高廣嶺，李琴，郝洪丹，王若穎

（河北工程大學(xué)生命科學(xué)與食品工程學(xué)院，河北邯鄲 056038）

犬腹瀉是獸醫(yī)臨床較為常見(jiàn)， 且導(dǎo)致犬營(yíng)養(yǎng)不良、生長(zhǎng)發(fā)育受阻的原因之一。 目前，治療的首選方法是抗生素療法，長(zhǎng)期使用抗生素破壞動(dòng)物腸道內(nèi)微生態(tài)的平衡， 造成長(zhǎng)期慢性的腹瀉。 近年來(lái)，關(guān)于研究針灸治療腹瀉的報(bào)道越來(lái)越多。C 反應(yīng)蛋白可以作為非特異性炎癥標(biāo)志物來(lái)反應(yīng)機(jī)體腹瀉情況。 血常規(guī)檢查是臨床上對(duì)血液最基礎(chǔ)的檢查之一，本研究以番瀉葉構(gòu)建腹瀉模型， 采用針灸與/或抗生素聯(lián)合療法作為治療手段，從臨床表現(xiàn)、糞便形態(tài)及性狀、血糖水平、CRP 水平和血常規(guī)變化等方面探究不同給藥方式對(duì)犬腹瀉的防治效果。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

疫苗接種完全的犬只， 中華田園犬和泰迪犬30 只，體重控制在4±0.2 千克。

1.2 主要儀器與設(shè)備

自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀URIT-5160Vet、 寵物免疫熒光檢測(cè)儀YG-101、 離心機(jī) （賽洛捷克SCILOGEX）、血糖血酮儀YZB/UK1071-2015、電熱恒溫水浴鍋（北京市永光明醫(yī)療儀器廠）、電子天平FA1104。

番瀉葉（安國(guó)京隆康藥業(yè)有限公司）、恩諾沙星片劑（KVP Kiel 有限責(zé)任公司)、針灸針（蘇州針灸用品有限公司）、犬C-反應(yīng)蛋白（CPR）檢測(cè)試劑盒（廣州萬(wàn)德康科科技有限公司）、越佳型至新血糖試紙（英國(guó)雅培糖尿病護(hù)理公司）。

1.3 分析軟件

使用GraphPad Prism 8 與IBM SPSS Statistics 21 軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析整理。

1.4 動(dòng)物試驗(yàn)設(shè)計(jì)

飼喂基礎(chǔ)犬糧自由飲水3 日后， 健康犬30只，分為5 組，每組6 只。 空白組飼喂普通犬糧，試驗(yàn)前3 天，其余各組在空白對(duì)照組處理的基礎(chǔ)上給予2 克/千克體重飼喂番瀉葉，每日1 次，連續(xù)3 天，建立犬的脾胃虛寒腹瀉模型。試驗(yàn)第4～6 天，針灸組給予犬只針刺脾俞、胃俞、足三里、后海并留針30 分鐘，抗生素組給予恩諾沙星片劑5 毫克/千克口服給藥， 針灸加抗生素組聯(lián)合針刺脾俞、胃俞、足三里、后海再給犬恩諾沙星片劑5 毫克/千克，各治療組每日1 次，持續(xù)治療3天，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后從臂頭靜脈采血檢測(cè)。

1.4.1 血清中血糖和CPR 含量的檢測(cè)

采集犬只全血0.5 毫升血液與0.5 毫升抗凝管中，使用自動(dòng)血糖分析儀測(cè)定血清中葡萄糖含量，4000 轉(zhuǎn)/分鐘離心10 分鐘， 吸取上層血清。 使用萬(wàn)孚寵物免疫熒光檢測(cè)儀測(cè)犬只血清中CRP 的含量。

1.4.2 血液學(xué)分析

將經(jīng)犬只臂頭靜脈采集到的血液立即使用全自動(dòng)動(dòng)物血液細(xì)胞分析儀進(jìn)行犬只全血的血液學(xué)分析， 主要檢測(cè)指標(biāo)包括：WBC、LY、MON、NEU、LY% 、MON% 、NEU、RBC、HGB、HCT）、MCV、MCH、MCHC、RDW、PLT、MPV、PCT、PDW。

