肝細(xì)胞刺激因子（ＨＳＳ）誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展

艾小明　肖　平

（1.廣東汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院,廣東,汕頭,515041,2.北京大學(xué)深圳醫(yī)院肝膽腔鏡外科，廣東，深圳，518036）

【摘要】HSS具有促進(jìn)肝癌細(xì)胞增生和抑制其分裂增生、引起肝癌細(xì)胞凋亡的雙向作用。HSS可能與多種化療藥物誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡有協(xié)同作用，并且明顯減輕化療藥物的毒副作用，對(duì)化療性肝損傷具有保護(hù)作用，有可能開創(chuàng)一種細(xì)胞因子與化療藥物相結(jié)合治療肝癌的極具潛力的新療法。

【關(guān)鍵詞】肝細(xì)胞刺激因子；肝癌；凋亡

【中圖分類號(hào)】R735.7【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1007-8517(2009)02-0016-02

肝臟是生物體內(nèi)一種具有很強(qiáng)再生能力的器官，從中分離純化出具有再生刺激功能的物質(zhì)一直是國內(nèi)外研究人員關(guān)注的重點(diǎn)。特異性的肝細(xì)胞生長刺激因子，HGF（血源性）、HSS（肝源性）、ALR（胞源性）在功能機(jī)制方面有許多共同和相似之處，又具有各自獨(dú)特的功能。在臨床上，它們既能啟動(dòng)肝損傷后的再生與修復(fù)，又能抑制某些肝癌細(xì)胞的生長，在肝病治療藥物中占有極其重要的地位。由于HSS特異性地促肝細(xì)胞生長的活性，參與肝細(xì)胞再生的調(diào)控等，一直是肝炎治療、肝細(xì)胞調(diào)控的研究熱點(diǎn)。而HSS對(duì)肝癌細(xì)胞株的作用各家報(bào)道不一，限制了HSS臨床應(yīng)用。本文就HSS誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展作一綜述。

1HSS研究概況

1975年LaBrecque從初斷乳大鼠和肝部分切除后的再生肝中提取出一種生物活性物質(zhì)，稱為肝細(xì)胞刺激因子(HSS)。它能刺激肝細(xì)胞有絲分裂，促進(jìn)肝細(xì)胞再生和肝細(xì)胞DNA的合成，加速肝臟修復(fù)，保護(hù)肝細(xì)胞的作用。其機(jī)制仍不清楚。國內(nèi)目前臨床用的促肝細(xì)胞生長素即屬于HSS類。HSS至今尚未得到純化單一的活性物質(zhì)，其分子結(jié)構(gòu)和DNA序列仍不清楚，但有研究顯示是一類分子量約為12～18kD，帶強(qiáng)負(fù)電荷、微弱疏水的多肽類物質(zhì)的總和。HSS沒有種屬特異性，但有器官特異性：HSS在體內(nèi)對(duì)骨髓、脾臟、腎等器官均不作任何反應(yīng)；在體外，對(duì)8種正常的或惡變的非肝臟起源細(xì)胞株也沒有作用，然而無論體內(nèi)、外，正?；驉鹤兊母闻K起源的細(xì)胞均能對(duì)HSS產(chǎn)生較強(qiáng)的反應(yīng)。HSS可由胎肝、再生肝中提取得到，但成年鼠肝臟提取物則無此物質(zhì)。體外翻譯實(shí)驗(yàn)表明，人胎肝細(xì)胞的多聚A-mRNA可以引導(dǎo)人HSS的生物合成，表明HSS是人胎肝組織的基因表達(dá)產(chǎn)物，而不是酶催化加工的結(jié)果。HSS存在乳肝組織或再生肝組織的肝細(xì)胞胞漿中，肝細(xì)胞膜上有相應(yīng)的受體，在非肝細(xì)胞中未發(fā)現(xiàn)HSS。HSS與其他肝再生調(diào)控因子的主要不同之處在于具有耐熱性并僅存在于生長狀態(tài)的肝臟中。

