張金平
在疾控檢測(cè)工作中,微生物檢驗(yàn)是一種非常常見(jiàn)的檢驗(yàn)技術(shù)手段。對(duì)于普通民眾來(lái)說(shuō),微生物檢驗(yàn)是十分神秘的,這篇文章將為您揭開(kāi)微生物檢驗(yàn)的神秘面紗,讓我們一起來(lái)了解關(guān)于微生物檢驗(yàn)的那些事兒。
微生物檢驗(yàn)是一種通過(guò)對(duì)微生物的檢驗(yàn),明確微生物種類、數(shù)量、分布、活性等信息的一種技術(shù)手段。在疾病防控中,微生物檢驗(yàn)是非常重要的,能夠及時(shí)發(fā)現(xiàn)可能存在的病原體,對(duì)疾病的傳播與流行情況進(jìn)行評(píng)估,同時(shí)為臨床治療與預(yù)防進(jìn)行指導(dǎo)。
幫助醫(yī)生診斷與治療疾病? ?通過(guò)微生物檢驗(yàn),醫(yī)生能夠明確患者所感染病原體的類型、數(shù)量等,從而幫助醫(yī)生判斷患者的病原體感染情況,為患者的臨床診斷治療與疾病防控提供必要依據(jù)。
預(yù)防感染在手術(shù)過(guò)程中或手術(shù)結(jié)束后,經(jīng)常會(huì)由于微生物感染而引起一系列相對(duì)嚴(yán)重的并發(fā)癥,對(duì)患者的生命健康造成影響。通過(guò)對(duì)手術(shù)器械、環(huán)境以及患者進(jìn)行微生物檢測(cè),能夠及時(shí)發(fā)現(xiàn)并控制潛在的微生物污染源,從而盡可能降低出現(xiàn)手術(shù)并發(fā)癥的可能。在手術(shù)結(jié)束后也可以通過(guò)微生物檢測(cè)來(lái)了解患者術(shù)后的健康程度,及時(shí)調(diào)整護(hù)理方案。
抗生素治療在很多疾病的治療都需要使用抗生素來(lái)降低感染,但是在當(dāng)下社會(huì)中廣泛存在抗生素濫用的情況,這就會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌的耐藥性不斷增加。這種情況下,僅僅依靠經(jīng)驗(yàn)性治療,無(wú)法滿足臨床的需求。微生物檢驗(yàn)?zāi)軌驇椭t(yī)生判斷細(xì)菌對(duì)抗生素的敏感性,從而為患者選擇最佳的治療方案,避免無(wú)效應(yīng)用抗生素。
預(yù)防傳染病? 微生物檢驗(yàn)?zāi)軌驅(qū)魅静〉牟≡w進(jìn)行監(jiān)測(cè),及時(shí)發(fā)現(xiàn)傳染病的暴發(fā)與傳播趨勢(shì),以便采用相應(yīng)的控制措施來(lái)遏制傳染病的傳播。例如,在新冠肺炎暴發(fā)時(shí),對(duì)患者的鼻咽部樣本進(jìn)行核酸檢測(cè),能夠快速診斷出感染者,從而及時(shí)對(duì)感染者采取有效的治療與隔離措施,避免疫情大范圍傳播。微生物檢驗(yàn)還可以進(jìn)行環(huán)境衛(wèi)生檢驗(yàn),比如通過(guò)對(duì)水體、土壤等環(huán)境中的微生物進(jìn)行檢測(cè),可盡早發(fā)現(xiàn)環(huán)境中存在潛在的病原體,以預(yù)防疾病的發(fā)生。此外,在食品中也存在很多病原體,比如大腸桿菌、沙門(mén)氏菌等,通過(guò)對(duì)食品中的病原體進(jìn)行檢測(cè),能夠及時(shí)發(fā)現(xiàn)存在的食品安全問(wèn)題,以避免出現(xiàn)食品污染事件的發(fā)生。
采集樣本在進(jìn)行微生物檢驗(yàn)時(shí)首先需要做的就是進(jìn)行樣本采集。整個(gè)采集過(guò)程中,對(duì)取樣人員與制樣人員都有比較高的要求,既要確保樣品的代表性與一致性,又要保障整個(gè)微生物檢驗(yàn)過(guò)程在無(wú)菌操作條件下進(jìn)行。在取樣時(shí),需要根據(jù)不同的產(chǎn)品類型與狀態(tài),采用不同的取樣方式與標(biāo)準(zhǔn)。為了確保樣品的完整性,在取樣過(guò)程中需要對(duì)所取樣品進(jìn)行及時(shí)、準(zhǔn)確地標(biāo)記,比如樣品名稱、描述、取樣人、時(shí)間、地點(diǎn)等。在采集樣本結(jié)束后,需要對(duì)裝有樣品的包裝物進(jìn)行封口,讓樣品盡可能在原有的狀態(tài)下迅速運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室
真菌、細(xì)菌培養(yǎng)進(jìn)行真菌細(xì)菌培養(yǎng)的主要目的是促使真菌或細(xì)菌在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)與繁殖,并形成菌落。采集樣本之后,需要根據(jù)樣本的不同類型采用不同的方法對(duì)其進(jìn)行有效處理,如稀釋培養(yǎng)基、離心沉淀等,對(duì)樣本中的細(xì)菌和其他雜質(zhì)進(jìn)行分離,以便后續(xù)檢測(cè)。在經(jīng)過(guò)有效處理后,需要將樣本接種在含有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基上,并在合適的條件下進(jìn)行培養(yǎng)。不同類型的微生物有著不同的生長(zhǎng)要求,所以會(huì)使用不同的培養(yǎng)基和條件。
