酒精性肝病中的鐵死亡機(jī)制研究進(jìn)展

李雪梅，康 萌，萬(wàn)靜之，李澳忠，劉啟玲，，秦緒軍

(1.陜西中醫(yī)藥大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，陜西 咸陽(yáng) 712046；2. 西北工業(yè)大學(xué)生命學(xué)院，陜西 西安 710072)

全世界約20億人飲酒，導(dǎo)致每年有超330萬(wàn)例死亡病例(約占總死亡人數(shù)的5.9%)[1]。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，中國(guó)每年因飲酒死亡人數(shù)高達(dá)70萬(wàn)，飲酒所致死亡人數(shù)占全球之首[2]。飲酒已經(jīng)成為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生事件。酒精性肝病(alcoholic liver disease，ALD)是由長(zhǎng)期大量飲酒或短期酗酒而引起的復(fù)雜的肝臟代謝性疾病，具有較高的發(fā)病率和死亡率。臨床上可將其分為酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝纖維化和酒精性肝硬化4個(gè)階段[3]。目前已報(bào)道的ALD 發(fā)病機(jī)制主要涉及肝脂肪變性、氧化應(yīng)激、乙醛毒性和炎癥反應(yīng)等多種機(jī)制。但ALD的具體分子機(jī)制仍不清楚，且尚無(wú)明確有效的治療藥物[4]。因此，探討新的分子機(jī)制對(duì)于尋找預(yù)防和治療ALD 有效藥物和策略具有重要意義。

鐵死亡(ferroptosis)是由哥倫比亞大學(xué)Dr.Stockwell于2012年提出的一種新型程序性細(xì)胞死亡，在腫瘤、神經(jīng)疾病、急性肝腎損傷、缺血再灌注等多種疾病中發(fā)揮著重要作用[5]。鐵死亡是細(xì)胞內(nèi)大量的活性氧(reactive oxygen species，ROS)在鐵離子(Fe2+/Fe3+)存在的情況下，脂膜上多不飽和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid，PUFA)發(fā)生氧化產(chǎn)生大量的脂質(zhì)過(guò)氧化物(lipid peroxide，LPO)，如丙二醛(malonaldehyde，MDA)和4-羥基壬烯酸等，引起生物膜損傷，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡[6]。與其他細(xì)胞死亡形式相比，鐵死亡具有獨(dú)有的特征：①細(xì)胞形態(tài)方面，如細(xì)胞膜破裂、線粒體皺縮破裂、膜密度增高和嵴減少；②細(xì)胞分子方面，如胱氨酸/谷氨酸逆轉(zhuǎn)運(yùn)受體(system XC-)、谷胱甘肽(glutathione，GSH)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶4(glutathione peroxidase 4，GPx4)水平抑制，以及Fe2+/Fe3+、ROS、PUFA、多不飽和脂肪酸-磷脂(PUFA-PLs)和LPO 等的過(guò)度積累[7-8]。

