超高效液相色譜法在藥品食品檢測(cè)中的應(yīng)用

冉國(guó)生 曾艷 付靜

【摘要】目的：探究和分析超高效液相色譜法在藥品食品檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值。方法：以六盤水市檢驗(yàn)檢測(cè)中心2022年1—12月進(jìn)行檢驗(yàn)的40種藥品食品作為研究對(duì)象，采用隨機(jī)數(shù)字表法將其分為對(duì)照組和觀察組，每組20種。對(duì)照組應(yīng)用高效液相色譜法檢測(cè)，觀察組應(yīng)用超高效液相色譜法檢測(cè)。對(duì)比兩組藥品食品徹底分離率、檢測(cè)準(zhǔn)確率、平均分析時(shí)間、檢測(cè)時(shí)間。結(jié)果：觀察組藥品食品徹底分離率、檢測(cè)準(zhǔn)確率高于對(duì)照組；觀察組藥品食品平均分析時(shí)間、檢測(cè)時(shí)間短于對(duì)照組；兩組對(duì)比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：超高效液相色譜法在藥品食品檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值顯著，具有檢測(cè)準(zhǔn)確率高、檢測(cè)速度快等優(yōu)勢(shì)，值得推廣應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】超高效液相色譜法；藥品；食品；檢測(cè)

【DOI編碼】10.3969/j.issn.1674-4977.2024.03.009 Application of Ultra-High Performance Liquid Chromatography in Drug and Food Analysis

RAN Guosheng， ZENG Jing， FU Jing

（Liupanshui Inspection and Examination Centre， Liupanshui 553001， China）

Abstract： Purpose： To explore and analyze the application value of ultra-high performance liquid chromatography in drug and food detection. Methods： Forty kinds of drugs and food inspected by Liupanshui Inspection and Examination Centre from January to December 2022 were selected as the research objects. They were divided into a control group and an observation group using a random number table method， with 20 kinds in each group. The control group was tested using high performance liquid chromatography， while the observation group was tested using ultra-high performance liquid chromatography. The thorough separation rate， detection accuracy， average analysis time， and detection time of the two groups of drugs and food were compared. Results： The observation group had a higher thorough separation rate and detection accuracy compared to the control group. The average analysis time and detection time of drugs and food in the observation group were shorter than those in the control group. The differences between the two groups were significant with statistical significance （P<0.05）. Conclusion： The application value of ultra-high performance liquid chromatography in drug and food detection is significant， with advantages such as high detection accuracy and fast detection speed， which are worth promoting and applying.

Keywords： ultra-high performance liquid chromatography； drug； food； detection

藥品食品的檢測(cè)多采用高效液相色譜法。這是一種快速的分析分離技術(shù)，能夠有效保障藥品食品檢測(cè)質(zhì)量和安全[1]。隨著高效液相色譜技術(shù)的不斷發(fā)展，一種更加高效的分析分離技術(shù)——超高效液相色譜法在高效液相色譜法的基礎(chǔ)上衍生出來。超高效液相色譜法在高效液相色譜法的基礎(chǔ)上引入了低系統(tǒng)體積、小顆粒填料、快速檢測(cè)手段等全新技術(shù)，能夠快速分離和檢測(cè)小顆粒物質(zhì)，且自動(dòng)化程度高。然而，目前關(guān)于超高效液相色譜法在藥品食品檢測(cè)中應(yīng)用的實(shí)踐研究并不多見?；诖耍疚奶骄亢头治隽顺咝б合嗌V法在藥品食品檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值。

1資料與方法

1.1一般資料

以六盤水市檢驗(yàn)檢測(cè)中心2022年1—12月進(jìn)行檢驗(yàn)的40種藥品食品作為研究對(duì)象，采用隨機(jī)數(shù)字表法將其分為對(duì)照組和觀察組，每組各20種。對(duì)照組中藥品12種（包含7種抗生素、3種精神類藥物、1種烏納尼制劑、1種中藥飲片），食品8種（包含4種谷類、2種薯類、2種茶類）；觀察組中藥品11種（包含7種抗生素、2種精神類藥物、1種烏納尼制劑、1種中藥飲片），食品9種（包含4種谷類、3種薯類、2種茶類）。兩組藥品食品一般資料對(duì)比差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

對(duì)照組應(yīng)用高效液相色譜法檢測(cè)：將藥品食品研磨成細(xì)粉狀，取10μg樣品置于50 mL量瓶中，并往量瓶中注入適量的流動(dòng)相，對(duì)樣品進(jìn)行溶解、濾過、稀釋等處理，接著吸取20μL樣品溶液注入Agilent 1260型高效液相色譜儀（北京雷泰儀器有限公司生產(chǎn)）中，采用波長(zhǎng)為200～400 nm的紫外光譜對(duì)其進(jìn)行照射，觀察并記錄色譜圖。