菌種鑒定? ?在培養(yǎng)出菌落后,需要對(duì)菌落進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,以及采用生化、血清、質(zhì)譜技術(shù)等對(duì)菌落的菌種進(jìn)行鑒定,初步確定細(xì)菌的類型。形態(tài)學(xué)觀察指的是觀察細(xì)菌的大小、形狀、顏色等形態(tài)學(xué)上的特征。鑒定指的是對(duì)微生物的代謝產(chǎn)物進(jìn)行分析,對(duì)細(xì)菌的蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)進(jìn)行質(zhì)譜分析,從而對(duì)菌種進(jìn)行全面了解。
藥敏試驗(yàn)?在明確微生物種類之后,需要進(jìn)行藥敏試驗(yàn)來(lái)確定微生物對(duì)抗生素等藥物的敏感性,幫助患者確定最佳治療方案。當(dāng)下微生物檢驗(yàn)中進(jìn)行的藥敏試驗(yàn)主要有最小抑菌濃度法、紙片擴(kuò)散法等。在進(jìn)行試驗(yàn)前,要提前準(zhǔn)備好各種試驗(yàn)藥物,并將微生物分離在瓊脂平面上進(jìn)行分離純化,確保能夠得到純凈的微生物菌株。在對(duì)微生物進(jìn)行藥敏試驗(yàn)的時(shí)候,需要嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)室的各種條件以及試驗(yàn)藥物的濃度。在試驗(yàn)結(jié)束后,需要立即將試驗(yàn)結(jié)果記錄,以便為疾病的預(yù)防與控制提供必要數(shù)據(jù)支持。
分子生物學(xué)方法?某些微生物可能需要通過(guò)分子生物學(xué)的方法進(jìn)一步鑒定,比如基因測(cè)序、PCR技術(shù)等,這些鑒定方法能夠確定細(xì)菌的特定基因序列,從而幫助更加準(zhǔn)確地識(shí)別細(xì)菌的種類與亞型。
樣本的保存與運(yùn)輸? 微生物檢驗(yàn)樣品應(yīng)當(dāng)在取樣后6小時(shí)以內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn),不同微生物對(duì)環(huán)境的要求不同,所以在樣品采集結(jié)束之后需要在適當(dāng)?shù)臈l件下進(jìn)行運(yùn)輸與保存,避免微生物生長(zhǎng)或變異。在樣品保存期間需要注意樣品的密封性,避免樣品在運(yùn)輸過(guò)程中受到外界的污染。如果運(yùn)輸?shù)木嚯x相對(duì)較遠(yuǎn),可以采用低溫保存的方式進(jìn)行運(yùn)輸,并且在運(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中做好標(biāo)識(shí),避免樣品混淆或遺失。在運(yùn)送冷凍和易腐壞樣品時(shí)需要在包裝容器內(nèi)添加適量的冷卻劑或冷凍劑,但是冷卻劑和冷凍劑不可以與樣品直接接觸,只需保障在運(yùn)輸過(guò)程中樣品不升溫或不融化即可。在必要情況下,可以在運(yùn)輸過(guò)程中再次添加冷卻劑或冷凍劑。
培養(yǎng)基的滅菌? 培養(yǎng)基被分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等,培養(yǎng)基的滅菌與使用直接關(guān)乎生物檢驗(yàn)的質(zhì)量。在每次配制前,都需要注意生產(chǎn)日期與保質(zhì)期,檢查開(kāi)瓶日以及瓶口的密封性,確保培養(yǎng)基的質(zhì)量。在進(jìn)行培養(yǎng)基配制的時(shí)候,稱量一定要準(zhǔn)確。在滅菌時(shí)需要遵循現(xiàn)配制先滅菌的原則,如果配置好的培養(yǎng)基沒(méi)有及時(shí)滅菌,則不能長(zhǎng)時(shí)間放置,更不可以隔夜使用。滅菌后的培養(yǎng)基可以放在冰箱里保存,一般不超過(guò)3天,最多可以保存一周,而且要遵循先入先出的原則,先配制的要先使用。在使用時(shí),不可以長(zhǎng)時(shí)間使培養(yǎng)基處于高溫狀態(tài),在進(jìn)行微生物檢測(cè)時(shí)溫度不可過(guò)高,避免將微生物燙死;溫度也不能過(guò)低,過(guò)涼會(huì)使培養(yǎng)基結(jié)塊凝固,不利于觀察。
微生物檢驗(yàn)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域上有著十分廣泛的應(yīng)用,能夠?yàn)楦鱾€(gè)方面提供必要的數(shù)據(jù)支持。在進(jìn)行微生物檢驗(yàn)時(shí),工作人員一定要嚴(yán)格遵守檢驗(yàn)流程,注意檢驗(yàn)中的注意事項(xiàng),確保檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確。
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