抑郁癥病證結(jié)合動(dòng)物模型研究進(jìn)展

〔摘要〕 抑郁癥是臨床常見情緒障礙疾病，是當(dāng)今社會(huì)重要的公共衛(wèi)生問題。中醫(yī)藥在治療抑郁癥方面有豐富的臨床經(jīng)驗(yàn)，并且有明確的臨床療效，但其作用機(jī)制尚未完全明確?？茖W(xué)可靠的病證結(jié)合動(dòng)物模型是探索中醫(yī)藥防治抑郁癥相關(guān)機(jī)制的關(guān)鍵。通過查詢相關(guān)中文數(shù)據(jù)庫，歸納總結(jié)6種抑郁癥病證結(jié)合動(dòng)物模型，包括肝氣郁結(jié)證、肝郁脾虛證、腎陰虛證、腎陽虛證、陰虛內(nèi)熱證、氣虛證。對(duì)6種病證結(jié)合的具體造模方法和模型評(píng)價(jià)進(jìn)行簡(jiǎn)單的闡述，同時(shí)提出并分析目前研究的不足之處，以期為研究人員提供參考。

〔關(guān)鍵詞〕 抑郁癥；病證結(jié)合；動(dòng)物模型；中醫(yī)證候；模型評(píng)價(jià)；研究進(jìn)展

〔中圖分類號(hào)〕R277 〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A 〔文章編號(hào)〕doi：10.3969/j.issn.1674－070X.２０24.09.027

Research progress on animal models of depression integrating

disease and pattern

MA Yulong1，2， JIA Ran1，2， ZHANG Miaomiao1， QIN Runsun1， CHEN Haiyan1， JIN Jie1*

1. The Third Department of Encephalopathy， the First Hospital of Henan University of Chinese Medicine， Zhengzhou，

Henan 450000， China; 2. The First Clinical Medical College of Henan University of Chinese Medicine， Zhengzhou，

Henan 450046， China

〔Ａｂｓｔｒａｃｔ〕 Depression is a common clinical emotional disorder and an important public health problem in today's society. Chinese medicine has rich clinical experience and definite therapeutic efficacy in treating depression， but its mechanism of action is not yet fully clear. Scientific and reliable animal models that integrate disease and pattern is crucial for exploring the mechanisms related to preventing and treating depression with Chinese medicine. By querying relevant Chinese database， this study has summarized six kinds of animal models of depression integrating disease and pattern， including models for liver qi stagnation pattern， liver stagnation with spleen deficiency pattern， kidney yin deficiency pattern， kidney yang deficiency pattern， yin deficiency-induced internal heat pattern， and qi deficiency pattern. The specific modeling methods and evaluations of these six integrated disease and pattern models have been briefly elucidated. Additionally， the shortcomings of the current research have been proposed and analyzed in order to provide reference for researchers.

〔Ｋｅｙｗｏｒｄｓ〕 depression; integrating disease and pattern; animal model; TCM pattern; model evaluation; research progress

抑郁癥是一種高度異質(zhì)性的情緒障礙疾病，以情緒低落、興趣喪失、精力不足為基本癥狀群，并伴有心理癥狀群、軀體癥狀群和認(rèn)知癥狀群[1]。研究顯示，在全球范圍內(nèi)，每年約有5%的成年人患有抑郁癥，是當(dāng)今社會(huì)重要的公共衛(wèi)生問題，并預(yù)測(cè)2030年抑郁癥將成為全球疾病負(fù)擔(dān)的首要原因[2-3]。我國(guó)研究報(bào)道，成年人群抑郁癥的終生患病率為3.4%，且女性患病率高于男性[4]。抑郁癥的病因和病理生理機(jī)制尚未完全清楚，目前研究認(rèn)為單胺類神經(jīng)遞質(zhì)假說、下丘腦-垂體-腎上腺（hypothalamic-pituitary-adrenal，HPA）軸假說、免疫炎癥假說、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子假說、神經(jīng)可塑性和神經(jīng)發(fā)生假說等均與抑郁癥發(fā)病機(jī)制相關(guān)[5-6]。

