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(長春中醫(yī)藥大學(xué)，吉林 長春 130117)

六味地黃顆粒系由熟地黃、牡丹皮、山茱萸等6位中藥材制成的顆粒劑。為了控制六味地黃顆粒的質(zhì)量，保證臨床用藥效果，對(duì)六味地黃顆粒的含量測定方法進(jìn)行了研究。本文以馬錢苷為指標(biāo)，采用高效液相色譜法測定其含量，該方法靈敏、重現(xiàn)性好。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 美國Waters 600 Controler高效液相色譜儀;ReliaSil-C18柱；德國Sartorius BP211D(1/10萬)電子天平；馬錢苷由中國藥品生物制品檢定所提供；乙腈為色譜純；其他試劑均為分析純。

1.2 色譜條件 色譜柱：ReliaSil-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)；流動(dòng)相：四氫呋喃-乙腈-甲醇-0.05%H3PO4(5：40：20：585)；流速:1.2 mL/min；檢測波長：236 nm；柱溫:40℃。

1.3 方法 溶液的制備：(1)對(duì)照品溶液的制備；(2)供試品溶液的制備；(3)陰性對(duì)照品溶液的制備。

2 結(jié)果

2.1 線性關(guān)系考察 精密吸取馬錢苷對(duì)照品溶液(20.2 μg/mL)2，4，6，8，10 μL分別注入液相色譜儀，依法測定，以峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為：Y=6 668.15X+1 315 461.4，r=0.999 9。結(jié)果：馬錢苷在0.080 8～0.404 0 μg范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。

2.2 精密度試驗(yàn)[1-2]取同一份對(duì)照品溶液10 μL，重復(fù)進(jìn)樣5次,測得馬錢苷峰面積的RSD為1.23%，表明儀器精密度良好。

2.3 穩(wěn)定性試驗(yàn) 在本實(shí)驗(yàn)條件下，取供試品溶液分別在室溫避光放置0，2，4，24，36 h后依法測定，按峰面積計(jì)算RSD為0.58%，表明馬錢苷至少在36 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.4 重復(fù)性試驗(yàn) 精密稱取同一批號(hào)樣品5份，制備供試品溶液，測定馬錢苷含量，結(jié)果RSD為1.03%。表明含量測定重復(fù)性良好。

2.5 回收率試驗(yàn) 精密稱取已知含量(2.614 mg/g)樣品5份,分別加入一定量馬錢苷，制備供試品溶液并進(jìn)行測定，結(jié)果平均回收率為99.96%，RSD為1.72%(n=5)，表明此方法可行。

2.6 樣品測定[3]分別取3批(050801、050802、050803)樣品，制備供試品溶液，依法測定。結(jié)果平均含量為0.72 mg/g。結(jié)論：經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)，本品中馬錢苷含量暫定為每克不得低于0.54 mg。

3 小結(jié)

3.1 流動(dòng)相考察 參照《中華人民共和國藥典》2005年版(一部)山茱萸含量測定項(xiàng)下測定馬錢苷的流動(dòng)相及相關(guān)文獻(xiàn)，通過實(shí)驗(yàn)摸索,流動(dòng)相選用四氫呋喃-乙腈-甲醇-0.05%H3PO4(5：40：20︰585)馬錢苷具有較好的峰型和相對(duì)合理的保留時(shí)間和分離度，故選用四氫呋喃-乙腈-甲醇-0.05%H3PO4(5：40：20：585)為馬錢苷含量測定的流動(dòng)相。

3.2 樣品檢測波長 取馬錢苷對(duì)照品，加甲醇制成每l mL中含馬錢苷20.2 μg溶液,作為對(duì)照品溶液，進(jìn)行紫外檢測。結(jié)果選定測定波長λmax=236 nm。且溶劑、陰性無干擾。

[1]王 海,王衛(wèi)峰,戴 涌.山茱萸藥材中馬錢苷的含量測定方法考察[J].西北藥學(xué)雜志,1998,13(1):42.

[2]李玉紅,陳 燕,易進(jìn)海.HPLC測定馬錢苷的含量[J].華西藥學(xué)雜志,2002,17(4):295.

[3]王 寶.中成藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究[M].北京:中國中醫(yī)藥出版社,1994:115.