1 ALD中的鐵死亡

研究表明，ALD伴隨著鐵死亡的發(fā)生，酒精能夠通過(guò)多種機(jī)制引起鐵死亡[9]。肝臟是人體重要的代謝器官，也是酒精代謝的主要場(chǎng)所。酒精可引起肝臟氧化應(yīng)激，而氧化應(yīng)激是觸發(fā)鐵死亡的必要條件之一。Liu等[10]通過(guò)酒精灌胃小鼠，發(fā)現(xiàn)酒精暴露后體內(nèi)可產(chǎn)生過(guò)量ROS，引發(fā)氧化應(yīng)激，誘導(dǎo)鐵死亡發(fā)生。除氧化應(yīng)激外，鐵離子積累也是誘導(dǎo)鐵死亡的主要原因之一。有研究發(fā)現(xiàn)有超過(guò)一半的ALD患者肝臟內(nèi)會(huì)出現(xiàn)鐵離子的沉積[11]。Luo 等[12]研究發(fā)現(xiàn)，酒精可誘導(dǎo)肝臟內(nèi)鐵離子濃度升高，導(dǎo)致鐵死亡的發(fā)生。此外，脂質(zhì)代謝紊亂所導(dǎo)致的LPO積累也能影響鐵死亡。Liu等[13]通過(guò)酒精灌胃小鼠，發(fā)現(xiàn)酒精引起體內(nèi)的LPO 積累可誘導(dǎo)鐵死亡。Choi 等[14]發(fā)現(xiàn)，酒精會(huì)增加體內(nèi)脂肪的合成，促進(jìn)體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化進(jìn)程，導(dǎo)致LPO積累，誘導(dǎo)鐵死亡的發(fā)生。而抑制鐵死亡能夠改善ALD。He等[15]研究發(fā)現(xiàn)，抑制體內(nèi)氧化應(yīng)激，平衡鐵代謝和脂質(zhì)代謝等，會(huì)有效抑制鐵死亡，保護(hù)肝臟。由此說(shuō)明，鐵死亡可能在ALD發(fā)生和發(fā)展中起著重要作用，是防治ALD的潛在靶點(diǎn)。因此，有必要對(duì)鐵死亡進(jìn)行深入研究，揭示鐵死亡在ALD 中發(fā)揮的具體作用，為防治ALD提供新的策略和干預(yù)靶點(diǎn)。

2 酒精調(diào)控鐵死亡的機(jī)制

2.1 酒精通過(guò)ROS調(diào)控線粒體及脂質(zhì)過(guò)氧化誘導(dǎo)鐵死亡

ROS是由氧分子不完全還原所產(chǎn)生的一類(lèi)分子，具有分子量小、壽命短和高反應(yīng)活性等特點(diǎn)。常見(jiàn)的ROS主要包括：超氧陰離子(·-O2)、羥自由基(·OH)、單線態(tài)氧(1O2)、過(guò)氧化氫(H2O2)以及各種過(guò)氧化物等[16]。這些ROS主要產(chǎn)生于線粒體、過(guò)氧化酶體以及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器[17]。當(dāng)ROS水平過(guò)高時(shí)，會(huì)引發(fā)氧化應(yīng)激，損傷細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)、脂質(zhì)以及DNA等大分子，干擾正常的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，影響線粒體膜電位和電子傳遞鏈，導(dǎo)致細(xì)胞死亡，如凋亡、自噬以及鐵死亡等[18]。