抑郁癥在中醫(yī)學(xué)中可歸屬于“郁證”“百合病”“臟躁”等情志病范疇。郁證的病名始見于《醫(yī)學(xué)正傳·郁證》，但早在《素問·舉痛論篇》中就有關(guān)于情志致病的論述?，F(xiàn)代《中醫(yī)內(nèi)科學(xué)》[7]認(rèn)為，抑郁癥的主要病因是情志內(nèi)傷，與臟氣易郁密切相關(guān)；基本病機(jī)為氣機(jī)郁滯、臟腑功能失調(diào)。中醫(yī)藥在治療抑郁癥方面有豐富的臨床經(jīng)驗(yàn)，研究發(fā)現(xiàn)，中藥可通過多種途徑發(fā)揮抗抑郁作用[8]，但其作用機(jī)制尚未完全明確。病證結(jié)合動(dòng)物模型是中醫(yī)藥基礎(chǔ)研究的重要載體，能夠體現(xiàn)中醫(yī)臨床辨病與辨證相結(jié)合的特點(diǎn)，是中醫(yī)藥現(xiàn)代化研究較理想的動(dòng)物模型[9-10]。因此，建立科學(xué)穩(wěn)定的抑郁癥病證結(jié)合動(dòng)物模型，有助于輔助模擬其生理病理狀態(tài)及中醫(yī)證候的特征，幫助探索中醫(yī)藥防治抑郁癥的相關(guān)機(jī)制，推動(dòng)中醫(yī)藥治療抑郁癥的發(fā)展。

1 抑郁癥動(dòng)物模型的建立與評(píng)價(jià)

科學(xué)合適的動(dòng)物模型是開展抑郁癥基礎(chǔ)研究的重要工具，如探索抑郁癥的發(fā)病機(jī)制及抗抑郁藥物的藥理作用。抑郁癥的模型動(dòng)物多為大鼠和小鼠，以SD大鼠、天生對(duì)應(yīng)激敏感的WKY大鼠、天生嗜酒的FH大鼠等為造模對(duì)象[11]。抑郁癥模型評(píng)價(jià)多基于動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)（包括糖水偏好實(shí)驗(yàn)、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)、懸尾實(shí)驗(yàn)、新奇物體探索實(shí)驗(yàn)、新奇環(huán)境攝食實(shí)驗(yàn)等），通過觀測(cè)行為學(xué)指標(biāo)或結(jié)合相關(guān)生化指標(biāo)評(píng)價(jià)抑郁癥模型的有效性[12]。目前，抑郁癥動(dòng)物模型主要有以下幾種。

1.1 應(yīng)激模型

應(yīng)激是抑郁癥發(fā)生發(fā)展的重要危險(xiǎn)因素，應(yīng)激模型包括慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激、慢性束縛應(yīng)激、習(xí)得性無助應(yīng)激、行為絕望應(yīng)激、社會(huì)失敗應(yīng)激、母嬰分離應(yīng)激模型[13]。慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激和慢性束縛應(yīng)激是使用最廣泛的環(huán)境應(yīng)激模型[13-14]。慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激是將動(dòng)物長(zhǎng)期置于溫和不可預(yù)知的應(yīng)激環(huán)境中，采用多種低強(qiáng)度應(yīng)激方法（包括晝夜顛倒、電擊、斷水、斷食、高溫刺激、潮濕墊料、傾斜鼠籠、夾尾等），每日隨機(jī)給予一種應(yīng)激，使動(dòng)物不能預(yù)料未來的應(yīng)激，平均每種應(yīng)激使用1～2次[15]。慢性束縛應(yīng)激是將動(dòng)物的身體進(jìn)行束縛，將四肢捆綁固定，束縛于木板上或束縛于自制束縛管內(nèi)，使動(dòng)物無法移動(dòng)、翻身等，每日束縛1～2次，每次3 h[16]。慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激是經(jīng)典且廣泛使用的抑郁癥動(dòng)物模型[14-15]，該模型長(zhǎng)期的應(yīng)激與抑郁癥患者病因較相似，且引起的行為學(xué)和神經(jīng)系統(tǒng)改變與抑郁癥患者相似，其主要缺點(diǎn)是耗時(shí)，工作量大，動(dòng)物對(duì)實(shí)驗(yàn)條件的變化反應(yīng)敏感。

1.2 藥物誘導(dǎo)模型

藥物誘導(dǎo)的抑郁癥模型是基于臨床上藥物之間的相互作用而設(shè)立的，藥物主要包括利血平、糖皮質(zhì)激素、5-羥色氨酸、高劑量阿撲嗎啡。利血平是一種單胺遞質(zhì)耗竭劑，造模方法多采用腹腔注射利血平（每日2～4 mg/kg），通過單次注射或多次注射（連續(xù)注射3 d），誘導(dǎo)動(dòng)物體溫下降、眼瞼下垂、木僵狀態(tài)等特征[17]。糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)模型是基于應(yīng)激假說建立的，造模方法采用腹腔注射或皮下注射氫化可的松（每日25 mg/kg），持續(xù)21 d或30 d，通過人為改變動(dòng)物糖皮質(zhì)激素的水平，模擬抑郁癥的生物學(xué)變化[17]。

