楊丹丹 韓 雪 孔欣欣 趙鵬飛 金建猛 趙國軒 蘇亞中 趙國建
(開封市農(nóng)林科學(xué)研究院,河南開封 475004)
小麥?zhǔn)鞘澜缛蠹Z食作物之一,也是我國重要的糧食作物,小麥產(chǎn)量提高對全球糧食安全具有重要意義。干旱是影響小麥產(chǎn)量的重要因素之一[1],干旱脅迫是限制小麥產(chǎn)量潛力有效發(fā)揮的關(guān)鍵因素,抗旱節(jié)水品種在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)揮了重要作用。研究表明,干旱脅迫環(huán)境下小麥胚芽鞘對干旱十分敏感,且小麥苗期活力會(huì)影響后期生長并最終影響小麥產(chǎn)量[2-3]。因此苗期胚芽鞘的伸長長度可作為小麥耐旱性篩選的重要指標(biāo)[4-6]。為縮短抗旱小麥品種篩選周期,提前對小麥進(jìn)行抗旱性評價(jià),本試驗(yàn)挑選76 份小麥品種(系)進(jìn)行干旱脅迫,通過測定苗期胚芽鞘長度,并利用變異系數(shù)分析法、聚類分析法等對小麥苗期抗旱性進(jìn)行綜合分析和評價(jià)。
1.1 供試材料試驗(yàn)材料為河南省主栽和開封市農(nóng)林科學(xué)研究院自主培育的冬小麥品種(系),具體名稱見表1。
表1 供試品種(系)名稱
1.2 試驗(yàn)方法每個(gè)品種(系)挑選50 粒籽粒飽滿、無病蟲害的小麥種子整齊擺放于平鋪雙層濾紙的培養(yǎng)皿中,加入15mL 無菌水,加入無菌水時(shí)避免濾紙下產(chǎn)生氣泡,用鑷子將種子腹溝朝下,整齊排列在發(fā)芽床上,粒與粒之間距離均勻,25℃恒溫條件培養(yǎng)。經(jīng)過24h 培養(yǎng)后,選取萌發(fā)一致的種子分為兩等份(每份20 粒),分別整齊擺放在2 個(gè)新的平鋪雙層濾紙的培養(yǎng)皿中:一份作為對照加入無菌水15mL,另一份加入20% PEG-6000(W/V)溶液15mL。25℃恒溫條件下繼續(xù)培養(yǎng)48h,在小麥胚芽鞘長至一定高度時(shí)拿開培養(yǎng)皿蓋,每隔12h 測量無蓋培養(yǎng)皿質(zhì)量,并補(bǔ)充水至原質(zhì)量。自小麥種子萌發(fā)起分別從每個(gè)培養(yǎng)皿中挑取長勢一致的10粒測量胚芽鞘長度并記錄。每天在固定時(shí)間測定小麥胚芽鞘的長度,連續(xù)測量7d,取平均值作數(shù)據(jù)分析。
1.3 數(shù)據(jù)分析聚類分析以歐氏平方距離(dij)定義76 份小麥供試材料的遺傳距離,以胚芽鞘長度均值換算小麥供試材料間的遺傳距離,按歐氏平方距離大小對所有材料進(jìn)行分類。采用Excel 2010 與SPSS 20.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。
2.1 不同冬小麥品種(系)受脅迫后胚芽鞘伸長速度分析通過分析冬小麥品種(系)胚芽鞘長度的變化規(guī)律可知,加入聚乙二醇(PEG-6000)后,種子生長受到脅迫,胚芽鞘的生長速度比對照處理的生長速度減慢(圖1)。胚芽鞘的伸長長度比對照處理的胚芽鞘伸長長度短,二者之間有明顯差異;受到脅迫后,胚芽鞘的伸長幅度為1.09~6.30cm,對照處理胚芽鞘的伸長幅度為1.14~11.36cm,受脅迫后胚芽鞘的最大伸長長度比對照處理的最大伸長長度短44.54%;加入聚乙二醇后的前3d,胚芽鞘的生長速度最慢,說明剛開始加入聚乙二醇,就對種子生長造成了影響,后期影響反而逐漸減弱。
圖1 種子經(jīng)過干旱脅迫處理7d 內(nèi)胚芽鞘的生長變化
2.2 不同小麥品種(系)胚芽鞘長度分析小麥種子萌發(fā)第7 天聚乙二醇(PEG-6000)脅迫處理組與水處理組胚芽鞘長度、性狀變化率差異最明顯,方差分析結(jié)果表明(表2),胚芽鞘長度在不同小麥品種(系)間變化達(dá)到極顯著水平(P<0.01),數(shù)據(jù)具有較強(qiáng)的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
表2 不同小麥品種(系)胚芽鞘長度方差分析