1.4.3 糞便性質(zhì)評(píng)分

按照布里斯托糞便分級(jí)法進(jìn)行劃分腹瀉等級(jí)。Ⅰ，糞便呈一顆顆硬球。Ⅱ，表面凹凸的香腸狀。Ⅲ，表面有裂痕的香腸狀。Ⅳ，呈香腸狀或蛇狀且表面光滑。 Ⅴ，柔軟塊狀，斷邊光滑。 Ⅵ，代表糞便呈糊狀大便，粗邊蓬松。 Ⅶ，水樣便，無(wú)固體快。

1.4.4 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)的結(jié)果數(shù)據(jù)經(jīng)IBM SPSS Statistics 21分析，使用One-way ANOVA 進(jìn)行分析，組間多重比較使用LSD，結(jié)果均表示為“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差” （x ± SD），P＜0.05 表示差異性顯著，P＜0.01表示差異性極顯著。

2 結(jié)果

2.1 臨床表現(xiàn)及癥狀

試驗(yàn)開(kāi)始前，各組犬只精神食欲均無(wú)異常，可視黏膜淡粉紅色，鼻鏡濕潤(rùn)。 飼喂番瀉葉至第3 天，空白對(duì)照組排便正常；而腹瀉組、針灸組、抗生素組、 針灸+抗生素組犬只均出現(xiàn)精神沉郁、被毛雜亂、排便次數(shù)增加、糞便稀薄，肛門(mén)及尾根處有糞便污染。 試驗(yàn)第3 天至第6 天，對(duì)針灸組、抗生素組和針灸+抗生素組犬進(jìn)行相應(yīng)治療，空白對(duì)照組犬只無(wú)明顯變化，精神食欲正常，排便正常；腹瀉組犬只持續(xù)腹瀉、精神沉郁、被毛雜亂、糞便稀?。会樉慕M、抗生素組和針灸+抗生素組犬只腹瀉情況出現(xiàn)明顯好轉(zhuǎn)，犬只精神食欲正常、排便正常，偶有輕微稀便。

2.2 糞便形態(tài)變化

試驗(yàn)前，各組犬只糞便均呈香腸狀，表面光滑或有裂痕；飼喂番瀉葉至第3 天，各組均出現(xiàn)腹瀉癥狀，呈現(xiàn)糊狀甚至水樣糞便；試驗(yàn)第3 天至第六天，對(duì)針灸組、抗生素組和針灸+抗生素組犬進(jìn)行相應(yīng)治療，針灸組和抗生素組犬只在治療至第3 天時(shí)腹瀉癥狀明顯好轉(zhuǎn)，部分犬只仍有糊狀糞便，針灸+抗生素組犬只在治療至第3 天時(shí)腹瀉癥狀基本痊愈，犬只糞便呈呈表面有裂痕或表面光滑的香腸狀，個(gè)別犬只糞便呈糊狀。

2.3 糞便性狀評(píng)分

根據(jù)布里斯托糞便分級(jí)法對(duì)糞便進(jìn)行分級(jí)后，除空白對(duì)照組外，其余各組犬只服用番瀉葉后當(dāng)天出現(xiàn)腹瀉癥狀，隨著口服番瀉葉的時(shí)間延長(zhǎng)其腹瀉程度逐漸增強(qiáng)，糞便分級(jí)也隨之升高，與空白對(duì)照組犬只的分辨分級(jí)具有極顯著差異（P<0.01），表明腹瀉模型建立成功。

2.4 體重變化

試驗(yàn)開(kāi)始前，各組犬只體重相近。試驗(yàn)第1～3 天，除空白組外，其余各組犬只出現(xiàn)腹瀉癥狀，各組犬只體重出現(xiàn)明顯下降，空白對(duì)照組犬只體重平穩(wěn)且出現(xiàn)小幅上升。 試驗(yàn)第4～6 天， 針灸組、抗生素組和針灸+抗生素組犬只體重出現(xiàn)不同程度上升，針灸+抗生素組犬只體重上升幅度最大，針灸組和抗生素組犬只體重小幅上升，腹瀉組犬只在停止口服番瀉葉后體重平穩(wěn)。