2HSS誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展

HSS具有較強(qiáng)的抗損傷能力，可能減輕多種因素(病毒、細(xì)菌、化學(xué)毒物、缺血再灌注等)引起的肝細(xì)胞凋亡的發(fā)生^[1]，它能刺激肝細(xì)胞DNA合成及肝細(xì)胞再生，并對(duì)肝細(xì)胞具有保護(hù)作用。HSS對(duì)肝癌細(xì)胞的作用各家報(bào)道不一。由于體外實(shí)驗(yàn)證明HSS對(duì)肝癌細(xì)胞株DNA合成也有促進(jìn)作用^[2]，因而HSS能否致癌變及能否應(yīng)用于肝癌治療，一直是人們關(guān)心的問題。李茹冰等研究表明，HSS的某些組份在體外尚可抑制肝癌細(xì)胞的增殖活性。大多數(shù)研究認(rèn)為低濃度時(shí)，對(duì)肝癌細(xì)胞生長無明顯刺激作用，較高濃度則有明顯抑制肝癌細(xì)胞生長作用^[3]。吳國慶等實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)^[4]HSS對(duì)正常大鼠肝臟細(xì)胞和人肝癌細(xì)胞呈促進(jìn)增生和抑制其分裂增生、引起自溶和死亡的雙向作用。研究表明^[5]，HSS對(duì)肝細(xì)胞生長起雙重調(diào)控作用，不但能促進(jìn)肝細(xì)胞DNA合成，同時(shí)還能抑制肝癌細(xì)胞生長，預(yù)防黃曲霉素導(dǎo)致的大鼠肝癌前病變。在體外實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞水平證實(shí)^[6]，HSS能抑制肝癌細(xì)胞活力，但無明顯形態(tài)學(xué)損害的表現(xiàn)。有學(xué)者通過瓊脂糖凝膠電泳及流式細(xì)胞檢測(cè)證實(shí)^[7]，肝癌細(xì)胞活性的降低系HSS和ADR的作用下發(fā)生細(xì)胞凋亡所致。其他學(xué)者通過實(shí)驗(yàn)亦得出 HSS對(duì)肝癌細(xì)胞生長具有抑制作用，且對(duì)肝癌細(xì)胞的凋亡具有促進(jìn)作用^[8]。但類似的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)尚需進(jìn)一步證實(shí)。可見HSS具有誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡的作用是肯定的。當(dāng)然，肝的再生增殖、凋亡等的調(diào)控并不是由單一因素決定的，HSS作為一種促肝生長物質(zhì)是不可能完全獨(dú)立發(fā)揮作用的。HSS單獨(dú)對(duì)肝癌細(xì)胞系的凋亡誘導(dǎo)作用很弱，很可能與多種化學(xué)藥物作為促進(jìn)劑共同發(fā)揮作用。

3HSS誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制

自發(fā)現(xiàn)HSS以來，雖然受到一些學(xué)者的關(guān)注，但HSS對(duì)相同起源的正常和惡性腫瘤細(xì)胞為何表現(xiàn)出相反的作用，其機(jī)制仍不清楚。首都醫(yī)科大學(xué)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室報(bào)道^[9]，HSS刺激肝細(xì)胞生長的機(jī)理可能是誘導(dǎo)細(xì)胞EGF受體(EGFR)mRNA的轉(zhuǎn)錄水平，上調(diào)EGFR的數(shù)量，提高EGFR的親和力和磷酸化程度，促使其內(nèi)向化。EGFR具有酪氨酸激酶活性，其活化后可誘導(dǎo)形成包括Ras在內(nèi)的細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路，最終導(dǎo)致細(xì)胞增殖^[10]。HSS促肝癌細(xì)胞生長亦可能通過調(diào)節(jié)EGFR介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)通路所為。戴杰等^[2]報(bào)道，HSS系通過調(diào)節(jié)EGFR介導(dǎo)的細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路促肝癌細(xì)胞生長。HSS與肝細(xì)胞或肝癌細(xì)胞膜表面的EGFR結(jié)合，促使EGF與受體內(nèi)向化，繼而活化EGFR，后者則作用于膜內(nèi)面的p21ras，引發(fā)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的瀑布效應(yīng)。因此，在基因水平HSS刺激EGF受體表達(dá)，可能是HSS啟動(dòng)肝細(xì)胞再生的關(guān)鍵。

