汪 暉，沈 智，龐萬勇

(上海查士睿華生物醫(yī)藥科技有限公司，上海 201203)

專家論壇

淺論與實驗動物相關(guān)的職業(yè)健康安全與人畜共患病

汪 暉，沈 智，龐萬勇

(上海查士睿華生物醫(yī)藥科技有限公司，上海 201203)

道義上的責(zé)任或是法律法規(guī)都要求公司或單位提供一個安全和健康的工作環(huán)境，以保障員工免受不必要的危害。職業(yè)健康與安全(OHS)規(guī)程的目的就是預(yù)防職業(yè)傷害和疾病，它不僅需要滿足法規(guī)的要求，更重要的是控制危害和減少風(fēng)險。本文描述了實驗動物相關(guān)OHS規(guī)程的重要性及一些關(guān)鍵要素，如管理措施、設(shè)施的設(shè)計與運行、控制與危險物的接觸、教育和培訓(xùn)、職業(yè)健康專業(yè)化服務(wù)、儀器設(shè)備的性能、信息管理、應(yīng)急措施及對規(guī)程的評估和完善。本文還簡要地介紹了常見的實驗非人靈長類動物相關(guān)的人畜共患疾病，以及如何安全地從事實驗動物相關(guān)工作。

實驗動物，職業(yè)健康安全，人畜共患病

21世紀是生物學(xué)的世紀，同時也是生物外包業(yè)的世紀，越來越多的國際制藥業(yè)巨頭外包藥物的研發(fā)環(huán)節(jié)，特別是將藥物臨床前研究外包給專業(yè)化的合同外包研發(fā)機構(gòu)(CRO)。近年來，藥物研發(fā)的臨床前外包成穩(wěn)定的上升趨勢，尤其在中國一直具有強勁的增長勢頭，因為中國有豐富的人力和動物資源。在考慮成本的同時，這些國際的藥物巨頭們也得考慮動物的福利，于是代表著動物健康和福利達到國 際 一 流 標 準 的 AAALAC(Associationof Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care International，國際實驗動物評估和認證協(xié)會)認證也成了挑選和甄別CRO合作伙伴的重中之重的指標。AAALAC認證主要評估四大部分，實驗動物的管理與使用，職業(yè)健康與安全，獸醫(yī)護理及設(shè)施。職業(yè)健康與安全的重要性可見一斑。而且，我們國家也缺乏這方面的專業(yè)人才。本文想結(jié)合作者們在國際化的CRO的工作經(jīng)驗，與國內(nèi)的各位同行共同探討實驗動物設(shè)施中職業(yè)健康安全需注意的問題。

1 職業(yè)健康安全規(guī)程主要內(nèi)容

職業(yè)健康安全的重要性是不言而喻的，而且一個公司或單位也有其倫理和道義上的責(zé)任為其員工提供職業(yè)健康安全防護，以避免員工遭受不必要的危害。另外，國際國內(nèi)也有相關(guān)的法律法規(guī)要求公司為其員工提供一個安全健康和盡可能舒適的工作環(huán)境。譬如中國相關(guān)的勞動保護法，美國的實驗動物管理和使用指南(Guide for the Care and Use of Laboratory Animals，簡稱為 Guide)，均要求職業(yè)健康安全是整個實驗動物管理規(guī)劃中不可或缺的一個有機組成部分。另外，前文也提及職業(yè)健康安全是AAALAC評估的四部分之一。一般而言，職業(yè)健康安全規(guī)程包括以下九大部份內(nèi)容:管理措施、設(shè)施的設(shè)計與運行、控制與危險物的接觸、教育和培訓(xùn)、職業(yè)健康專業(yè)化服務(wù)、儀器設(shè)備的性能、信息管理、應(yīng)急措施及對規(guī)程的評估和完善。

具體到管理措施，其制定最好是群策群力，其使用者、管理人員、員工都要積極參與討論并制定相關(guān)規(guī)程，并且所有員工都應(yīng)知曉其所應(yīng)該扮演的角色。相應(yīng)的管理，如審批機制需健全，以做到對研究工作審批的透明、實用和公開。要建立一套機制，對有害物質(zhì)進行健康與安全方面的評估，這已成為IACUC(實驗動物管理和使用委員會)評閱動物相關(guān)實驗方案的有機組成部分。當一個實驗項目涉及到危險物質(zhì)或有潛在危險時，應(yīng)鼓勵研究人員考慮把健康與安全措施融入到其實驗方案中，做到有備無患。