1.3 手術(shù)模型

嗅球切除是最常用的抑郁癥動(dòng)物手術(shù)模型，嗅球位于端腦前端，與邊緣系統(tǒng)功能相關(guān)，嗅球損傷可引起情緒、行動(dòng)、內(nèi)分泌的異常，造模方法普遍采用嗅球吸除[13]。嗅球切除模型模擬抑郁癥相似度高，但其手術(shù)技術(shù)要求高，一致性難以控制，動(dòng)物死亡率高。

1.4 遺傳模型

抑郁癥的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，具有一定的遺傳因素，目前常見的遺傳模型有FSL大鼠模型、WKY大鼠模型、先天性習(xí)得性無助cLH大鼠模型[13，18]。

2 抑郁癥病證結(jié)合動(dòng)物模型

2.1 肝郁證

2.1.1 肝氣郁結(jié)證 抑郁癥初起多以肝郁為主，因情志內(nèi)傷，致肝失條達(dá)，氣機(jī)不暢，而成肝氣郁結(jié)；抑郁癥肝氣郁結(jié)證臨床癥狀多見精神抑郁、善太息、胸悶脅脹、脘悶噯氣、納食差、大便不調(diào)等[7，19]。

宋煒熙等[20]給予SD大鼠慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激+孤養(yǎng)法+頸部戴枷法造模21 d，采用糖水偏好實(shí)驗(yàn)、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)其模型的有效性。該模型鼠出現(xiàn)水平運(yùn)動(dòng)和垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)明顯減少、糖水偏好程度降低、進(jìn)食量減少。該研究主要基于行為學(xué)指標(biāo)進(jìn)行模型的證候評(píng)價(jià)，對(duì)于中醫(yī)證候評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)未見詳細(xì)描述。周國(guó)兒等[21]給予ICR小鼠慢性束縛應(yīng)激造模35 d，根據(jù)一般狀態(tài)、體質(zhì)量變化及強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、自主活動(dòng)實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)其模型有效性；同時(shí)，基于行為學(xué)指標(biāo)、精神狀態(tài)、皮毛色澤、活動(dòng)度及糞便情況等進(jìn)行中醫(yī)證候評(píng)價(jià)。該模型具有抑郁癥肝氣郁結(jié)證的典型臨床表現(xiàn)，說明該方法可成功建立抑郁癥肝氣郁結(jié)證模型。王偉等[22]給予Wistar大鼠慢性束縛應(yīng)激+孤養(yǎng)法造模21 d，采用糖水偏好實(shí)驗(yàn)、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)其模型的有效性。該模型鼠出現(xiàn)水平運(yùn)動(dòng)、垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)下降，糖水偏好程度下降，排便量增多。該研究基于行為學(xué)指標(biāo)進(jìn)行模型證候評(píng)價(jià)，但對(duì)于中醫(yī)證候的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)未進(jìn)行詳細(xì)描述。

綜上所述，抑郁癥肝氣郁結(jié)證動(dòng)物模型所采用動(dòng)物多為大鼠和小鼠，根據(jù)文獻(xiàn)所得方法有3種：慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激+孤養(yǎng)法+頸部戴枷法、慢性束縛應(yīng)激、慢性束縛應(yīng)激+孤養(yǎng)法。抑郁癥肝氣郁結(jié)證模型的造模思路主要包括在抑郁癥應(yīng)激模型上進(jìn)行中醫(yī)辨證，或在抑郁癥應(yīng)激模型上施加其他物理因素，如孤養(yǎng)法、頸部戴枷法；多采用糖水偏好實(shí)驗(yàn)、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)等行為學(xué)指標(biāo)和中醫(yī)證候核心特征來評(píng)價(jià)所建立的病證結(jié)合模型是否成功。抑郁癥肝氣郁結(jié)證模型通過結(jié)合物理因素模擬中醫(yī)病因和病程，常用行為學(xué)指標(biāo)對(duì)中醫(yī)證候進(jìn)行評(píng)價(jià)。然而，在行為學(xué)指標(biāo)與中醫(yī)證候特征的等效轉(zhuǎn)化上，目前尚無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。

