摘 要：為探究EM菌對越冬期間雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”養(yǎng)殖池水質、生長性能及非特異性疫指標的影響，分別采用潑灑、拌料兩種方式，使用EM菌飼養(yǎng)雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”［體質量（10.35±1.23）g，體長（8.5±0.4）cm］，進行了42 d的飼養(yǎng)對比試驗。結果顯示：養(yǎng)殖期間采用潑灑方式使用EM菌，該組養(yǎng)殖水體的溶解氧含量高于拌料使用EM菌組和對照組，氨氮和亞硝酸鹽含量始終低于拌料使用EM菌組和對照組；拌料使用EM菌組雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”的存活率、增重率和特定生長率要高于另外兩組，且臟體指數(shù)和肝體指數(shù)低于另外兩組；兩個使用EM菌試驗組的酸性磷酸酶活性、堿性磷酸酶活性、超氧化物歧化酶活性和溶菌酶活性均顯著高于對照組（P＜0.05），且拌料組尤為顯著。試驗結果表明，使用EM菌能在一定程度上改善越冬期間養(yǎng)殖池的水質，對雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”生長具有明顯的促進作用，并可增強其越冬后的非特異性疫功能。

關鍵詞：雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”；越冬；疫；生長；酶活

雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”（Pelteobagrus vachelli♂×Pelteobagrus fulvidraco♀）（GS-02-001-2018）是以二代選育的瓦氏黃顙魚為父本、三代選育的黃顙魚為母本雜交獲得的新品種，于2018年通過全國水產原種和良種審定委員會審定。該品種體型、色澤與普通黃顙魚相似，具有攝食旺盛、飼料利用率高、規(guī)格整齊、養(yǎng)殖成活率高等優(yōu)點，其苗種培育階段的存活率相比普通黃顙魚提高了30.04%～31.39%［1］；生長速度和成活率均高于母本黃顙魚，與父本瓦氏黃顙魚相比，肉質更厚肥，更耐運輸，因而受到廣大養(yǎng)殖戶和消費者的喜愛，目前已成為我國重要的優(yōu)質養(yǎng)殖水產品種。但是，目前雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”養(yǎng)殖也面臨著諸多問題，集中表現(xiàn)在病害防控、水質調控以及苗種越冬上［2］。自2020年起，華東和華中地區(qū)的養(yǎng)殖雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”發(fā)生“開春暴死”事件，嚴重打擊了整個黃顙魚養(yǎng)殖業(yè)，因此黃顙魚越冬期間的疾病預防和飼養(yǎng)管理變得格外重要。

微生態(tài)制劑（probiotics）是運用微生態(tài)學原理，利用對宿主有益無害的益生菌或益生菌的促生長物質，經(jīng)特殊工藝制成的制劑，包括益生菌活菌、死菌及其代謝產物。微生態(tài)制劑可用于調整微生態(tài)失調，保持微生態(tài)平衡，提高機體健康水平，能以自然的方式改善宿主生物的整體健康狀況，以達到防病、治病效果［3］。按組成成分，可將微生態(tài)制劑分為益生菌、益生元、合生元［4］。微生態(tài)制劑常作為營養(yǎng)性飼料添加劑應用于水產養(yǎng)殖中。EM菌（effective microorganisms）是一種新型復合微生物活性菌劑［5-6］，由光合細菌、乳酸菌、酵母菌、放線菌、芽孢桿菌等微生物復合培養(yǎng)而成［7］。大量研究證明，EM菌能排斥病原菌和有害細菌的生長，使得有益菌種占優(yōu)勢［8］，EM菌可在調控池塘水質、提高魚體疫力方面發(fā)揮重要作用［9-10］。

為探究EM菌對越冬期間雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”養(yǎng)殖池水質、生長性能及非特異性疫指標的影響，本研究采用在飼料中添加EM菌和在養(yǎng)殖池潑灑EM菌兩種方式進行了雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”飼養(yǎng)試驗，通過測定養(yǎng)殖池水質、魚的生長性能及非特異性疫活性等指標，評價兩種方式使用EM菌對雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”越冬期間的疫增強作用，確定使用EM菌的最優(yōu)方式，以期為雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”越冬期間健康養(yǎng)殖提供參考。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