關(guān)于設(shè)施的設(shè)計和運營部分，在設(shè)計開始前，應(yīng)先確定其設(shè)施將來會用于何種類別的研究及其計劃可能使用的動物種系。同時也要充分考慮到可能涉及到的危害物質(zhì)，以確保采用適宜的設(shè)計，能夠遵循合乎相關(guān)的法律規(guī)定，并達到或超過相關(guān)認證機構(gòu)的標準。在設(shè)計和建造過程中，設(shè)施的最終使用者、實驗動物的管理者、環(huán)境健康安全委員會的代表、建筑工程師和建筑設(shè)計師，要至始至終積極地參與。特別要注意的是以下這些方面，如通風(fēng)系統(tǒng)、空間布局及大小、輔助區(qū)域、人/空氣/動物/物的流通渠道，及對將來設(shè)備機械維護修繕提供便利。在設(shè)計動物設(shè)施時還需考慮對人體工程學(xué)危害的預(yù)防和控制。

對職業(yè)相關(guān)的危害物的接觸，可通過工程學(xué)控制、工作方式、防護設(shè)備的使用來進行控制。首先通過工程學(xué)的控制手段，使員工遠離危險物品。若工程學(xué)控制無法充分控制潛在的暴露，可以通過改變工作的方式來改變可能的暴露。最后還可以通過穿戴和使用個人防護設(shè)備在員工和危險物之間建立屏障，以提供其它方法所不能提供的保護。

對于職業(yè)健康安全的教育和培訓(xùn)的重要性怎么強調(diào)都是不過分的。員工們要知道那些與他們工作相關(guān)的危害，知道怎樣通過公司的策略、工程學(xué)的控制、工作方式和個人防護裝備的穿戴來控制，并且有足夠的技能來有效且安全地工作，否則一個職業(yè)安全規(guī)劃的目標是不可能達到的。所有以上這些都需要多方位、詳盡的教育和培訓(xùn)來與員工充分溝通，進而才有可能解決與職業(yè)健康安全有關(guān)的問題。

所有公司和單位都需有應(yīng)急預(yù)案。緊急情況在所難免，一旦出現(xiàn)，就需要有一快速有效的應(yīng)對方案并能有效地執(zhí)行，以減少對人員和動物的傷害及對設(shè)施的損/毀壞。如果公司沒有成文的精心考慮的并經(jīng)測試后可行的應(yīng)急預(yù)案，出現(xiàn)緊急情況時是無法快速有效應(yīng)對的。一個應(yīng)急預(yù)案應(yīng)該提供一個有效應(yīng)對的框架，并且在這個計劃里應(yīng)明確員工各自的職責(zé)、不同人員間的協(xié)調(diào)合作、應(yīng)對的有序性、應(yīng)急用設(shè)備和資源。

以下這些因素會影響到職業(yè)健康安全的有效性:知曉現(xiàn)有的或可能存在的危險，知已知彼方可百戰(zhàn)不殆;避免與危險物的接觸;培訓(xùn)與教育;公司的準則和指南;政策/規(guī)程執(zhí)行的一貫性和一致性;記錄和監(jiān)測;致力于建立和完善職業(yè)健康安全制度并提供人力物力資源及協(xié)調(diào)。

對危害的評估是一個漸進的、不斷變化的過程。對危害的評估涉及到以下7個方面的內(nèi)容:與動物接觸的頻度;接觸危險物的量;接觸危險物的頻度;與動物相關(guān)的機械性及生物性的危害;用于實驗方案中的試劑/物品的危害性;員工的易感性;以及同類工作員工的職業(yè)健康病史。

2 職業(yè)健康安全問題分類

職業(yè)健康安全問題大致可分為三類:過敏原;機械性、化學(xué)性和實驗方案相關(guān)的危害物;人畜共患病。目前為止，對實驗動物過敏是實驗動物工作者最普遍的職業(yè)健康問題，多至40%可能受影響。主要表現(xiàn)為呼吸道癥狀，如鼻癢、流涕、噴嚏、及流淚、眼癢等，較嚴重者可致哮喘(尤其在有潛在疾病的患者)，甚至休克死亡。對過敏的易感性受以下因素的影響，如特應(yīng)性、抽煙、性別差異及暴露量。通風(fēng)，空氣流動，濕度，清潔消毒等因素都可影響環(huán)境中過敏原的量。通過使用獨立通風(fēng)的籠具、增加環(huán)境的清潔度、使用面罩都可以減少接觸過敏原的機會。