2.1.2 肝郁脾虛證 肝郁脾虛證是抑郁癥常見證型之一，常由肝氣郁結(jié)證轉(zhuǎn)化而來，因長(zhǎng)期肝失疏泄，氣機(jī)不暢，致橫逆克脾，脾虛失運(yùn)而成肝郁脾虛證；臨床多見精神抑郁等癥狀，伴有倦怠乏力，脘腹脹滿，或腹痛、便溏等脾虛癥狀[7，19]。

周國(guó)兒等[21]給予ICR小鼠慢性束縛應(yīng)激+喂食食醋法（飲用水中加入食醋，配制成5%食醋溶液， 全天飲用）造模35 d，根據(jù)一般狀態(tài)、體質(zhì)量變化、行為學(xué)指標(biāo)評(píng)價(jià)其模型的有效性；根據(jù)《素問·生氣通天論篇》中“味過于酸，肝氣以津，脾氣乃絕”，在慢性束縛應(yīng)激的抑郁癥模型上結(jié)合喂食食醋法，以制備抑郁癥肝郁脾虛證模型。該模型鼠出現(xiàn)懈怠懶動(dòng)，皮毛疏松、粗糙無光澤且顏色發(fā)黃，拱背，大便時(shí)干時(shí)溏，身體逐漸消瘦，行為學(xué)實(shí)驗(yàn)有顯著性差異，具有抑郁癥肝郁脾虛證的典型臨床表現(xiàn)，說明該方法可以成功建立抑郁癥肝郁脾虛證模型。唐燕萍等[23]給予SD大鼠慢性束縛應(yīng)激+過度疲勞[每日在溫水（22±1） ℃中游泳10 min]+飲食失節(jié)（隔日禁食，隔日足量給食）造模21 d，根據(jù)一般狀態(tài)、糖水偏好實(shí)驗(yàn)、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)其模型的有效性。該造模方法從病證結(jié)合入手，根據(jù)肝郁脾虛的病機(jī)，在應(yīng)激模型的基礎(chǔ)上引入過度疲勞、飲食失節(jié)的條件進(jìn)行病證模擬。該模型鼠出現(xiàn)神態(tài)倦怠、毛發(fā)干枯發(fā)黃、攝食量明顯減少、體質(zhì)量增加緩慢、大便性狀溏泄或干結(jié)改變，行為學(xué)實(shí)驗(yàn)中水平運(yùn)動(dòng)、垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)明顯減少，糖水偏好程度降低，具有抑郁癥肝郁脾虛證的典型臨床表現(xiàn)，說明該方法可以成功建立抑郁癥肝郁脾虛證模型。王君等[24]給予SD大鼠慢性束縛應(yīng)激造模21 d，根據(jù)一般宏觀體征、體質(zhì)量、進(jìn)食量、行為學(xué)指標(biāo)評(píng)價(jià)其模型的有效性，并基于此進(jìn)行中醫(yī)辨證。該模型表現(xiàn)出抑郁癥肝郁脾虛證的典型臨床表現(xiàn)，說明該方法可成功建立抑郁癥肝郁脾虛證模型。童萍等[25]給予ICR小鼠慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激+灌胃15%大黃粉懸液0.5 mL/d（于應(yīng)激第15～28日，每日灌胃3次：早上0.2 mL，中午0.15 mL，晚上0.15 mL），造模周期為28 d，采用體質(zhì)量、糞便性狀、糖水偏好實(shí)驗(yàn)、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、懸尾實(shí)驗(yàn)、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)模型的有效性；從小鼠體質(zhì)量和糞便性狀進(jìn)行中醫(yī)證候評(píng)價(jià)，并采用布里斯托糞便性狀評(píng)分評(píng)估肝郁脾虛證的嚴(yán)重程度。該模型小鼠表現(xiàn)出活動(dòng)速度減慢、活躍度下降、蔗糖偏好指數(shù)降低、懸尾不動(dòng)時(shí)間和強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間延長(zhǎng)等，同時(shí)出現(xiàn)納差、體質(zhì)量增長(zhǎng)緩慢、大便稀溏的癥狀，具備抑郁癥肝郁脾虛證的癥狀學(xué)表現(xiàn)。李玉波等[26]給予SD大鼠慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激造模14周，根據(jù)糖水偏好實(shí)驗(yàn)、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、腦組織和小腸組織中5-羥色胺（5-hydroxytryptamine， 5-HT）水平評(píng)價(jià)其模型的有效性。研究者將抑郁癥臨床癥狀等效轉(zhuǎn)化為大鼠中醫(yī)宏觀表征，結(jié)合舌色的紅、綠、藍(lán)三原色（red、green、blue，RGB）值進(jìn)行中醫(yī)證候的評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)在應(yīng)激后6～8周時(shí)模型鼠抑郁癥肝郁脾虛證數(shù)量達(dá)到最大值；通過制訂抑郁癥肝郁脾虛證大鼠宏觀表征量表進(jìn)行證候積分評(píng)估，并作為證候療效判定標(biāo)準(zhǔn)，以逍遙散反證該抑郁癥肝郁脾虛證病證結(jié)合模型。但此方法的造模時(shí)間較長(zhǎng)，對(duì)每只模型鼠的觀察記錄指標(biāo)較多，工作量較大。慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激是目前抑郁癥肝郁脾虛證應(yīng)用最多的造模方法，張淼等[27]、李君玲等[28]、萬小敏等[29]、王松楠等[30]、藍(lán)敏敏等[31]研究者也采用此方法成功建立抑郁癥肝郁脾虛證動(dòng)物模型。