脂質(zhì)過(guò)氧化是指在ROS存在的情況下，脂質(zhì)分子受到氧化作用形成過(guò)氧化物的過(guò)程。其脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物被認(rèn)為是鐵死亡的標(biāo)志之一。一些脂質(zhì)過(guò)氧化酶在脂質(zhì)過(guò)氧化過(guò)程中發(fā)揮著重要作用，包括乙?；o酶A 合成酶長(zhǎng)鏈家族成員4(acyl-CoA synthetase long chain family member 4，ACSL4)、脂氧合酶和溶血磷脂酰膽堿?；D(zhuǎn)移酶3(lysophosphatidyl-choline acyltransferase 3，LPCAT3)等[19]。ACSL 主要在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體外膜表達(dá)，其功能是將游離的長(zhǎng)鏈脂肪酸和CoA結(jié)合形成脂肪酰基輔酶A。ACSL 共有5 種亞型，但只有ACSL4 與鐵死亡有關(guān)，并被認(rèn)為是鐵死亡的敏感性標(biāo)志物[20]。Xu 等[21]通過(guò)Lieber-DeCarli 液體酒精飼料誘導(dǎo)小鼠建立慢性ALD 模型，發(fā)現(xiàn)酒精引起肝臟發(fā)生氧化應(yīng)激引起鐵死亡，具體機(jī)制主要是酒精暴露導(dǎo)致體內(nèi)ACSL4上調(diào)，產(chǎn)生過(guò)量LPO在體內(nèi)積累而導(dǎo)致的。脂氧合酶是一類(lèi)非血紅素含鐵雙加氧酶，花生四烯酸15脂氧合酶(arachidonate-15-lipoxygenase，ALOX15)是人類(lèi)脂氧合酶家族成員之一。ALOX15 能夠?qū)UFA 作為底物進(jìn)行氧化反應(yīng)，誘導(dǎo)鐵死亡的發(fā)生[20]。Zhang等[22]在研究慢性ALD模型中發(fā)現(xiàn)，酒精會(huì)上調(diào)ALOX15 表達(dá)，并增加ALOX15 產(chǎn)物的生成，從而誘導(dǎo)鐵死亡的發(fā)生。LPCAT3 是一種調(diào)節(jié)花生四烯酸水平的酰基轉(zhuǎn)移酶。當(dāng)LPCAT3 高表達(dá)時(shí)，花生四烯酸的水平顯著增加，導(dǎo)致LPO生成增加，破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，誘導(dǎo)鐵死亡的發(fā)生[19，23]。Lu 等[24]通過(guò)對(duì)小鼠進(jìn)行5%液體酒精飼料Lieber-DeCarli 喂養(yǎng)10 d，并在最后一天單次大劑量酒精灌胃(5 g/kg，30%體積比酒精)誘導(dǎo)成慢性加急性酒精性損傷小鼠模型(NIAAA 模型)[25]，發(fā)現(xiàn)酒精引起肝臟ROS 產(chǎn)生增加，導(dǎo)致LPCAT3 過(guò)度表達(dá)，增加了LPO 濃度，誘導(dǎo)鐵死亡的發(fā)生。這些研究結(jié)果表明，在ALD的發(fā)生的過(guò)程中，酒精的攝入上調(diào)了ACSL4、ALOX15 和LPCAT3 等酶的活性，加快脂質(zhì)過(guò)氧化進(jìn)程，破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，最終誘導(dǎo)鐵死亡，可能促進(jìn)了ALD的發(fā)生發(fā)展，因此抑制這些酶的表達(dá)或活性，或者增加體內(nèi)抗氧化活性有助于抑制鐵死亡，保護(hù)防治ALD。

線粒體是細(xì)胞主要的能量生產(chǎn)和轉(zhuǎn)化場(chǎng)所。線粒體是雙膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器，由外膜和內(nèi)膜包裹基質(zhì)構(gòu)成。線粒體基質(zhì)中含有高濃度的三羧酸循環(huán)酶混合物以及對(duì)ROS高度敏感易受氧化損傷的線粒體DNA。線粒體通過(guò)三羧酸循環(huán)、氧化磷酸化等過(guò)程進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)代謝產(chǎn)生能量以供機(jī)體活動(dòng)所需[26]。在能量代謝的過(guò)程中，電子傳遞鏈復(fù)合物I和III的電子泄漏產(chǎn)生，然后通過(guò)線粒體超氧化物歧化酶2的作用轉(zhuǎn)化產(chǎn)生H2O2。生成的H2O2會(huì)與Fe2+發(fā)生Fenton 反應(yīng)，產(chǎn)生高活性的·OH。這些ROS 會(huì)與PUFA發(fā)生反應(yīng)，形成PUFA自由基，并與氧分子迅速反應(yīng)生成LPO，導(dǎo)致線粒體氧化損傷[27]。

