數(shù)據(jù)處理

      使用儀器配套的分析軟件VOCal,用于查看分析譜圖和數(shù)據(jù)的定性定量,應用軟件內置的NIST數(shù)據(jù)庫和IMS數(shù)據(jù)庫可對物質進行定性分析。Reporter插件直接對比樣品之間的譜圖差異(三維譜圖、二維俯視圖和差異譜圖);運用Gallery Plot插件指紋圖譜對比,直觀且定量的比較不同樣品之間的揮發(fā)性有機物差異;運用Dynamic PCA插件進行動態(tài)主成分分析,用于將樣品聚類分析,以及快速確定未知樣品揮發(fā)物質的種類。

      采用軟件SPSS V20版(IBM SPSS Statistics 20)對數(shù)據(jù)進行顯著性差異分析。處理3個平行數(shù)據(jù)并將其最終表示為平均值±標準偏差。

      采用Tbtools軟件對數(shù)據(jù)進行聚類熱圖分析。

      2 結果與分析

      2.1 3個核桃品種葉片特征氣味定性

      研究表明,3個核桃品種葉片通過GC-IMS共檢測出59種揮發(fā)性成分,其中酯類13種、醛類11種、醇類15種、酮類4種、萜烯類13種、酸類1種、其他類3種,且檢測出的59中化合物包含7對單體與二聚體。在檢測的物質中其中醇類和酯類共有28種,醇類和酯類是核桃葉片主要的揮發(fā)成分。相同揮發(fā)性物質在3個核桃品種葉片中存在顯著差異。在核桃葉片的揮發(fā)性物質及各揮發(fā)性物質的峰強度信息,峰強度越大,表示該物質的相對濃度越高;山核桃樣品中的揮發(fā)性物質成分3-甲基丁醛、丁二酮、1,8-桉葉素、α-松油烯、水芹烯等物質的含量較高,且3-甲基丁醛、丁二酮、1,8-桉葉素、α-松油烯、水芹烯分別在山核桃、溫185、美國紅核桃中的物質濃度均存在差異,美國紅核桃中丁二酮濃度含量明顯高于山核桃,可通過樣品中酮類物質濃度和萜烯類物質濃度的高低來區(qū)分山核桃與美國紅核桃。3個核桃品種葉片中揮發(fā)性物質在圖中的峰數(shù)和峰位大致相同,溫185葉片中揮發(fā)性物質成分以(E,E)-2,4-辛二烯醛、2-乙基-3,5-二甲基吡嗪、1-己醇、E-2-戊烯醛、2-乙基呋喃、2,5-二甲基呋喃、1-丙醇、α-水芹烯、水楊酸甲酯等物質為主;且隨著運行時間規(guī)律性升高些許揮發(fā)性物質濃度降低;美國紅核桃葉片中揮發(fā)性物質中芳樟醇、β-羅勒烯、檸檬烯、月桂烯、β-蒎烯、莰烯、α-蒎烯、(E,Z)-2,6-壬二烯醛、庚醛、2-甲基丁酸乙酯、2-甲基丙酸乙酯、3-甲基戊醇、異戊醇、2,3-丁二酮、丙酮、2-丁酮、乙縮醛等物質的含量較高;且與山核桃和溫185均有明顯差異,濃度含量均高于其他兩個品種。圖1、表2