對(duì)于抑郁癥肝郁脾虛證動(dòng)物模型，根據(jù)文獻(xiàn)所得造模方法有5種：慢性束縛應(yīng)激+喂食食醋法、慢性束縛應(yīng)激+過度疲勞+飲食失節(jié)、慢性束縛應(yīng)激、慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激+大黃粉懸液灌胃法、慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激。抑郁癥肝郁脾虛證動(dòng)物模型所采用動(dòng)物多為大鼠和小鼠，造模思路是在抑郁癥應(yīng)激模型上直接進(jìn)行中醫(yī)證候評(píng)價(jià)，或者結(jié)合行為干預(yù)、中藥灌胃、食醋法模擬肝郁脾虛證。多采用行為學(xué)指標(biāo)評(píng)價(jià)該病證結(jié)合模型，并結(jié)合肝郁脾虛證的核心特征對(duì)中醫(yī)證候進(jìn)行評(píng)價(jià)。此類模型建立方法多樣，多為病因模型，造模方法基于中醫(yī)病因理論。中醫(yī)證候的評(píng)價(jià)思路主要依據(jù)證候的核心特征綜合評(píng)價(jià)，以判斷證候模型是否成功建立，具體方法是將行為學(xué)指標(biāo)或一般表征等效轉(zhuǎn)化為證候特征進(jìn)行評(píng)價(jià)，但缺少證候標(biāo)準(zhǔn)和轉(zhuǎn)化標(biāo)準(zhǔn)。

2.2 腎虛證

2.2.1 腎陰虛證 郁證日久耗傷陰精，肝腎陰虧，造成心腎不交，髓海不充，郁證由實(shí)證轉(zhuǎn)為虛證。抑郁癥腎陰虛證患者既有抑郁癥的核心臨床癥狀，同時(shí)具有因腎陰不足、心腎不交而出現(xiàn)虛煩少寐、易怒、健忘、頭暈耳鳴、腰膝酸軟、盜汗、口干咽燥、不嗜飲食等腎陰虛癥狀[32]。

陳曉陽等[33]給予SD大鼠慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激+灌胃甲狀腺素混懸液（每日2.5 mg/kg；甲狀腺素片用蒸餾水配成濃度為0.25 mg/mL的混懸液）造模21 d，根據(jù)一般狀態(tài)、體質(zhì)量、糖水偏好實(shí)驗(yàn)、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)抑郁癥模型的有效性；從一般狀態(tài)及體質(zhì)量評(píng)價(jià)證候模型的有效性。研究者發(fā)現(xiàn)，該模型鼠出現(xiàn)糖水偏好降低，曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中水平得分、垂直得分、清潔次數(shù)指標(biāo)下降，中央格停留時(shí)間延長(zhǎng)，一般狀態(tài)中飲水量持續(xù)升高、捉拿時(shí)易激怒、毛無光澤、大便干燥、體質(zhì)量增長(zhǎng)緩慢，具備抑郁癥腎陰虛證的表現(xiàn)。該研究團(tuán)隊(duì)繼續(xù)采用慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激+灌胃甲狀腺混懸液模型進(jìn)行研究，建立的模型具有抑郁癥腎陰虛證的典型表現(xiàn)，說明該方法可以成功建立此病證模型[34-35]。