2.5 血糖變化

試驗(yàn)第0 天，各組犬只血糖無(wú)顯著差異（P>0.05）。 試驗(yàn)第3 天，與空白對(duì)照組相比，針灸組和針灸+抗生素組犬只平均血糖水平顯著降低（P<0.05），腹瀉模型組和抗生素組犬只水平有小幅度降低，但不具有顯著差異（P>0.05）。 試驗(yàn)第六天，腹瀉模型組、針灸組、抗生素組和針灸+抗生素組犬只血糖水平均出現(xiàn)上升，但與空白對(duì)照組相比不具有顯著差異（P>0.05）。

2.6 CRP 檢測(cè)

與空白對(duì)照組相比，其余各組在口服番瀉葉第3 天后血液中CRP 含量均極顯著升高 （P<0.01）。 試驗(yàn)第6 天時(shí)，針灸+抗生素組犬只血液內(nèi)CRP 含量顯著低于針灸組和抗生素組 （P<0.05），腹瀉模型組犬只血液內(nèi)CRP 含量仍極顯著高于空白對(duì)照組（P<0.01）。

2.7 血常規(guī)分析

與腹瀉模型組相比，針灸組、抗生素組和針灸+抗生素組的WBC、MON、NEU 和MON%水平極顯著下降（P<0.01）；針灸組RBC 和HCT 水平顯著降低（P<0.05）PLT 水平顯著升高（P<0.05），抗生素組NEU%、RBC、HGB 和HCT 水平顯著降低（P<0.05），針灸+抗生素組NEU%、RBC 和HCT 水平極顯著降低（P<0.01）HGB 水平顯著降低（P<0.05）PLT 水平顯著升高（P<0.05）。

3 討論

針灸療法是中獸醫(yī)學(xué)科的重要構(gòu)成部分，以中獸醫(yī)基礎(chǔ)理論為引導(dǎo)，經(jīng)絡(luò)腧穴為基礎(chǔ)，通過(guò)一定手法針刺來(lái)防治疾病。 針灸可以提高疼痛閾值，具有鎮(zhèn)痛作用，也可以降低血清炎癥因子水平，中西醫(yī)結(jié)合的治療方法一直是現(xiàn)代獸醫(yī)臨床研究的熱點(diǎn)內(nèi)容，有研究表明，中西醫(yī)結(jié)合治療腹瀉的總有效率和治愈率與單純西醫(yī)治療相比具有顯著差異具有更好的治療效果，與模型組相比， 針灸組和抗生素組犬只血清中CRP 含量顯著降低，而針灸+抗生素組犬只的血清中CRP含量極顯著降低且針灸+抗生素組犬只血清中CRP 含量顯著低于針灸組和抗生素組。 WBC 在機(jī)體中起著至關(guān)重要的防御作用，通過(guò)其吞噬功能和分泌細(xì)胞因子等途徑參與機(jī)體的防御反應(yīng)，白細(xì)胞亞群的增加或減少可以反映機(jī)體的免疫功能。 而與腹瀉模型組相比，針灸組、抗生素組和針灸+抗生素組RBC 和HCT 水平顯著降低PLT 水平顯著升高。與單獨(dú)應(yīng)用針灸治療和抗生素藥物治療相比，聯(lián)合應(yīng)用針灸和抗生素藥物在緩解機(jī)體炎癥反應(yīng)和減輕機(jī)體因腹瀉導(dǎo)致的脫水方面具有更顯著的效果。

4 小結(jié)

針灸與抗生素藥物聯(lián)合應(yīng)用對(duì)番瀉葉導(dǎo)致的犬腹瀉在糞便分級(jí)、體重變化、血糖水平、CRP水平、全身炎癥反應(yīng)和機(jī)體脫水等方面表現(xiàn)出良好的治療作用，且較單獨(dú)應(yīng)用針灸或單獨(dú)應(yīng)用抗生素藥物同樣具有一定的治療效果。 由此可見(jiàn)，針灸與抗生素藥物聯(lián)合應(yīng)用治療犬腹瀉在未來(lái)的寵物臨床應(yīng)用方面具有很大潛力。