酒精會(huì)對(duì)線粒體產(chǎn)生明顯損傷作用。酒精攝入后，部分酒精在肝臟線粒體代謝，產(chǎn)生過(guò)量ROS及線粒體氧化應(yīng)激，導(dǎo)致線粒體形態(tài)和功能障礙[28]。酒精的代謝消耗了NAD+，引起NADH/NAD+的比值增加，使體內(nèi)Fe3+轉(zhuǎn)化為Fe2+，引發(fā)Fenton反應(yīng)，產(chǎn)生過(guò)量的·OH，進(jìn)一步加劇氧化應(yīng)激和線粒體損傷[29]。Xue 等[30]在56%體積比酒精以6 mL/kg 灌胃SD 大鼠16周，誘導(dǎo)慢性ALD，結(jié)果發(fā)現(xiàn)酒精攝入引起肝組織線粒體結(jié)構(gòu)的改變，包括線粒體膜密度的增加，線粒體嵴減少或消失以及外膜破裂等。Samuvel等[31]通過(guò)采用單劑量酒精灌胃誘導(dǎo)C57小鼠急性ALD，結(jié)果表明酒精暴露會(huì)損傷線粒體DNA，阻礙線粒體內(nèi)脂肪酸β-氧化的正常進(jìn)行。Ding 等[32]采用5%的液體酒精飼料Lieber-DeCarli 喂養(yǎng)C57 小鼠12 周，誘導(dǎo)慢性ALD，發(fā)現(xiàn)酒精攝入可導(dǎo)致線粒體形態(tài)和功能障礙，引起LPO 大量積累，誘導(dǎo)鐵死亡的發(fā)生。而改善線粒體功能可以減輕酒精引起的鐵死亡。Dong 等[33]通過(guò)NIAAA 法誘導(dǎo)C57 小鼠慢性加急性ALD，發(fā)現(xiàn)通過(guò)藥物馬鞭草干預(yù)激活過(guò)氧化物酶體增殖激活受體α可改善線粒體結(jié)構(gòu)和功能障礙，能夠抑制鐵死亡，保護(hù)酒精引起的肝損傷。Frataxin 是一種位于線粒體基質(zhì)的與線粒體功能和鐵硫簇生物發(fā)生相關(guān)的蛋白，對(duì)維持線粒體能量代謝具有重要作用[34]。Liu 等[10]發(fā)現(xiàn)，酒精能夠抑制Frataxin 的表達(dá)，使線粒體形態(tài)功能受到損傷，增加ROS 及脂質(zhì)過(guò)氧化，誘導(dǎo)鐵死亡，促進(jìn)ALD，而過(guò)表達(dá)Frataxin 能夠降低鐵死亡，減輕酒精引起的肝損傷。綜上，酒精攝入引發(fā)線粒體ROS產(chǎn)生，導(dǎo)致氧化應(yīng)激以及線粒體功能障礙，誘導(dǎo)鐵死亡，促進(jìn)ALD；而抑制線粒體氧化應(yīng)激，提高線粒體功能可以減輕鐵死亡改善ALD。

2.2 酒精通過(guò)GSH/GPx4調(diào)控鐵死亡

GSH/GPx4 系統(tǒng)是體內(nèi)維持氧化和抗氧化平衡的重要途徑。該系統(tǒng)的上游組件是system XC-，由調(diào)節(jié)溶質(zhì)載體家族3成員2(regulatory subunit slute carrier family 3 member 2，SLC3A2)和溶質(zhì)載體家族7 成員11(catalytic subunit solute carrier family 7 member 11，SLC7A11，也稱(chēng)xCT)組成[6]。xCT主要負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)運(yùn)活性，而SLC3A2 作為伴侶蛋白發(fā)揮作用，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)谷氨酸排出和細(xì)胞外半胱氨酸(cysteine，Cys)的攝取。通過(guò)system XC-的作用，Cys參與谷氨酸半胱氨酸連接酶和谷胱甘肽合成酶的合成過(guò)程，生成GSH。GSH 與GPx4 相互協(xié)作，發(fā)揮抗氧化作用。GPx4 是GPxs 家族成員之一，能夠清除H2O2，將有毒的過(guò)氧化物如LOOH轉(zhuǎn)化為無(wú)毒的脂質(zhì)醇，從而抑制鐵死亡發(fā)生。因此，GPx4 被認(rèn)為是抑制鐵死亡的重要因素之一[27，35]。不同的內(nèi)外環(huán)境損傷因素可以通過(guò)抑制system XC-減少Cys 的攝取，從而導(dǎo)致GSH 的合成減少，抑制GPx4的活性，進(jìn)而導(dǎo)致LPO積累，促使鐵死亡的發(fā)生[36]。