抑郁癥腎陰虛證動(dòng)物模型的造模思路是在慢性應(yīng)激抑郁癥模型基礎(chǔ)上聯(lián)合藥物誘導(dǎo)，是典型的復(fù)合模型。該病證模型評(píng)價(jià)采用抑郁癥動(dòng)物模型的行為學(xué)指標(biāo)，結(jié)合腎陰虛證的核心臨床特征。此類模型為病理模型，基于證候核心特征進(jìn)行證候評(píng)價(jià)，但沒有體現(xiàn)中醫(yī)病因造模及中醫(yī)的病程發(fā)展，中醫(yī)證候表征及評(píng)價(jià)亦無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。

2.2.2 腎陽虛證 中醫(yī)學(xué)理論認(rèn)為，腎陽為一身之元陽，腎陽不足，命門火衰，則推動(dòng)溫煦失常，凡病累及腎陽可出現(xiàn)精神萎靡、恍惚，疲憊，頭目昏沉，記憶力下降，興趣減退，男子陽痿、遺精、早泄，女子月經(jīng)不調(diào)等癥狀[36-37]。

曹靈修等[38]給予SD大鼠慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激+肌內(nèi)注射氫化可的松注射液（于應(yīng)激第8～21日開始，每日25 mg/kg）造模，周期為21 d，根據(jù)一般情況、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)、水迷宮實(shí)驗(yàn)及血清腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、5-HT、多巴胺（dopamine，DA）、去甲腎上腺素（norepinephrine，NE）含量評(píng)價(jià)其模型的有效性；研究者發(fā)現(xiàn)該模型鼠出現(xiàn)食量減少、懶動(dòng)嗜睡、大便稀溏、肛溫降低、體質(zhì)量降低、皮毛易脫落、缺少光澤的表現(xiàn)，基于此進(jìn)行中醫(yī)證候評(píng)價(jià)，提示成功建立抑郁癥腎陽虛證模型。張楠茜等[39]同樣采取慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激+皮下注射氫化可的松注射液（每日25 mg/kg）進(jìn)行造模，周期為30 d，行為學(xué)指標(biāo)和相關(guān)生化指標(biāo)提示成功建立抑郁癥動(dòng)物模型，但未對(duì)腎陽虛證進(jìn)行中醫(yī)證候評(píng)價(jià)和描述。何書芬等[40]給予SD大鼠肌內(nèi)注射氫化可的松（每日25 mg/kg；注射用氫化可的松琥珀酸鈉粉針劑用生理鹽水配成濃度為4 mg/mL），周期為21 d，根據(jù)一般四診指標(biāo)、體質(zhì)量、體溫、糖水偏好實(shí)驗(yàn)、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)、生化指標(biāo)評(píng)價(jià)其模型的有效性。研究者發(fā)現(xiàn)該模型鼠生長(zhǎng)發(fā)育緩慢，毛發(fā)枯燥無光澤，豎毛，泄瀉，精神萎靡，對(duì)外來刺激反應(yīng)遲鈍，行動(dòng)遲緩，常蜷縮在角落，體質(zhì)量減輕，體溫降低，臟器指數(shù)降低，血漿5-HT、NE的含量升高。根據(jù)抑郁癥腎陽虛證的核心癥狀及相關(guān)生化指標(biāo)，說明該方法可以成功建立抑郁癥腎陽虛證模型。王旭艷等[41]給予SD大鼠反復(fù)不定時(shí)皮下注射皮質(zhì)酮（每日20 mg/kg；皮質(zhì)酮先用1%二甲基亞砜溶解，再加至含0.1%聚山梨酯80的生理鹽水中，超聲30 min制成均勻混懸液）造模，周期為28 d，通過糖水偏好實(shí)驗(yàn)、靜止不動(dòng)時(shí)間、一般情況評(píng)價(jià)抑郁癥腎陽虛證模型的有效性，并將血清環(huán)磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate，cAMP）水平及cAMP/環(huán)磷酸鳥苷（cyclic guanosine monophosphate，cGMP）比值、臟器指數(shù)作為腎陽虛證的生化指標(biāo)。該研究發(fā)現(xiàn)模型鼠糖水偏好降低、靜止不動(dòng)時(shí)間延長(zhǎng)，同時(shí)出現(xiàn)掉毛、畏冷扎堆、蜷縮、精神不佳、活動(dòng)量減少、進(jìn)食減少的癥狀，cAMP水平及cAMP/cGMP比值、臟器指數(shù)降低，提示抑郁癥腎陽虛證動(dòng)物模型成功建立。