試驗用EM菌購自江蘇恒泰環(huán)?？萍及l(fā)展有限公司，pH在3.0～4.0，其中乳酸菌數(shù)1.0×107～1.0×108 CFU/L，酵母菌數(shù)1.0×104～1.0×105 CFU/L，光合菌數(shù)1.0×103～2.0×103 CFU/L，放線菌數(shù)1.0×103～3.0×103 CFU/L，菌種數(shù)＞80種，代謝物＞10%。

雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”苗種來自南京市水產科學研究所祿口基地。選擇規(guī)格一致、健康無病的魚進行試驗，試驗魚體質量（10.35±1.23）g，體長（8.5±0.4）cm。

黃顙魚專用飼料購自南山飼料淮安有限公司?；A飼料組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.2 試驗分組及飼養(yǎng)

試驗共設3個組，其中Ⅰ組為對照組，Ⅱ、Ⅲ組為試驗組，分別采用池塘潑灑（添加劑量7 500 mL/hm2）和拌料投喂（添加劑量為5%）的方式使用EM菌，每組設3個平行。

試驗在長14.0 m、寬4.0 m、高1.5 m的水泥池中進行。試驗前進行干池、晾曬，注入新水后用聚維酮碘進行消毒處理，水深1.2 m。試驗用水來自祿口基地水源塘口，達到養(yǎng)殖水質標準。試驗雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”共1 350尾，每150尾魚放入1口水泥池。每日投喂2次，投飼量根據(jù)天氣情況、魚的活動和生長情況等進行調整，每天觀察并記錄魚的攝食和存活情況。

本試驗在南京市水產科學研究所祿口基地進行，共42 d。

1.3 試驗方法

1.3.1 水質指標的檢測

試驗開始后，每7 d采集1次各養(yǎng)殖試驗池的水樣，測定pH、溶解氧、氨氮、亞硝態(tài)氮等水質指標。其中，溶解氧和pH采用哈希HQ40D便攜式水質分析儀進行測定；氨氮采用納氏試劑比色法（GB/T 7479—1987）進行測定；亞硝態(tài)氮采用分光光度法（GB/T 7493—1987）進行測定。

1.3.2 生長指標的測定

于試驗開始前1天以及試驗開始后的第14、28、42天，從每口養(yǎng)殖池隨機取樣30尾魚，測定其體質量、體長、肝臟及內臟質量。試驗結束時統(tǒng)計存活試驗魚的尾數(shù)，計算成活率（RS，%）。

根據(jù)下列公式計算增重率（RWG，%）、特定生長率（RSG，%/d）。

RWG=100%×（Wt-W0）/W0 （1）

RSG=100%×（lnWt-lnW0）/t（2）

式（1）～（2）中，Wt表示養(yǎng)殖t天時的體質量，g；W0表示試驗開始時的體質量，g。

將隨機取樣的試驗魚解剖后，將內臟、肝臟稱量，計算肝體指數(shù)（IHS，%）和臟體指數(shù)（IVS，%），并計算肥滿度（CF），公式如下：

CF=100×W/L3（3）

IHS=100%×W肝臟/W （4）

IVS=100%×W內臟/W（5）

式（3）～（5）中，W表示魚體質量，g；L表示魚的體長，cm；W肝臟表示肝臟質量，g；W內臟表示內臟質量，g。

1.3.3 疫指標的測定

在進行生長指標的測定取樣時，取10尾魚進行尾動脈體側取血，將抽取的血樣注入離心管中，所有操作均在冰面上進行。離心管中的血樣于4 ℃下靜置、過夜。將血樣離心15 min后，收集上層血清，置于4 ℃冰箱中保存，待用。測定的非特異性疫指標有血清溶菌酶活性、超氧化物歧化酶活性、堿性磷酸酶活性和酸性磷酸酶活性，均采用南京建成生物科技有限公司的試劑盒進行檢測。

