肖海君 梅小偉

摘? 要：為了解全國主要養(yǎng)豬地區(qū)豬回腸炎感染情況，本調(diào)查使用熒光定量PCR技術(shù)對來自全國主要養(yǎng)豬地區(qū)169家豬場的1 667份糞便樣本進行胞內(nèi)勞森菌的檢測。結(jié)果顯示，在所有參試的豬場和送檢的糞便樣本中，胞內(nèi)勞森菌的陽性率分別達到了96.4％和86.0％；不同季節(jié)、不同區(qū)域、不同規(guī)模的豬場，胞內(nèi)勞森菌檢出率都超過80％；在各個生產(chǎn)階段，母豬的總體陽性率也普遍偏高；在13周齡和19周齡前后，保育-育肥豬的回腸炎感染壓稍高；不同糞便類型對應(yīng)的CT值也存在差異，血便中胞內(nèi)勞森菌的CT值最低。由此可見，胞內(nèi)勞森菌引起的回腸炎廣泛存在我國主要養(yǎng)豬地區(qū)。

關(guān)鍵詞：豬；胞內(nèi)勞森菌；回腸炎；感染

中圖分類號：S851.9 文獻標(biāo)志碼：A? ? ? ? ? ? 文章編號：1000769（2023）06-0102-06

豬增生性腸?。╬orcine proliferative enteropathy，PPE）又稱回腸炎，是由胞內(nèi)勞森菌（Lawsonia intracellularis，LI）引起的一種腸道傳染病。豬回腸炎在全球范圍內(nèi)分布廣泛，且感染率普遍較高，這奠定了其對豬群危害的普遍性[1]；豬感染后，胞內(nèi)勞森菌主要破壞小腸上皮細(xì)胞的完整性，影響腸道對營養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收；豬從感染到康復(fù)需要經(jīng)歷較長的時間，造成發(fā)病豬的消化吸收功能受影響的時間較長。另外，急性回腸炎會造成感染豬出現(xiàn)便血和急性猝死，病死率可達50％左右[2]。Scholz等[3]研究表明，發(fā)病豬的平均日增重降低了9％～35％，飼料報酬降低了6％～20％，經(jīng)常使相同日齡的保育-育肥豬表現(xiàn)出明顯的體重差異。養(yǎng)豬業(yè)應(yīng)重視回腸炎給豬場帶來的嚴(yán)重危害與經(jīng)濟損失[4]。截止到目前，針對豬回腸炎，生產(chǎn)現(xiàn)場主要還是使用敏感藥物或接種疫苗的方式來進行治療和預(yù)防?；啬c炎造成的經(jīng)濟損失因豬場的飼養(yǎng)規(guī)模以及所采用的生產(chǎn)模式和生物安全等因素的不同而差異巨大。根據(jù)豬的發(fā)病年齡及疾病進程，采用科學(xué)的方案組合可有效控制豬群的發(fā)病，及時止損。對特定豬群進行胞內(nèi)勞森菌感染的診斷與評估，以及及時執(zhí)行藥物或疫苗干預(yù)，對降低豬回腸炎造成的經(jīng)濟損失有著重要作用。為了高效控制胞內(nèi)勞森菌的感染，我們亟須全面調(diào)查豬回腸炎的流行病學(xué)，探索不同生產(chǎn)模式豬場的感染規(guī)律。

本調(diào)查擬對來自全國主要養(yǎng)豬地區(qū)的母豬與保育-育肥豬的糞便樣本進行檢測、分析，理清不同生產(chǎn)階段豬群與不同飼養(yǎng)模式下豬感染胞內(nèi)勞森菌的狀況，了解發(fā)病豬的臨床癥狀（正常糞便、水泥樣糞便、血便）與排菌量的關(guān)系，評估豬在各個生產(chǎn)階段胞內(nèi)勞森菌的感染壓，為科學(xué)、高效防控回腸炎提供依據(jù)。

1? 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣本來源

2022年9月至2023年7月，我們共收集來自全國26個省、市、自治區(qū)169家豬場的1 667份糞便樣本。按照糞便的形態(tài)對樣本進行分類，其中水泥樣糞便1 099份，正常糞便452份，血便67份，水樣糞便39份和其他類型糞便10份（圖1）。豬場規(guī)模主要集中在? 母豬存欄1 000～5 000頭，或保育-育肥豬存欄0～5 000頭。

1.1.2 試劑

胞內(nèi)勞森菌DNA提取試劑盒（Stool DNA Kit）為OMEGA公司生產(chǎn)，熒光定量PCR檢測試劑盒（Thermo VetMax? Lawsonia intracellularis kit）由賽默飛公司生產(chǎn)。