      注:A、B、C分別代表山核桃、溫185和美國紅核桃,下同

      表2 不同品種核桃葉片揮發(fā)性成分及其差異

      2.2 3個核桃品種葉片揮發(fā)性物質特征

      研究表明,3個核桃品種葉片的峰數(shù)和峰位大致相同,其中樣品A為山核桃,樣品B為溫185、樣品C為美國紅核桃。溫185中揮發(fā)性物質成分以(E,E)-2,4-辛二烯醛、2-乙基-3,5-二甲基吡嗪、1-己醇、E-2-戊烯醛、2-乙基呋喃、2,5-二甲基呋喃、1-丙醇、α-水芹烯、水楊酸甲酯等物質為主;且隨著運行時間規(guī)律性升高溫185葉片中些許揮發(fā)性物質濃度降低;美國紅核桃葉片中揮發(fā)性物質中芳樟醇、β-羅勒烯、檸檬烯、月桂烯、β-蒎烯、莰烯、α-蒎烯、(E,Z)-2,6-壬二烯醛、庚醛、2-甲基丁酸乙酯、2-甲基丙酸乙酯、3-甲基戊醇、異戊醇、2,3-丁二酮、丙酮、2-丁酮、乙縮醛等物質的含量較高;且與山核桃和溫185均有明顯差異,濃度含量均高于其他兩個樣品。圖1

      續(xù)表2 不同品種核桃葉片揮發(fā)性成分及其差異

      2.3 3個核桃品種特征氣味離子遷移色譜(GC-IMS)指紋圖譜

      研究表明,峰整體相對3個不同品種核桃較為相似,溫185(樣品B)較山核桃(樣品A)和美國紅核桃(樣品C)中的揮發(fā)性化合物較為豐富。

      二維譜圖與三維譜圖相比,橫坐標1.0紅色豎線處為RIP峰,縱坐標代表氣相色譜保留時間(s),橫坐標代表離子遷移時間(經(jīng)歸一化處理),RIP峰兩側的每一個點代表一種揮發(fā)性物質,點的顏色為白色或近似藍色代表化合物物質濃度較低,點的顏色為紅色代表物質濃度較高且豐富。山核桃、溫185和美國紅核桃特征揮發(fā)組分可以通過GC-IMS技術很好的分離。溫185葉片中揮發(fā)性物質含量要多于山核桃和美國紅核桃,且山核桃和美國紅核桃揮發(fā)性物質保留時間在500S以內。圖2,圖3

      圖2 不同核桃葉片揮發(fā)性有機物的GC-IMS三維圖譜

      圖3 核桃葉片氣象離子遷移譜

      選取美國紅核桃(樣品C)作為參比,其他樣品的譜圖扣減參比。其中樣品A為山核桃,樣品B為溫185,樣品C為美國紅核桃。如果二者揮發(fā)性有機物一致,則扣減后的背景為白色,而紅色代表該物質的濃度高于參比,藍色代表該物質的濃度低于參比。將美國紅核桃扣除背景時,山核桃和溫185中有較多紅色斑點,其中溫185較之山核桃揮發(fā)性物質豐富,溫185中揮發(fā)性物質較多且豐富,山核桃與美國紅核桃中的揮發(fā)性物質有明顯差異,山核桃與美國紅核桃的揮發(fā)性物質濃度對比差異較為明顯,美國紅核桃中化合物含量明顯高于山核桃(樣品A),3個不同核桃品種揮發(fā)性物質特征圖譜存在差異。圖4

      圖4 三種核桃葉片GC-IMS差圖譜

      2.4 3種核桃揮發(fā)性物質指紋圖譜

      研究表明,每種樣品完整揮發(fā)性有機物信息以及樣品之間揮發(fā)性有機物的差異。圖中未檢測出化合物定性的用數(shù)字替代,其中以檢測出已知定性揮發(fā)性物質59種, 未知化合物13種, 排列時將變化規(guī)律相似地排列在一起,并根據(jù)不同樣品將其編號為A、B、C 3個位置。