1.4 數(shù)據(jù)處理和分析

試驗數(shù)據(jù)以平均值±標準差表示。采用EXCEL 365和SPSS 22.0軟件進行單因素方差分析（one-way ANOVA）處理，用Duncan’s多重比較分析方法對試驗結果進行顯著性檢驗，設Plt;0.05為差異顯著。

2 結果和分析

2.1 EM菌對雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”養(yǎng)殖池水質的影響

3個試驗組養(yǎng)殖池的水質指標變化情況見圖1。由圖1可見，整個試驗過程中，試驗組（Ⅱ、Ⅲ組）的pH始終高于對照組（Ⅰ組），且在試驗后期（第28天起），對照組水體的pH顯著低于試驗組（P＜0.05），兩個試驗組之間則沒有顯著差異（P＞0.05）；試驗過程中3個試驗組水體溶解氧差異不顯著（P＞0.05）；隨著試驗的進行，3組水體中氨氮和亞硝態(tài)氮的含量都呈現(xiàn)先上升、后降低的態(tài)勢，但在養(yǎng)殖后期（第28天起），潑灑EM菌的試驗組Ⅱ水體氨氮含量顯著低于拌料使用EM菌的試驗組Ⅲ和對照組（P＜0.05），對照組的亞硝態(tài)氮含量顯著高于試驗組（P＜0.05）；整個試驗過程中，3組水體的水溫沒有顯著性差異（P＞0.05）。

2.2 EM菌對雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”生長性能的影響

2.2.1 增重率

3個試驗組雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”的增重率情況見表2。從結果可以看出，使用EM菌的兩個試驗組，試驗魚最終的增重率均顯著高于對照組（P＜0.05）；而拌料投喂EM菌的試驗組Ⅲ的增重率略高于潑灑EM菌的試驗組Ⅱ，但兩個組之間差異不顯著（P＞0.05）。

2.2.2 特定生長率

EM菌對雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”特定生長率的影響見表3。由結果可見，使用EM菌能明顯提高雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”的特定生長率，使用EM菌的兩個試驗組，其最終的特定生長率均顯著高于對照組（P＜0.05），尤其是采用拌料投喂的方式，在試驗的0～14 d和0～42 d，拌料投喂EM菌的試驗組Ⅲ的特定生長率顯著高于對照組（P＜0.05），而在試驗的14～28 d和28～42 d，3個組的特定生長率差異不顯著（P＞0.05）。

2.2.3 成活率、肝體指數(shù)、臟體指數(shù)及肥滿度

EM菌對雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”成活率和形體指標的影響見圖2。試驗結束時，使用EM菌的兩個試驗組的成活率均顯著高于對照組（P＜0.05），其中拌料投喂EM菌的試驗組Ⅲ成活率最高，但與潑灑EM菌的試驗組Ⅱ之間差異不顯著（P＞0.05）。養(yǎng)殖過程中，3組試驗魚的肥滿度均呈上升趨勢，養(yǎng)殖結束時，兩個試驗組魚的肥滿度均高于對照組，但差異不顯著（P＞0.05）；隨著試驗進行，試驗組雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”的肝體指數(shù)和臟體指數(shù)呈下降趨勢，從試驗第28天開始，兩個試驗組的肝體指數(shù)和臟體指數(shù)均顯著低于對照組（P＜0.05），其中拌料投喂EM菌的試驗組Ⅲ的肝體指數(shù)和臟體指數(shù)最低。

2.3 EM菌對雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”非特異性疫機能的影響

2.3.1 血清溶菌酶活性

EM菌對雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”血清溶菌酶活性的影響見表4。整個試驗期間，拌料投喂EM菌的試驗組Ⅲ，其雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”的溶菌酶活性均顯著高于對照組和潑灑EM菌的試驗組Ⅱ（P＜0.05），而試驗組Ⅱ與對照組之間差異不顯著（P＞0.05）。

2.3.2 超氧化物歧化酶活性

EM菌對雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”血清超氧化物歧化酶活性的影響見表5。整個試驗期間，拌料投喂EM菌的試驗組Ⅲ，其雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”的超氧化物歧化酶活性均顯著高于其他兩組（P＜0.05），而潑灑EM菌的試驗組Ⅱ在42 d時的超氧化物歧化酶活性顯著高于對照組（P＜0.05）。