目前，從腎論治郁證的研究較少且不夠深入，抑郁癥腎陽虛證動(dòng)物模型基本采用大鼠為造模動(dòng)物，造模思路較為單一，主要是給予外源性糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)。根據(jù)文獻(xiàn)所得造模方法為3種：慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激+注射氫化可的松、注射氫化可的松、注射皮質(zhì)酮。抑郁癥腎陽虛證模型的研究中，多采用行為學(xué)指標(biāo)對(duì)抑郁癥模型進(jìn)行評(píng)價(jià)，基于行為學(xué)指標(biāo)及腎陽虛證的核心特征，并結(jié)合生化指標(biāo)cAMP水平和cAMP/cGMP比值、臟器指數(shù)對(duì)中醫(yī)證候進(jìn)行評(píng)價(jià)。此類造模方法直接使用藥物誘導(dǎo)病理癥狀，是常見的病理模型。注射氫化可的松模型是中醫(yī)腎陽虛證常用的模型，同時(shí)也是抑郁癥藥物誘導(dǎo)模型的一種，但其造模方法未體現(xiàn)中醫(yī)的病因及病程發(fā)展，且藥物誘導(dǎo)的給藥時(shí)間無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。

2.3 陰虛內(nèi)熱證

潘瑾等[42]給予SD大鼠慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激+灌胃熱性中藥（每日62 g/kg，每次3 mL；熟附子、肉桂、干姜按照1∶1∶1的比例混合，進(jìn)行浸泡煎煮，65 ℃水浴濃縮為含生藥量4.1 g/mL的水煎劑）造模，周期為28 d，根據(jù)一般基礎(chǔ)狀況和行為學(xué)指標(biāo)評(píng)價(jià)其模型的有效性。研究者根據(jù)模型鼠一般狀態(tài)、體溫、肛溫、體質(zhì)量、寒熱趨向行為檢測(cè)、可代謝能指標(biāo)（通過代謝籠收集大鼠24 h食量、飲水量、尿量和糞便量，利用氧彈熱量計(jì)檢測(cè)計(jì)算大鼠單位體質(zhì)量可代謝能）進(jìn)行中醫(yī)證候評(píng)價(jià)。其后該研究團(tuán)隊(duì)[43]繼續(xù)采用此造模方法進(jìn)行研究，建立的模型具有抑郁癥陰虛內(nèi)熱證的典型癥狀。

該模型造模思路是在抑郁癥模型基礎(chǔ)上結(jié)合中藥灌胃，模擬過量服用辛溫燥熱之品導(dǎo)致陰液暗耗，陰虛無以制陽，陰陽失衡而出現(xiàn)的陰虛內(nèi)熱證。此類模型應(yīng)用較少，對(duì)于中醫(yī)宏觀表征無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，在中醫(yī)證候評(píng)價(jià)上結(jié)合寒熱趨向行為檢測(cè)、可代謝能指標(biāo)具有一定的合理性，但仍需要進(jìn)一步研究其可靠性和穩(wěn)定性。

2.4 氣虛證

陳茵等[44]給予BALB/c小鼠慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激造模28 d，根據(jù)開場(chǎng)測(cè)試、糖水偏好實(shí)驗(yàn)、懸尾實(shí)驗(yàn)、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)、負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)、新奇環(huán)境攝食、掌紋脈絡(luò)血色度測(cè)試、皮毛評(píng)分、抓力測(cè)試等行為學(xué)指標(biāo)評(píng)價(jià)其模型的有效性；以抓力、負(fù)重游泳時(shí)間作為氣虛證評(píng)價(jià)指標(biāo)。研究者發(fā)現(xiàn)，該模型鼠體質(zhì)量、糖水偏好下降，負(fù)重游泳時(shí)間減少，抓力和掌紋血色度下降，說明成功建立了抑郁癥氣虛證模型。

研究發(fā)現(xiàn)，證候的差異性受遺傳和環(huán)境所影響，在不同抑郁癥疾病模型中，BALB/c小鼠均表現(xiàn)出氣虛證候[45]。陳茵等[44]給予BALB/c小鼠慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激，通過氣虛證候檢測(cè)以及行為學(xué)指標(biāo)發(fā)現(xiàn)，此品系小鼠表現(xiàn)出氣虛證候，進(jìn)一步支持了遺傳品系的穩(wěn)定作用。慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激的BALB/c小鼠模型基于遺傳與環(huán)境進(jìn)行病證結(jié)合造模，此方法目前使用較少，需要進(jìn)一步研究和優(yōu)化。