1.2 方法

DNA提取及熒光定量PCR操作步驟分別按照試劑盒說明書進行。

2? 結(jié)果與分析

2.1 豬場及糞便樣本的胞內(nèi)勞森菌檢出情況

使用針對胞內(nèi)勞森菌的熒光定量PCR試劑盒對來自全國169家豬場的1 667份糞便樣本進行檢測，其中陽性糞便樣本為1 433份，陽性率達86.0％；在提供糞便樣本的169家豬場中，糞便中檢測胞內(nèi)勞森菌的豬場有163家，豬場陽性率為96.4％；按月份統(tǒng)計了糞便樣本的胞內(nèi)勞森菌陽性率，發(fā)現(xiàn)陽性率61.5％～100.0％，其中1～7月份每月的陽性率均超過了80.0％（表1）。

2.2 全國各區(qū)域胞內(nèi)勞森菌檢出情況

表2統(tǒng)計了全國7大地區(qū)豬糞便中胞內(nèi)勞森菌檢出情況。表2顯示，華中地區(qū)的感染率稍低，為80.5％；華南、華東地區(qū)的陽性率分別為82.2％和87.2％；其他4個區(qū)域的陽性率都超過了90.0％，鑒于這幾個區(qū)域的總體樣本量偏少，這一結(jié)果可能不具有代表性。

2.3 豬場規(guī)模與胞內(nèi)勞森菌的檢出關(guān)系

不同規(guī)模的豬群胞內(nèi)勞森菌檢出結(jié)果見圖2。由圖2可知，存欄量為0～5 000頭的保育-育肥豬的商品豬場，糞便樣本胞內(nèi)勞森菌陽性率為83.1％；存欄量為5 000～10 000頭? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 及10 000頭以上的商品豬場，陽性率分別為89.5％和91.7％；另外，三種不同存欄規(guī)模的母豬場，陽性率變化不大，分別為78.8％，80.0％和88.2％（圖2）。

2.4 不同生產(chǎn)階段豬群胞內(nèi)勞森菌的感染情況

我們的調(diào)查結(jié)果顯示，保育豬、育肥豬和母豬的糞便胞內(nèi)勞森菌的陽性率都超過了80.0％（圖3）；后備母豬、妊娠母豬和哺乳母豬的糞便陽性率也普遍偏高，其中后備母豬的糞便CT值低于妊娠母豬的；各年齡段保育豬和育肥豬的糞便都能檢出，結(jié)合臨床表現(xiàn)及檢測結(jié)果，豬在13周齡和19周齡前后對回腸炎的感染壓較高。

2.5 糞便類型與CT值之間關(guān)系

在1 667份糞便樣本中，水泥樣糞便居多，為1 099份，其次是正常糞便452份，我們也收集了67份血便樣本?？傮w來看，從正常糞便中檢出胞內(nèi)勞森菌的概率小于水泥樣糞便及血便的概率，其中水泥樣糞便和正常糞便的陽性率分別為97.8％和55.5％（圖4）。從胞內(nèi)勞森菌的CT值來看，血便的CT值最低，平均為24.68，其次是水樣糞便，CT值為28.41，而水泥樣糞便的CT值則為34.13，正常糞便的CT值高于以上三種糞便的，為40.99（圖5）。不同類型的糞便對應(yīng)的CT值區(qū)間范圍也存在一定的差別，在正常糞便中，CT值大于35的比例達到了97％，其中超過40的為52％；而在水樣糞便中，它們的CT值都小于35；另外，在水泥樣糞便中，CT值介于30～35的比例最高，達到57％，CT值介于35～40的比例則是34％；而血便中，93％樣本的CT值都低于30（圖6）。

3? 結(jié)論

（1）全國26個省、市、自治區(qū)、直轄市169家豬場的1 667份糞便樣本進行胞內(nèi)勞森菌的檢測，樣本陽性率達到了86.0％，豬場陽性率為96.4％，與國外主要養(yǎng)豬區(qū)域豬場陽性率基本相符，說明回腸炎已經(jīng)成為影響豬群健康的重要疾病之一，需引起養(yǎng)豬業(yè)的高度重視。

（2）根據(jù)糞便樣本的檢測結(jié)果，不同季節(jié)、不同區(qū)域、不同規(guī)模的豬場胞內(nèi)勞森菌檢出率均達到80.0％以上；可見氣候、地理環(huán)境與豬場規(guī)模對豬感染回腸炎的影響較小。