酒精攝入可對(duì)GSH/GPx4 系統(tǒng)產(chǎn)生影響。Zhou 等[37]通過(guò)NIAAA法誘導(dǎo)C57小鼠慢性加急性ALD，發(fā)現(xiàn)小鼠肝臟GSH減少，GPx4 活性降低，抗氧化能力減弱，并伴隨LPO 含量增加，從而導(dǎo)致鐵死亡；但通過(guò)特異性敲除腸道SIRT1可以增加肝臟的GSH 和GPx4 含量，提高抗氧化能力，抑制LPO 含量，發(fā)揮酒精肝損傷的保護(hù)作用。Shah等[38]采用NIAAA 法誘導(dǎo)C57小鼠急性加慢性ALD，發(fā)現(xiàn)酒精暴露引起小鼠肝臟ROS產(chǎn)生的同時(shí)，system XC-、GSH、GPx4 以及SOD 水平降低，LPO 含量增加，誘導(dǎo)鐵死亡發(fā)生。激活GSH/GPx4 系統(tǒng)可以抑制鐵死亡。通過(guò)胸腺素β4 干預(yù)發(fā)現(xiàn)，增加肝臟抗氧化劑xCT、GPx4、GSH和SOD等含量，降低肝臟ROS和LPO的積累，從而抑制氧化應(yīng)激和鐵死亡，改善酒精誘導(dǎo)肝臟損傷。Xue 等[30]用酒精灌胃SD 大鼠16 周，誘導(dǎo)ALD，發(fā)現(xiàn)褐藻多糖可以通過(guò)增加system XC-以及GPx4 蛋白的表達(dá)等方式，提高肝臟抗氧化能力，抑制鐵死亡，改善ALD。綜上，system XC-和GSH/GPx4系統(tǒng)在調(diào)控鐵死亡中發(fā)揮重要的作用。酒精攝入可降低system XC-和GSH/GPx4的表達(dá)，促進(jìn)鐵死亡，導(dǎo)致ALD的發(fā)生；提高體內(nèi)system XC-和GSH/GPx4表達(dá)水平以提高抗氧化水平可能是防治ALD的一個(gè)新途徑。

2.3 酒精通過(guò)鐵代謝調(diào)控鐵死亡

鐵離子代謝異常也是影響鐵死亡的重要因素。細(xì)胞內(nèi)的鐵代謝相關(guān)蛋白在維持鐵代謝平衡中扮演著重要的角色。這些蛋白包括轉(zhuǎn)鐵蛋白(transferrin，TF)、轉(zhuǎn)鐵蛋白受體1(transferrin receptor 1，TFR1)、鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(ferroportin 1，F(xiàn)PN1)、二價(jià)金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1、鐵蛋白重鏈1 和鐵蛋白輕鏈等[39]。TFR1是細(xì)胞攝取鐵的主要途徑，當(dāng)鐵離子和TF 結(jié)合后，再與細(xì)胞表面的TFR1 結(jié)合，通過(guò)內(nèi)吞作用將鐵離子攝入細(xì)胞。相反，F(xiàn)PN1是唯一能將鐵從細(xì)胞內(nèi)排出到胞外的蛋白。TFR1和FPN1共同調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)外的鐵平衡，前者將鐵輸送到細(xì)胞內(nèi)，后者將鐵輸出到細(xì)胞外[39]。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)鐵代謝穩(wěn)態(tài)受損時(shí)，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)鐵離子增多，與H2O2發(fā)生Fenton 反應(yīng)，進(jìn)而誘導(dǎo)LPO 的積累，驅(qū)動(dòng)鐵死亡[7]。