觀察組應(yīng)用超高效液相色譜法檢測(cè)：將藥品食品研磨成細(xì)粉狀，取10μg樣品置于50 mL量瓶中，并往量瓶中注入適量的流動(dòng)相，對(duì)樣品進(jìn)行溶解、濾過、稀釋等處理，接著吸取20μL樣品溶液注入Nexera UHPLC LC-30A島津超高效液相色譜法儀（上海譜朗科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)）中，采用波長(zhǎng)為200～400 nm的紫外線對(duì)其進(jìn)行照射，觀察并記錄色譜圖。

1.3觀察指標(biāo)

對(duì)比兩組藥品食品徹底分離率、檢測(cè)準(zhǔn)確率、平均分析時(shí)間、檢測(cè)時(shí)間。

1.4統(tǒng)計(jì)方法

本次研究采用SPSS 19.0軟件對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析，計(jì)量資料和計(jì)數(shù)資料分別用（xˉ±s）、%表示，用t、？2進(jìn)行檢驗(yàn)。結(jié)果P<0.05，表明兩組間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果分析

2.1兩組藥品食品徹底分離率、檢測(cè)準(zhǔn)確率對(duì)比

觀察組藥品食品徹底分離率、檢測(cè)準(zhǔn)確率高于對(duì)照組，兩組對(duì)比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2兩組藥品食品平均分析時(shí)間、檢測(cè)時(shí)間對(duì)比

觀察組藥品食品平均分析時(shí)間、檢測(cè)時(shí)間短于對(duì)照組，兩組對(duì)比差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2。

3討論

由于人們對(duì)藥品和食品質(zhì)量安全的關(guān)注度逐漸加強(qiáng)，對(duì)藥品和食品檢測(cè)技術(shù)也提出了更高的要求，因而大批量藥品食品樣品需要在短時(shí)間內(nèi)完成檢測(cè)和分析[2]。為滿足藥品食品檢測(cè)要求，以往檢測(cè)人員多采用高效液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)。高效液相色譜法以液體（包含緩沖液、不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑等）為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)將流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在色譜柱內(nèi)分離流動(dòng)相中的各成分，并自動(dòng)將其傳輸至檢測(cè)器中進(jìn)行檢測(cè)，從而快速對(duì)試樣進(jìn)行檢測(cè)和分析。盡管高效液相色譜法在藥品食品檢測(cè)中具有良好的應(yīng)用價(jià)值，但是有研究指出，藥品食品樣品含量比較少時(shí)，采用高效液相色譜法檢測(cè)分離難度較大，且分離時(shí)間較長(zhǎng)，會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不理想[3]。1996年，Waters ACQUITY UPLCTM超高效液相色譜系統(tǒng)作為世界第一個(gè)商品化高效液相色譜產(chǎn)品問世。從此不少企業(yè)開始生產(chǎn)超高效色譜儀，并逐漸將超高效色譜儀投入藥品食品檢測(cè)中[4]。超高效液相色譜法是借助于高效液相色譜的理論及原理，增加了小顆粒填料、色譜峰容量、分析的通量、非常低系統(tǒng)體積、快速檢測(cè)手段等全新技術(shù)的分離檢測(cè)技術(shù)。與高效液相色譜法相比，超高效液相色譜法的分離能力更高，能夠在較快的線速、流速、反壓下對(duì)檢測(cè)樣本進(jìn)行分離，并獲得良好的檢測(cè)效果[5]。另外，相比高效液相色譜法，超高效液相色譜法還具有檢測(cè)速度快、自動(dòng)化程度高、分辨率高、檢測(cè)準(zhǔn)確度高等優(yōu)勢(shì)。在液相色譜法檢驗(yàn)過程中，固定相的顆粒度是影響色譜柱性能的主要因素。固定相的顆粒度越小，色譜柱性能越高。超高效液相色譜是通過細(xì)粒徑填料和細(xì)粒徑柱子而獲得柱效高達(dá)100，000～ 300，000的高效液相色譜技術(shù)。因此，在藥品檢測(cè)（包含原料藥、成藥、中間體各組分以及雜質(zhì)含量檢測(cè)）時(shí)常選擇使用超高效液相色譜法，這能有效提高藥品檢測(cè)的分析速度和靈敏度。