有學(xué)者通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)HSS作用后的肝癌細(xì)胞突變型P53蛋白表達(dá)明顯降低，可能是HSS促進(jìn)肝癌細(xì)胞凋亡的原因之一^[8]。HSS對(duì)肝癌細(xì)胞的生長調(diào)節(jié)作用與肝癌細(xì)胞EGFR/DNA表達(dá)密切相關(guān)^[11]。HSS誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡亦可能是通過作用于細(xì)胞膜上的EGFR而發(fā)揮其生物效應(yīng)的。實(shí)際上EGF于不同細(xì)胞系可分別誘導(dǎo)凋亡及減輕凋亡。HSS與EGFR結(jié)合后引起EGFR構(gòu)象的改變^[12]。HSS進(jìn)入細(xì)胞，產(chǎn)生一系列理化反應(yīng)，最終在核內(nèi)啟動(dòng)一些基因的表達(dá)，如p53基因的表達(dá)，進(jìn)一步表現(xiàn)出其效應(yīng)。也有學(xué)者認(rèn)為HSS在促進(jìn)肝細(xì)胞再生的同時(shí)，可能同時(shí)具有促進(jìn)細(xì)胞分化的作用，而肝癌細(xì)胞凋亡的發(fā)生可能與這種尚未證實(shí)的促分化作用有關(guān)^[7]。

4HSS抗化療性肝損傷的作用

HSS通過增強(qiáng)肝細(xì)胞抗氧化能力，抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，在一定程度上拮抗CTX、CCl4的肝毒性^[13]。HSS能夠阻止化學(xué)毒物或藥物導(dǎo)致的肝細(xì)胞膜流動(dòng)性的降低，能夠有效地維持急性肝損傷后線粒體的通透性^[5]，線粒體膜通透性改變可能是細(xì)胞死亡的關(guān)鍵性機(jī)制，改善肝臟線粒體的呼吸功能，因而阻止細(xì)胞死亡。據(jù)報(bào)道，HSS能促進(jìn)肝細(xì)胞膜的穩(wěn)定性，增強(qiáng)肝細(xì)胞對(duì)化療藥物的耐受性，減輕肝細(xì)胞的損傷，提高化療效果，明顯縮小腫瘤病灶，延長生存期，并能減輕化療引起的嘔吐等消化道反應(yīng)?？梢奌SS作為一種有效的天然的肝細(xì)胞特異性保護(hù)劑應(yīng)用于臨床，可望成為化療性肝損傷有效治療方法之一。

5小結(jié)

肝癌的化療敏感性較差，全身化療反應(yīng)率在20%左右，且肝癌的聯(lián)合化療方案并未顯示出比單一藥物化療更明顯的優(yōu)勢(shì)，相反，聯(lián)合化療不可避免的具有更高的毒性。研究結(jié)果證實(shí)多種化療藥物均有誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡成為腫瘤治療的一個(gè)方向。HSS可能與多種化療藥物誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡有協(xié)同作用，并且明顯減輕化療藥物的毒副作用，對(duì)化療性肝損傷具有保護(hù)作用，應(yīng)用于人體可能發(fā)揮顯著的抗肝癌作用，有可能開創(chuàng)一種細(xì)胞因子與化療藥物相結(jié)合治療肝癌的極具潛力的新療法。

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(收稿日期：2008.12.10)