通過分析不同小麥品種(系)胚芽鞘長度的變化規(guī)律可知(表3),在聚乙二醇(PEG-6000)模擬干旱脅迫下,不同小麥品種(系)胚芽鞘長度表現(xiàn)不同,長度在1.9cm 以上的共有8 個(gè),分別為豫農(nóng)922、鄭麥158、鄭麥119、鄭麥379、開麥1606、開麥205、濟(jì)麥22、洛旱7 號。胚芽鞘長度最長的為開麥1606(2.21cm),胚芽鞘長度最短的為豫農(nóng)536(0.73cm),最長胚芽鞘長度比最短胚芽鞘長度長202.74%;胚芽鞘長度變異系數(shù)范圍為13.17%~63.46%,其中平安21 變異系數(shù)最?。?3.17%),開麥22 變異系數(shù)最大(63.46%)。與對照品種周麥36 相比,胚芽鞘更長的品種有38 個(gè),增幅1.39%~53.47%;與對照品種洛旱7 號相比,胚芽鞘更長的品種有開麥1606(2.21cm)和濟(jì)麥22(2.17cm),增幅分別為2.79%和0.93%。
表3 PEG-6000 干旱脅迫下不同小麥品種(系)胚芽鞘長度描述性統(tǒng)計(jì)
2.3 不同小麥品種(系)胚芽鞘長度聚類分析當(dāng)定義聚類分析歐氏平方距離為5.3 時(shí)可將76 份小麥材料分為4 類,類群I 又可分為3 個(gè)亞群,類群II可分為2 個(gè)亞群,類群III 可分為2 個(gè)亞群(圖2、表4)。聚類分析結(jié)果表明,亞群I2和I3胚芽鞘長度接近的比較多。亞群I2有15 個(gè),亞群I3有24 個(gè),合占76 份冬小麥材料總數(shù)的51.32%,其余冬小麥材料占比為48.68%,這2 個(gè)亞群胚芽鞘長度變化范圍為1.30~1.71cm。類群IV 芽鞘長度最長,胚芽鞘長度變化范圍為2.14~2.21cm。胚芽鞘伸長長度最長的為開麥1606,其次是濟(jì)麥22,分別比最短胚芽鞘長度豫農(nóng)536 長202.74%和197.26%,分別比對照洛旱7 號長2.79%和0.93%,比對照周麥36 長53.47%和50.69%,這2 個(gè)品種可作為耐旱品種栽培或作為長胚芽鞘種質(zhì)創(chuàng)新的基礎(chǔ)材料?;谂哐壳书L度遺傳距離的不同,可將76 份冬小麥材料直觀、形象地分為9 類,有利于冬小麥種質(zhì)資源的鑒選和優(yōu)質(zhì)親本組配。已有研究表明,長胚芽鞘品種(系)表現(xiàn)出更強(qiáng)的抗旱性[7],因此下一步應(yīng)對這38個(gè)冬小麥品種(系)進(jìn)行重點(diǎn)篩選,結(jié)合其他農(nóng)藝、生理性狀選出耐旱性更強(qiáng)的冬小麥品種(系)。
圖2 76 份冬小麥品種(系)胚芽鞘長度聚類結(jié)果
表4 76 份冬小麥品種(系)胚芽鞘長度分類
不同品種(系)的種子之間、同一品種(系)水處理與PEG 處理之間胚芽鞘的伸長長度均存在梯度差異,不同小麥品系對干旱脅迫的敏感程度不同。種子經(jīng)過PEG 處理后胚芽鞘伸長長度明顯低于水處理的伸長長度。對照品種洛旱7 號胚芽鞘長度為2.15cm,篩選出經(jīng)PEG 處理胚芽鞘長度高于對照品種洛旱7 號的品種開麥1606 和濟(jì)麥22。與對照品種周麥36 相比,胚芽鞘更長的品種有38 個(gè),胚芽鞘長度增幅1.39%~53.47%。
加入聚乙二醇(PEG-6000)后,種子生長受到脅迫,胚芽鞘的生長速度比對照的生長速度減慢,胚芽鞘的伸長長度比對照的胚芽鞘長度短;加入聚乙二醇后的前3d,胚芽鞘的生長速度最慢,說明剛開始加入聚乙二醇,就對種子生長造成了影響,后期影響逐漸減弱。
研究表明,將胚芽鞘伸長長度作為抗旱性鑒定手段[8],可以有效縮短冬小麥抗旱育種進(jìn)程[9]。長胚芽鞘冬小麥種子適當(dāng)深播,可以充分吸收土壤深層水分,避免表層土壤中除草劑、地膜等因素對作物胚芽的傷害,并能利用長胚芽鞘優(yōu)勢頂土出苗,最終提高冬小麥品種的出苗率[10],為其后期高產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。在土壤表層水分嚴(yán)重不足的旱地麥田,長胚芽鞘冬小麥品種的耐深播特性顯得尤為重要[11]。本研究中,根據(jù)聚類分析的結(jié)果,將76 份小麥材料分為4 個(gè)類群,類群IV 胚芽鞘長度最長,可作為抗旱性小麥品種(系)。本試驗(yàn)可以更直接有效地為耐旱種質(zhì)篩選及耐旱資源配制提供科學(xué)依據(jù),下一步將結(jié)合田間農(nóng)藝性狀對這類品種(系)進(jìn)行鑒定,探尋其與產(chǎn)量等的關(guān)系,為縮短育種進(jìn)程提供有效的參考價(jià)值。