目前，超高效液相色譜法在藥品檢測(cè)中的應(yīng)用主要集中在以下幾個(gè)方面：1）藥物制劑成分、含量與雜質(zhì)檢測(cè)。采用超高效液相色譜結(jié)合光電二極管陣列/四極道爾頓分析儀可對(duì)藥物制劑成分、含量進(jìn)行定量分析，也可對(duì)藥物制劑中可能存在的氧化降解雜質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。例如，研究人員采用超高效液相色譜法對(duì)傳統(tǒng)烏納尼制劑“Itrifal”的生物活性成分進(jìn)行檢測(cè)和定量分析。結(jié)果顯示，超高效液相色譜法可準(zhǔn)確測(cè)定烏納尼制劑中特定標(biāo)志物單寧酸、沒食子酸、兒茶素和槲皮素等成分含量。2）中藥成分檢測(cè)。中藥的組成較為復(fù)雜，因而采用高效液相色譜法對(duì)中藥進(jìn)行檢測(cè)會(huì)出現(xiàn)藥物成分分離困難的問題，而采用超高效液相色譜法檢測(cè)，則能有效避免上述問題發(fā)生。因?yàn)槌咝б合嗌V法能分離更多的色譜峰，且分辨率高，所以使用超高效液相色譜法能快速、準(zhǔn)確地測(cè)定出中成藥的成分。3）藥動(dòng)學(xué)檢測(cè)。測(cè)定藥品的藥動(dòng)學(xué)能幫助人們更加全面地了解和研究藥物的機(jī)理。有研究指出，高效液相色譜法在檢測(cè)小鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)方面具有良好的應(yīng)用價(jià)值[6]。高效液相色譜法主要是采用電噴霧電離（ESI正離子模式）-多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式串聯(lián)質(zhì)譜對(duì)小鼠血樣中的分析物進(jìn)行定量分析，并采用藥物和統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)相應(yīng)數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合，從而測(cè)定小鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)。

超高效液相色譜法在食品檢測(cè)中的應(yīng)用主要集中在以下幾個(gè)方面：1）食品添加劑檢測(cè)。為達(dá)到食物保鮮的目的，一些商家往往會(huì)在食品中加入防腐劑、甜味劑、著色劑、護(hù)色劑、膨松劑等人工合成物質(zhì)。這些添加劑會(huì)對(duì)食用者的身體健康造成嚴(yán)重的危害，故檢測(cè)食品添加劑對(duì)保障人們飲食安全具有重要意義。黃焯枝等[7]采用超高效液相色譜法對(duì)飲料進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示，超高效液相色譜法可以檢測(cè)出飲料中EDTA-2Na含量。2）食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)。農(nóng)藥殘留是影響食品安全的重要危險(xiǎn)因素之一，因而需要加強(qiáng)食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)。臨床研究指出，采用超高效液相色譜法可以建立一種對(duì)食品樣品中農(nóng)藥殘留的高通量、快速分析方法。該檢測(cè)方法不僅能分析和評(píng)估食品中是否存在農(nóng)藥殘留，還能檢測(cè)出各種農(nóng)藥殘留率，從而為食品安全評(píng)估提供可靠的依據(jù)。例如，將超高效液相色譜法應(yīng)用于茶葉測(cè)定，可準(zhǔn)確檢測(cè)出茶葉中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的含量。因此，超高效液相色譜法在2016—2019年的全國(guó)不同食品基質(zhì)的農(nóng)藥調(diào)查分析中取得了良好的表現(xiàn)。

本研究對(duì)兩組藥品食品分別應(yīng)用高效液相色譜法及超高效液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示：超高效液相色譜法檢測(cè)組藥品食品徹底分離率（100.00%）、檢測(cè)準(zhǔn)確率（100.00%）高于高效液相色譜法檢測(cè)組（80.00%）、（90.00%）；超高效液相色譜法檢測(cè)組藥品食品平均分析時(shí)間（2.57±0.28）min、檢測(cè)時(shí)間（4.08±0.37）min，短于高效液相色譜法檢測(cè)組（15.92±1.46）min、（18.69±2.05）min，與羅鳴[8]研究中得出的超高效液相色譜法檢測(cè)組藥品平均分析時(shí)間（2.41±0.11）min短于高效液相色譜法檢測(cè)組（15.34±1.47）min結(jié)論類似，這說明超高效液相色譜法在藥品食品檢測(cè)中的應(yīng)用效果確切。

綜上所述，超高效液相色譜法在藥品食品檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值顯著，具有檢測(cè)準(zhǔn)確率高、檢測(cè)速度快等優(yōu)勢(shì)，值得進(jìn)一步推廣應(yīng)用。

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[8]羅鳴.藥物檢驗(yàn)分析中應(yīng)用超高效液相色譜法的研究[J].江西醫(yī)藥，2022，57（5）：450-453.

【作者簡(jiǎn)介】

冉國(guó)生，男，1974年出生，助理工程師，研究方向?yàn)樗幤窓z驗(yàn)。

（編輯：李鈺雙）