2.3.3 堿性磷酸酶活性

EM菌對雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”血清堿性磷酸酶活性的影響見表6。從試驗結果看，使用EM菌能提高雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”血清中堿性磷酸酶的活性。在試驗第28 d和42 d時，拌料投喂EM菌的試驗組Ⅲ的堿性磷酸酶活性顯著高于對照組（P＜0.05）。

2.3.4 酸性磷酸酶活性

EM菌對雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”血清酸性磷酸酶活性的影響見表7。從試驗結果看，使用EM菌能顯著提高雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”血清中酸性磷酸酶的活性。試驗過程中，兩個EM菌試驗組雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”的血清酸性磷酸酶活性呈現(xiàn)先上升后下降的態(tài)勢，第14天時，3組試驗魚血清酸性磷酸酶的活性即出現(xiàn)顯著性差異（P＜0.05）；試驗第28天和第42天時，兩個EM菌試驗組雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”的酸性磷酸酶活性顯著高于對照組（P＜0.05），其中拌料投喂EM菌的試驗組Ⅲ最高。

3 討論

3.1 EM菌對養(yǎng)殖池水質的影響

pH是養(yǎng)殖水質的主要指標之一。通常在養(yǎng)殖過程中，養(yǎng)殖水體的pH會逐漸降低，這主要是因為水體中的糞便、殘餌和死亡魚體等有機物質不斷積累，在厭氧菌的分解下，會產生大量有機酸，從而使池水的pH降低［11］。本試驗中，使用EM菌的試驗組水體的pH始終高于對照組，這是因為EM菌中的有益菌群在進入水體后可以快速分解養(yǎng)殖動物的代謝物及殘餌等有機物，使得水體中不會產生大量有機酸。這與馬江耀等［12］得到的EM菌能提高池塘水體pH的結果相一致。

養(yǎng)殖水體中的溶解氧是水產動物生長和生存的限制因子［13］。本試驗中，3組養(yǎng)殖池水體的溶解氧含量均呈現(xiàn)先降低后上升的趨勢，這可能是因為試驗開始后，魚體生長會消耗水中的溶解氧，另外EM菌中的放線菌等屬于好氧菌，對水中氧氣有所需求，導致養(yǎng)殖水體中的溶解氧含量有所降低。隨著越冬養(yǎng)殖試驗的進行，水溫逐漸降低，試驗魚攝食等活動減少，對水體溶解氧的需求也降低了，因而溶解氧含量有所回升。整個養(yǎng)殖期間，使用EM菌的試驗組，其養(yǎng)殖水體溶解氧的含量要高于對照組，可能是因為使用EM菌后，光合細菌大量繁殖，在白天進行光合作用，釋放出大量氧氣，增加了水體中的溶解氧。這與李躍華等［14］報道的微生物制劑對青蝦（Macrobrachium nipponense）池塘水質影響的研究結果相一致，說明EM菌能明顯提高養(yǎng)殖水體中的溶解氧含量。

氨氮是衡量養(yǎng)殖水體污染程度的重要指標之一［15］。本試驗中，隨著時間推移，池水中氨氮的含量不斷上升，但使用EM菌的試驗組，其養(yǎng)殖水體中的氨氮含量始終低于對照組。這是因為養(yǎng)殖水體中的殘餌和糞便等分解后使水體的氨氮含量不斷升高，而使用EM菌后，菌群可以利用水體中的含氮有機物，光合細菌又可以直接有效地吸收利用水體中的小分子含氮化合物，EM菌還能通過抑制水體中有害菌的生長繁殖，促進有益菌的繁殖，從而有效降低水體中的氨氮含量。另外，拌料投喂使用EM菌能改善魚體的腸道菌群，提高飼料利用率，減少殘余餌料對水體的影響。高征等［15］、吳秀林等［16］都進行過有關EM菌調節(jié)養(yǎng)殖池塘水質的研究，證明EM菌能有效降低池塘水體的氨氮含量，與本研究結果相一致。