      紅色框A區(qū)中為山核桃(樣品A)揮發(fā)性物質,其中桉葉油醇、異丁醇、β蒎烯物質濃度較為豐富,且含量明顯高于樣品B和樣品C,圖中黃色框代表溫185(樣品B)所含揮發(fā)性物質濃度差異,黃色框中所含物質在溫185中較為明顯,且與其他兩個樣品有明顯差異,B區(qū)物質中水楊酸甲酯、2,5-二甲基呋喃、2-乙基呋喃、反式-2-戊烯醇、正乙醇、2,4-己二烯醛等化合物濃度明顯高于其他兩個樣品,其中水楊酸甲酯中的濃度含量雖低但明顯比樣品A和樣品C豐富,且差異較大;2,5-二甲基呋喃、2-乙基呋喃、反式-2-戊烯醇中物質濃度與山核桃中所含其物質濃度含量差異較小,但與美國紅核桃有著明顯差異,C區(qū)是綠色方框,其所代表樣品為美國紅核桃(樣品C),在美國紅核桃中,其中乙縮醛二乙醇、丁酮、丙酮、丁二酮、異戊醇、異丁醇二聚體、2-異丁酸乙酯、庚醛等物質在綠色框中顏色相對其他兩個品種顏色較深,這些物質中的化合物濃度含量較為豐富且明顯高于其他兩個樣品。在3個核桃品種葉片所含揮發(fā)性物質如丁二酮、3-甲基丁醛、β蒎烯等物質在指紋圖譜中的顏色逐漸變淺或消失,2-異丁酸乙酯、異戊醇、異丁醇、桉葉油醇、異丁醇等不同醇類物質含量逐漸增加,且這些物質在美國紅核桃中含量較高,溫185和山核桃次之。圖5

      圖5 3種核桃葉片中揮發(fā)性有機物的Gallery Plot

      2.5 3個核桃品種葉片揮發(fā)性物質成分定量

      研究表明,酯類揮發(fā)性物質在溫185中含量最高,相對含量達11.63%,山核桃中醇類物質含量較小,與溫185差異較大,僅達3.87%,山核桃在醛類和醇類中相對含量較高,為24.69%和36.14%,溫185在醛類和醇類中的相對含量為20.44%、26.08%,與山核桃相對含量相比次之,美國紅核桃中醇類和醛類中的含量與山核桃相比差異較大,相對含量為13.5%、22.12%。在萜烯類中美國紅核桃相對含量較高為42.03%,山核桃為20.06%,與溫185相比相對含量有明顯差異,為2.22%;萜烯類物質可作為區(qū)分3個核桃品種葉片揮發(fā)性物質成分定量標準之一。山核桃、溫185和美國紅核桃在酮類中含量相對其他含量較低,為5.47%、5.13%和7.95%。而其他類中揮發(fā)性物質含量在山核桃、溫185和美國紅核桃中含量與酮類差異較小,為9.96%、8.01%和3.7%;在其他類中山核桃相對含量與美國紅核桃有較大差異。表3,圖6

      續(xù)表3 不同核桃葉片揮發(fā)性有機物相對含量

      圖6 不同核桃葉片揮發(fā)性物質相對含量差異比較

      表3 不同核桃葉片揮發(fā)性有機物相對含量

      在酯類揮發(fā)性物質中,山核桃、溫185和美國紅核桃在酯類氣味物質中乙酸乙酯相對含量分別達到峰值,為1.28%、3.72%和6.8%;在醛類氣味物質中2-己烯醛在16.46%、12.92%和6.93%時揮發(fā)性物質相對含量達到峰值,在醇類物質中山核桃和溫185在桉葉油醇中含量較高,與其他醇類物質相比有較大差異且達到峰值,相對含量為14.52%和7.67%。美國紅核桃中乙醇含量較高并達到峰值,相對含量為8.85%。酮類物質中丙酮含量分別在山核桃、溫185、美國紅核桃中的相對含量達到最高峰,為3.59%、3.63%和5.53%;美國紅核桃在萜烯類物質中其相對含量高于山核桃和溫185,并在β-蒎烯二聚體和α- 蒎烯二聚體中達到最大值,相對含量分別為8.84%和6.98%,溫185次之,相對含量為6.48%、4.58%。山核桃在β-蒎烯的風味物質相對含量較高,為7.23%。山核桃、溫185和美國紅核桃在其他類中2,5-二甲基呋喃的風味物質含量較高,相對含量分別為7.67%、5.86%和3.25%。圖7