3 總結(jié)與展望

結(jié)合以上論述，本研究發(fā)現(xiàn)抑郁癥病證結(jié)合動(dòng)物模型基本采用大鼠或小鼠作為模型動(dòng)物，多為誘發(fā)型模型，造模思路主要包括兩種。（1）在抑郁癥動(dòng)物模型上直接進(jìn)行辨證，從動(dòng)物的行為學(xué)表現(xiàn)、宏觀表征及生化指標(biāo)評(píng)價(jià)其中醫(yī)證候?qū)傩?，從而確定某一病證結(jié)合模型的有效性；或?qū)⒅嗅t(yī)證候診斷標(biāo)準(zhǔn)等效轉(zhuǎn)化為模型動(dòng)物的行為學(xué)及四診表現(xiàn)以進(jìn)行中醫(yī)證候評(píng)價(jià)。（2）采用抑郁癥動(dòng)物模型結(jié)合中醫(yī)證候因素以建立抑郁癥病證結(jié)合動(dòng)物模型，包括中藥灌胃、物理刺激、模擬中醫(yī)病因等證候因素。此類模型多為復(fù)合模型，基于中醫(yī)理論對(duì)中醫(yī)病因和病程進(jìn)行模擬，如結(jié)合過度疲勞、飲食失節(jié)、過量服用熱性中藥等。

病證結(jié)合動(dòng)物模型旨在盡可能地模擬目標(biāo)疾病及中醫(yī)證候，是展示和驗(yàn)證中醫(yī)藥干預(yù)效果的載體。目前所建立的抑郁癥病證結(jié)合動(dòng)物模型仍存在以下問題。（1）抑郁癥造模方法不統(tǒng)一。應(yīng)激誘導(dǎo)和藥物誘導(dǎo)是常用的抑郁癥動(dòng)物誘導(dǎo)模型，但不同研究者的執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)不完全相同，如應(yīng)激方式、給藥時(shí)間及劑量。（2）造模思路存在局限性，證候造模因素不統(tǒng)一。抑郁癥動(dòng)物模型結(jié)合證候單因素是常用的造模思路，證候因素及施加標(biāo)準(zhǔn)是否符合和體現(xiàn)中醫(yī)病因病機(jī)的動(dòng)態(tài)發(fā)展尚不明確。（3）抑郁癥病證結(jié)合動(dòng)物模型評(píng)價(jià)體系不標(biāo)準(zhǔn)。中醫(yī)臨床證候研究尚處于探索階段，證候評(píng)價(jià)體系未完全建立和統(tǒng)一，而抑郁癥病證結(jié)合動(dòng)物模型的證候評(píng)價(jià)方面也面臨同樣的問題。本課題組認(rèn)為中醫(yī)證候動(dòng)物模型評(píng)價(jià)思路可根據(jù)中醫(yī)學(xué)理論，探討抑郁癥中醫(yī)證型的核心證候標(biāo)準(zhǔn)，建立臨床癥狀、行為學(xué)表現(xiàn)及中醫(yī)證候表征三者之間的等效轉(zhuǎn)化標(biāo)準(zhǔn)，以核心證候表征作為證候評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)?？傊?，制備抑郁癥病證結(jié)合動(dòng)物模型需要繼續(xù)深入研究病與證之間的關(guān)系，更好地體現(xiàn)中醫(yī)病因病機(jī)理論，充分結(jié)合行為學(xué)表現(xiàn)、中醫(yī)宏觀表征與微觀指標(biāo)，完善規(guī)范模型的構(gòu)建思路和評(píng)價(jià)體系，以建立科學(xué)理想的病證結(jié)合動(dòng)物模型，進(jìn)一步揭示中醫(yī)藥防治抑郁癥的機(jī)制，推動(dòng)中醫(yī)藥現(xiàn)代化發(fā)展。

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本文引用： 馬玉龍， 賈 冉， 張苗苗， 秦潤(rùn)筍， 陳海燕， 金 杰. 抑郁癥病證結(jié)合動(dòng)物模型研究進(jìn)展[J]. 湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)， 2024， 44（9）： 1720-1726.

〔收稿日期〕2024-02-05

〔基金項(xiàng)目〕國(guó)家中醫(yī)藥管理局科技項(xiàng)目（GZY-KJS-2022-043-2）；河南省科技攻關(guān)項(xiàng)目（222102310698）；河南省自然科學(xué)基金項(xiàng)目（232300421185）；河南省中醫(yī)藥科學(xué)研究專項(xiàng)課題項(xiàng)目（2022JDZX029）。

〔通信作者〕*金 杰，男，博士，教授，碩士研究生導(dǎo)師，E-mail：j159371@126.com。