亞硝酸鹽是養(yǎng)殖水體中氨氮轉化成硝酸鹽過程中很不穩(wěn)定的中間產物［17］。本試驗中，因不斷投喂飼料和魚體排泄糞便，3組試驗水體的亞硝態(tài)氮含量不斷升高，但使用EM菌的試驗組，其水體中的亞硝態(tài)氮含量略低于對照組，說明EM菌能一定程度上降低水體亞硝酸鹽含量，這可能是因為EM菌中的芽孢桿菌等菌群加速了對水體中有機物的分解，從而達到凈化水質的效果［18］。

3.2 EM菌對雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”生長特性的影響

本試驗結束時，使用EM菌的試驗組雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”的增重率、特定生長率均顯著高于對照組（P＜0.05）。這可能是因為拌料飼喂或者潑灑使用EM菌能促進黃顙魚腸道有益菌群的繁殖，調整腸道生態(tài)環(huán)境，提高魚體的消化機能［19］。童春等［20］報道，在飼料中添加EM菌等微生態(tài)制劑對淡水白鯧（Colossoma brachypomum）具有顯著的促生長作用，這與本試驗結果相一致。于東祥等［21］對真鯛幼魚（Pagrus major）、常青等［22］對花鱸（Lateolabrax maculatus）、Shiau等［23］對羅非魚（Oreochromis niloticus×O.aureus）、華雪銘等［24］對暗紋東方鲀（Takifugu obscurus）的研究都得出了類似的結論。

魚類在一定時期內的形體指標可以通過肥滿度、肝體指數(shù)和臟體指數(shù)來反映。具有較好形體特征的商品魚越來越受到市場的青睞，市場售價也具有優(yōu)勢［25-26］。本試驗結果顯示，使用EM菌的雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”的肝體指數(shù)和臟體指數(shù)顯著低于對照組（P＜0.05），這可能是因為EM菌中的菌群大量繁殖，并與膽酸發(fā)生反應，促進了飼料的消化吸收，從而減少了魚體肝臟上脂肪的形成，降低了肝體比［27］。目前關于使用EM菌降低魚類肝體指數(shù)和臟體指數(shù)的報道有很多，如飼料中添加EM菌能降低淡水白鯧的臟體指數(shù)和肝體指數(shù)［20］；隨著EM菌等微生態(tài)制劑添加量的增加，草魚（Ctenopharyngodon idella）的臟體指數(shù)不斷降低［28］；添加微生態(tài)制劑能降低建鯉（Cyprinus carpiovar var. Jian）的肝胰臟指數(shù)［29］。這與本研究的結果一致，都印證了飼料中添加EM菌能提高魚體肝臟脂肪代謝效率，降低肝臟的脂肪含量，減少體內脂肪含量，降低發(fā)病概率，提高魚體品質。

3.3 EM菌對雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”非特異性疫機能的影響

3.3.1 血清溶菌酶活性

溶菌酶是魚類血清中極為重要的非特異性疫指標之一［30-31］。溶菌酶是吞噬細胞殺菌的物質基礎，當血清中溶菌酶的活性提高時，機體的疫能力也會相應提高［32］。本試驗中，拌料投喂EM菌的試驗組Ⅲ，其雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”的溶菌酶活性均顯著高于對照組（P＜0.05），說明EM菌可能能夠激活吞噬細胞的吞噬功能，促使吞噬細胞產生淋巴因子，啟動疫系統(tǒng)，增強機體的抗感染能力。這一結果與對羅氏沼蝦（Macrobrachium rosenbergii）［32］、暗紋東方鲀［33］以及淡水白鯧［20］的研究結果相一致。說明在雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”越冬養(yǎng)殖期間使用EM菌能提高其溶菌酶活性，增強魚體的非特異性疫機能。