（3）母豬在各個生產(chǎn)階段的陽性率也普遍偏高，結(jié)合臨床表現(xiàn)及檢測結(jié)果，保育-育肥豬群在13周齡和19周齡前后對回腸炎的感染壓較高。

（4）后備母豬的糞便樣本胞內(nèi)勞森菌的CT值比妊娠母豬的低；不同類型的糞便對應(yīng)的CT值也存在差異，血便的CT值最低，正常糞便的CT值最高。

4? 討論

此次調(diào)查總共收集了來自169家豬場的? 1 667份糞便樣本，基本覆蓋了我國主要養(yǎng)豬生產(chǎn)地區(qū)不同規(guī)模不同飼養(yǎng)模式的豬場，具有一定的代表性。檢測結(jié)果顯示，糞便樣本的胞內(nèi)勞森菌陽性率為86.0％，豬場的陽性率為96.4％。曲向陽等[5]在2009年12月至2011年4月對華東地區(qū)的21家規(guī)?；i場進行回腸炎流行病學(xué)調(diào)查，豬場陽性率達到了100％，樣本陽性率為59.81％，樣本陽性率低于本調(diào)查的結(jié)果。楊小燕等[6]也對閩西地區(qū)的回腸炎感染情況進行了調(diào)查，豬場陽性率也達到了100％?？梢姲麅?nèi)勞森菌在全國的流行依然非常普遍，感染率相當(dāng)高。

本次對來自保育豬、育肥豬和母豬的糞便樣本進行檢測，均存在胞內(nèi)勞森菌的感染，結(jié)合臨床表現(xiàn)及檢測結(jié)果，保育-育肥豬群在13周齡和19周齡前后的回腸炎感染壓較高。楊小燕等[6]的報告顯示，在6～8周齡、9～ 13周齡、14～20周齡這幾個生產(chǎn)階段的陽性率超過了40％，這3個生產(chǎn)階段在回腸炎發(fā)病率上無明顯差異，這也給回腸炎的科學(xué)防控提出了更大挑戰(zhàn)。仔豬斷奶后，由于母源抗體水平的下降，加上斷奶、轉(zhuǎn)群、環(huán)境轉(zhuǎn)變等的應(yīng)激，其體內(nèi)胞內(nèi)勞森菌開始增殖，從而表現(xiàn)出感染率隨年齡的增大而上升。我們也從產(chǎn)房發(fā)生腹瀉的10日齡仔豬的糞便中檢測到了胞內(nèi)勞森菌，同時還發(fā)現(xiàn)存在豬流行性腹瀉病毒的感染情況。胞內(nèi)勞森菌主要影響保育期、育肥期的豬，對產(chǎn)房哺乳期仔豬的影響有多大還需要進一步研究。

本調(diào)查主要針對保育-育肥豬群在臨床上出現(xiàn)了腹瀉問題，故以采集水泥樣糞便進行檢測為主，水泥樣糞便的胞內(nèi)勞森菌陽性率達到了97.8％，而正常糞便的陽性率為55.5％，樣本的總體陽性率高于其他研究人員的報道。從正常糞便中也能檢測到胞內(nèi)勞森菌，表明存在亞臨床感染，這值得養(yǎng)豬生產(chǎn)者的警惕。我們在臨床上也遇到了大量的拉血便的問題，以母豬群為主，特別是后備母豬，血便的胞內(nèi)勞森菌檢出率達到了100％，且CT值明顯低于其他類型的糞便。我們檢測了其他引起血便的病原，均未測到混合感染的情況，同時使用藥物及時得到了控制。針對后備母豬及經(jīng)產(chǎn)母豬出現(xiàn)的急性回腸炎引起的血便問題，提前保健預(yù)防顯得尤為重要。

不同糞便類型對應(yīng)的CT值區(qū)間范圍也存在一定的差別，在保育-育肥階段最容易出現(xiàn)水泥樣糞便，57％的樣本的CT值介于30～35，另有34％的樣本的CT值介于35～40；血便樣本的CT值幾乎都低于30。有研究報道，與沒有增生性病變的豬（中值排菌量：＜3.30log10個細(xì)菌/g糞便）相比，有增生性病變的豬的胞內(nèi)勞森菌排菌量中值極顯著高（中值排菌量：5.92log10個細(xì)菌/g糞便）（P＜0.001）[7]。在本調(diào)查中，我們并未對回腸炎臨床表現(xiàn)嚴(yán)重的豬進行解剖以觀察其腸道增生情況，但其糞便胞內(nèi)勞森菌的CT值相對較低，說明排菌量大，在一定程度上反映了其感染的嚴(yán)重程度，也可從側(cè)面通過CT值初步判斷增生的嚴(yán)重程度。

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