      圖7 不同種類揮發(fā)性物質在不同核桃葉片中相對含量

      2.6 3個核桃品種揮發(fā)性氣味物質熱圖

      研究表明,峰強度越大物質含量豐富,濃度越高。樣品中揮發(fā)性物質含量越高顏色越紅,藍色代表該樣品中物質含量較低,不同樣品相同物質含量之間差異程度。3種不同核桃葉片樣品可聚為3類,且甲基庚烯酮、1-戊醇、正已醇和正已酸乙酯在山核桃中含量均較低,在溫185中揮發(fā)性物質含量較高;美國紅核桃中乙縮醛二乙醇、2-異丁酸乙酯、乙酸異丁酯、異戊醇等在熱圖中顏色偏紅,在美國紅核桃中此類風味物質較與溫185和山核桃相比較為豐富;2,4-已二烯醛、醋酸正戊酯、乙酸異丁酯、反式-2-戊烯醇、異丁醇二聚體、1-戊醇、甲基庚烯酮等風味物質含量在溫185中含量較高,且與山核桃和美國紅核桃有明顯差異,相同揮發(fā)性物質在不同品種中的含量有所差異。圖8

      圖8 不同核桃葉片揮發(fā)性成分聚類熱圖

      2.7 3個核桃品種揮發(fā)性風味物質主成分

      研究表明,黑色點為山核桃樣品,紅色點為溫185樣品、綠色為美國紅核桃葉片樣品,其中PC1的貢獻率為53.7%,PC2的貢獻率為34.5%,二者累計貢獻率達88.2%,相同種類樣品聚在一起,試驗重復性較好,而不同種類的核桃葉片樣品間相隔較遠,且樣品之間沒有重疊,采用GC-IMS技術結合主成分分析法能夠較好地從揮發(fā)性物質組成上判別和區(qū)分不同品種核桃葉片。溫185和美國紅核桃二者距離較近,2個不同品種核桃葉片中的風味物質較為相似,山核桃較之美國紅核桃及溫185距離較遠。圖9

      圖9 不同核桃葉片PCA分析

      3 討 論

      3.1通過GC-MS對核桃葉片揮發(fā)性物質檢測出色譜峰30個,鑒定出已知化合物20種,其余化學成分因質譜信息不足未能確認其結構[16]。陳友吾等[13]通過GC-MS對兩種不同核桃葉片中揮發(fā)性物質檢測,共檢出揮發(fā)性化合物質35種。其中揮發(fā)性物質種類少,含量低且不同品種間揮發(fā)性物質差異較小。目前,風味化學物質的檢測設備多、樣本量大且時間長,另外,揮發(fā)性物質的釋放以及對氣味的感知隨著外界因素以及內在因素的延長而改變,且風味物質的分析、檢測以及鑒定需要快速和無破壞性分析技術。與目前流行GC-MS相比,GC-IMS具有檢測速度快、操作方便、環(huán)保等操作特點[29,30],也可對不同樣品揮發(fā)性成分差異對此進行明確分類[31],且樣品的原始狀態(tài)能夠很原始的展示出來,更能提高分辨率。酮類包括丁二酮、2-丙酮等,且酮類的揮發(fā)性物質主要來自脂肪氧化和美拉德反應[28]。目前研究者利用GC-MS檢測核桃葉片中揮發(fā)性物質僅檢測出醇類、酯類等化合物,一些含量較少如酸類及萜烯類等物質較難檢測出來。GC-IMS可檢測到更多化合物,趙玲等[32]通過對銀鮭不同部位肌肉營養(yǎng)物質進行檢測,結果表明除檢測出較為常見的幾種揮發(fā)性物質,還利用GC-IMS檢測出硫化合物等物質,共檢測出33種揮發(fā)性成分,且在不同部位的揮發(fā)性物質差異明顯,為特征揮發(fā)性物質描述提供完整畫面,此外,還可提供清晰的色譜圖和質譜以及質譜附加信息,以根據(jù)不同揮發(fā)性物質差異區(qū)分不同核桃品種葉片差異。