3.3.2 超氧化物歧化酶活性

超氧化物歧化酶活性是一種重要的抗氧化酶，對于增強巨噬細胞的防御功能和整個機體的疫機能有著重要作用［34］。本試驗中，拌料投喂EM菌的試驗組，其雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”的超氧化物歧化酶活性顯著高于對照組（P＜0.05）；潑灑EM菌的試驗組，其雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”的超氧化物歧化酶活性也在第42天時顯著高于對照組（P＜0.05），說明EM菌能增強雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”的超氧化物歧化酶活性，采用拌料投喂的方式效果尤佳。在已有研究中，添加微生態(tài)制劑均可提升淡水白鯧 ［20］、中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）［3］、仿刺參（Apostichopus japonicus）［35〗的超氧化物歧化酶活性，但是對于EM菌提高超氧化物歧化酶活性的作用機理還沒有明確的解釋，尚需進一步的研究探討。

3.3.3 堿性磷酸酶和酸性磷酸酶活性

堿性磷酸酶和酸性磷酸酶是溶酶體中重要的水解酶，也是重要的疫酶類，在疫系統(tǒng)中起重要作用，能分別在堿性和酸性條件下使磷酸單脂水解生成乙醇和磷酸，降解外源粒子［36］，因此，堿性磷酸酶和酸性磷酸酶成為評價水生生物疫水平的可靠指標［37］。本試驗結束時，使用EM菌的試驗組，其雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”的堿性磷酸酶和酸性磷酸酶活性都顯著高于對照組（P＜0.05），表明在拌飼投喂或者直接向養(yǎng)殖水體中潑灑EM菌對于提高雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”的疫力有一定促進作用，這與王維新［38］、李超等［39］的研究結果相一致。但在本試驗中，試驗組雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”的酸性磷酸酶活性在第28天時達到最高，之后有所降低，這可能與投喂時間和魚類疫反饋機制有一定關聯(lián)，雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”的體內可能存在某種機制調節(jié)這種酶的活性，這一猜測還需進一步試驗予以驗證。

本文研究了EM菌對越冬期間雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”養(yǎng)殖水質、魚的生長性能以及越冬后的疫指標的影響。研究結果表明，使用EM菌能在一定程度上改善雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號”養(yǎng)殖池的水質，對魚的生長性能具有明顯的促進作用，并能提高其越冬后的疫機能，其中拌料投喂使用EM菌的效果優(yōu)于潑灑使用EM菌。

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Effects of effective microorganisms（EM） on water quality， growth performance and non-specific immunity of hybrid yellow catfish “Huangyou-1”（Pelteobagrus vachelli♂×Pelteobagrus fulvidraco♀）

ZHANG Leiming1， LIU Wei1，2， ZHOU Guoqin1， MAO Jianqiang1， DAI Yafan1， PEI Xueying1， SHI Xiaolan1， XIE Bing1

（1. Institute of Fisheries Sciences of Nanjing，Nanjing 210036，China;

2. College of Fisheries，Huazhong Agricultural University，Wuhan 430070，China）

Abstract：To explore the effects of effective microorganisms（EM） on water quality，as well as growth performance and non-specific immunity of the hybrid yellow catfish “Huangyou-1”（Pelteobagrus vachelli♂×Pelteobagrus fulvidraco♀） during overwintering period，the hybrid yellow catfish “Huangyou-1”［body weight（10.35±1.23） g，body length（8.5±0.4） cm］ were fed with EM for 42 days.The results showed that the dissolved oxygen content in pond water of EM-splashed group was higher than that of the EM-mixed fodder group and the control group，and the ammonia nitrogen and nitrite content was always lower in EM-splashed group.The survival rate，weight gain rate and specific growth rate of fish in EM-mixed fodder group were higher than the other two groups，and the hepatosomatic index and viscerosomatic index were lower than the other two groups.The activities of acid phosphatase，alkaline phosphatase，superoxide dismutase and lysozyme of two EM-supplemented groups were significantly higher than the control group（Plt;0.05），and the EM-mixed fodder group was particularly significant.The results showed that the use of EM could improve water quality during wintering to a certain extent，and had a significant promotion on growth and non-specific immune function of hybrid yellow catfish “Huangyou 1” over wintering.

Key words： hybrid yellow catfish“Huangyou-1”; overwintering; immunity; growth; enzyme activity