研究表明，酒精能夠影響細(xì)胞鐵離子濃度。Zhao等[40]通過(guò)誘導(dǎo)C57小鼠慢性加急性ALD，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)鐵離子濃度顯著增加，可引發(fā)肝臟內(nèi)脂質(zhì)積累，進(jìn)而導(dǎo)致鐵死亡的發(fā)生。褪黑素可通過(guò)增加FPN和FTH等蛋白的表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)鐵離子向外轉(zhuǎn)運(yùn)抑制鐵死亡，保護(hù)肝臟免受酒精侵害。Zhou等[41]研究發(fā)現(xiàn)脂肪特異性高表達(dá)磷脂酸磷酸酶1會(huì)增加酒精引起的鐵離子累積和鐵死亡，從而加重ALD。相反，減少鐵離子累積能夠減輕鐵死亡。Gao等[42]發(fā)現(xiàn)，缺鐵情況下對(duì)小鼠進(jìn)行3次酒精灌胃誘導(dǎo)急性ALD，發(fā)現(xiàn)肝臟損傷明顯減輕，主要是因?yàn)殍F離子的減少抑制了鐵死亡的發(fā)生，這也從側(cè)面表明鐵離子依賴(lài)的鐵死亡在ALD中具有重要作用。此外，Song等[43]研究表明，酒精可以激活核受體激活因子4干擾鐵代謝，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)鐵離子濃度升高，驅(qū)動(dòng)鐵死亡的發(fā)生。采用藥物水飛薊素干預(yù)可以抑制核受體激活因子4 的表達(dá)，進(jìn)一步抑制細(xì)胞內(nèi)鐵離子濃度的升高，從而發(fā)揮肝臟保護(hù)作用。綜上，鐵代謝與鐵死亡密切相關(guān)，酒精引起的鐵代謝相關(guān)蛋白異常，引起鐵離子累積是酒精引起鐵死亡的重要機(jī)制之一，調(diào)控特定鐵代謝相關(guān)蛋白也有望成為調(diào)控鐵死亡防治ALD的潛在靶點(diǎn)。因此，本文對(duì)酒精調(diào)控鐵死亡的機(jī)制作了一個(gè)示意圖，見(jiàn)圖1。

圖1 酒精調(diào)控鐵死亡的機(jī)制示意圖

3 小結(jié)與展望

隨著人們生活水平提高和飲酒的增加，ALD患病率日益增加，給肝臟甚至機(jī)體健康帶來(lái)嚴(yán)重挑戰(zhàn)，但目前為止臨床尚無(wú)有效防治藥物。探索ALD新機(jī)制對(duì)于尋找開(kāi)發(fā)基于靶點(diǎn)且有效的臨床藥物具有重要意義。鐵死亡是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的一種細(xì)胞死亡形式，主要以鐵離子依賴(lài)的脂質(zhì)過(guò)氧化損傷為主要特點(diǎn)。酒精代謝引起的氧化應(yīng)激早已被廣泛報(bào)道，同時(shí)肝臟又是鐵離子儲(chǔ)存的主要器官，提示鐵死亡很可能在ALD中扮演了重要角色。最近多項(xiàng)研究也證實(shí)了酒精能引起鐵死亡，抑制鐵死亡可改善ALD。多種干預(yù)策略包括提高抗氧化系統(tǒng)(如xCT、GSH和GPx4 等)活力，減少ROS 和LPO 的過(guò)度產(chǎn)生和積累，改善線粒體應(yīng)激和呼吸功能，以及調(diào)控鐵代謝蛋白等抑制異常鐵攝取等，從而抑制鐵死亡改善ALD。其中線粒體作為細(xì)胞產(chǎn)生ROS的主要位點(diǎn)，既是酒精損傷的靶點(diǎn)，也是激發(fā)鐵死亡的起點(diǎn)，同時(shí)也是聯(lián)系氧化抗氧化的重要樞紐，提示線粒體是未來(lái)調(diào)控鐵死亡防治ALD的潛在靶點(diǎn)。此外，國(guó)內(nèi)外對(duì)鐵死亡的分子機(jī)制仍在不斷探索中，許多新的調(diào)控鐵死亡機(jī)制不斷被發(fā)現(xiàn)，這也必將給ALD的鐵死亡機(jī)制提供新的研究思路和線索。但目前對(duì)ALD不同階段鐵死亡的變化及機(jī)制知之尚少，酒精對(duì)鐵死亡的具體調(diào)控機(jī)制研究相對(duì)有限，故進(jìn)一步加強(qiáng)酒精誘導(dǎo)鐵死亡具體機(jī)制的探究，尋找通過(guò)調(diào)控鐵死亡防治ALD的潛在干預(yù)靶點(diǎn)，將成為今后ALD發(fā)生機(jī)制以及探索防治策略和藥物研究的新方向。