      3.2在GC-IMS中檢測出的數(shù)據(jù)對此進行定性及定量分析,數(shù)據(jù)參照標準為保留時間、漂移時間及不同品種峰體積;經(jīng)GC-IMS分析后,在山核桃、溫185和美國紅核桃不同品種核桃葉片中共檢測到59種化合物,且已知其化合物化學結構,徐效圣等[33]運用GC-MS對新豐揮發(fā)性物質進行分析,共檢測出17種風味物質,包括醇類、醛類、酯類等化合物;胡玉霞等[34]運用GC-IMS對核桃的風味物質進行定性分析,共檢測出醛類、醇類、酯類等53種化合物,醛類、醇類、酯類等物質是核桃中主要的化學成分。且根據(jù)分析GC-IMS相對GC-MS來說操作更為簡單,且對不同品種中風味物質種類及含量的檢測更為細致,試驗利用GC-IMS對3個核桃品種葉片中風味物質進行檢測并分析,其中檢測出酯類13種、醛類11種、醇類15種、萜烯類13種、其他類3種、酮類5種及酸類物質1種,與上述研究結果一致,但酸類物質及酮類物質相對含量較少,未鑒定出揮發(fā)性物質中應該含有少量酸類物質及酮類物質。

      3.3王茹等[25]利用GC-IMS法對8個不同核桃葉片揮發(fā)性物質分析發(fā)現(xiàn),不同樣品有明顯差異,溫185和美國紅核桃屬胡桃屬相對于山核桃來說差異較小,通過不同化合物在其中相對含量的高低可明顯區(qū)別開來。張文君等[35]對不同產(chǎn)地翠冠梨果的GC-IMS揮發(fā)性物質指紋圖譜差異分析,經(jīng)研究并鑒定得揮發(fā)性物質有酯類、醇類、醛類及酮類等物質43種,且香氣因翠冠梨果的產(chǎn)地不同而有明顯差異。趙明等[36]利用GC-MS對不同香蕉品種果實香氣品質進行分析,研究表明不同品種間果實香氣存在差異且含量有所不同;孟祥春等[37]利用GC-IMS對5個不同品種荔枝揮發(fā)性物質差異性進行比較分析,結果表明不同品種荔枝揮發(fā)性成分有明顯且獨立的特征峰區(qū)域,可通過揮發(fā)性物質較好區(qū)分不同荔枝品種。基于此,由研究結果得知,不同品種核桃葉片中揮發(fā)性物質成分有較大差異,且核桃葉片中揮發(fā)性物質因親緣關系遠近而有所差異。核桃葉片因氣候環(huán)境因子、自身枝條生長條件不同生長發(fā)育也有所差異,因此研究采用固定樣地、樹齡條件、枝條對此進行采樣,通過GC-IMS技術方法對3個不同核桃葉片揮發(fā)性物質進行分析,可區(qū)分不同核桃品種,為下一步區(qū)分不同核桃品種提供科學依據(jù)。

      4 結 論

      共檢測出59種化合物質,包括酯類12種、醛類11種、醇類15種、酮類4種、酸類1種、萜烯類13種及其他類3種,其中山核桃在醇類(36.14%)和醛類(24.69%)中含量較高,山核桃在醇類物質中呈現(xiàn)上升后快速下降后緩慢回升趨勢,且在14.52%時達到峰值,在醛類揮發(fā)性物質中先趨于平穩(wěn)狀態(tài)后快速上升、下降有緩慢回升,峰值為12.92%;溫185在酯類、醛類、醇類中含量較高,相對濃度含量為11.63%、20.44%和26.08%,其中在酯類物質、醛類及醇類中分別在3.72%、12.92%和7.67%達到峰值,且與山核桃和美國紅核桃有較大差異;美國紅核桃在醇類和萜烯類中含量比山核桃和溫185較高,為22.12%和42.03%,且在相對含量為5.59%和6.48%時達到最高峰。核桃葉片中醇類、酯類、醛類中揮發(fā)性物質含量較高,萜烯類中美國紅核桃含量較高,并與山核桃有較大差異。

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