機械性傷害主要指動物的抓傷咬傷，其中比較重要的有大鼠的鼠咬熱及猴的咬傷。鼠咬熱由鏈珠狀鏈桿菌和/或鼠咬熱螺旋體(小螺菌)引起，這些菌是大鼠上呼吸道的常在菌，可通過咬傷傳染給人。因此所購買使用的大鼠均應(yīng)經(jīng)過檢測沒有此病，并要定期監(jiān)測設(shè)施內(nèi)是否有該病原體，而且要注意動物抓取的技術(shù)以免使動物驚恐而咬傷人。針對犬咬傷，要以預(yù)防為主。要學(xué)習(xí)和實踐適當?shù)淖ト『捅６夹g(shù)，要在發(fā)怒的犬只發(fā)生爭斗前將它們分開。要注意保持鎮(zhèn)定和安靜，高聲的喊叫和對犬的訓(xùn)斥只能是加劇其爭斗而于事無補。如果分開爭斗犬只的方法不當，犬很可能會咬人，特別是當人把手伸近爭斗的犬只。猴咬傷主要是皰疹病毒B的危害。抓傷并不少見，主要包括動物的抓傷及籠具所致的傷害。肩及背部的損傷也屬機械性損傷。還要注意對噪聲的防控，在嘈雜的環(huán)境(如狗房和洗籠機區(qū)域等)要提供聽覺保護裝置。另外，因不合理的物品放置、員工的疲勞或儀器設(shè)備的不規(guī)范適用均可造成對人員的傷害。

3 與實驗動物猴相關(guān)的常見人畜共患病

人畜共患病可人為地分為三類，即人畜共有的病原體，可同時感染動物和人，如猴痘病毒;第二類病原體，人為自然宿主或儲藏宿主，但偶也可感染動物，如麻疹和結(jié)核;第三類病原體動物為自然宿主或儲藏宿主，但偶也可感染人，如猴 B病毒和黃熱病毒。

下面就以常見的人 －非人靈長類動物的共患病為例，對與實驗動物相關(guān)的重要人畜共患病進行簡要闡述。重要的病毒性疾病有麻疹、絲狀病毒(如埃博拉病毒，等)、痘病毒、猴免疫缺陷病毒和皰疹病毒等。細菌性的則有結(jié)核病和革蘭氏陰性腸道病原菌等。寄生蟲和真菌目前還不是太大的問題。人畜共患病的傳播主要有以下幾種途徑:與動物相關(guān)的傳播［動物咬抓傷、人員自身的傷害(如扎過動物的針不小心扎上自己和同事)、飛濺液等］、組織(一個很容易被忽視的問題)、分泌物、被分泌物(贓物)污染的儀器設(shè)備籠具等、氣溶膠、以及人與人之間的傳播。

皰疹病毒B(也被稱為B病毒、猴B病毒等)是一種自然存在于獼猴群中的病毒，并?？稍斐沙掷m(xù)性的感染。獼猴多表現(xiàn)為外觀健康和無異常，這點與人皰疹病毒II(單純皰疹病毒)所致的感染相似。B病毒主要通過以下方式進行傳播:咬抓傷、飛濺物、儀器設(shè)備籠具等所致的傷害、組織、人與人之間等。如何界定是否有B病毒暴露呢?如與獼猴的組織或分泌物有直接接觸，譬如通過皮膚破損或傷口或黏膜接觸;或被獼猴或有污染的設(shè)備籠具等致傷，則可認定有暴露。暴露則有可能導(dǎo)致感染，最終可快速上行到中樞神經(jīng)系統(tǒng)引起感染進而發(fā)病。B病毒感染引起的常見癥狀有局部神經(jīng)癥狀如癢、疼痛和麻木;傷口或其附近皮疹;感冒類似的癥狀如疼痛;持續(xù)時間長于24 h的頭痛;疲勞;肌肉不協(xié)調(diào)和呼吸短促等。為以防萬一，如認為有可能有暴露，則應(yīng)該按照既定的、公認的暴露后救治程序進行處理。簡單來說即受傷后立即沖洗傷口15 min (使用猴咬抓傷急救箱的試劑，并再傷口消毒后取拭子樣備檢)并即刻告知主管。必要時須及時到醫(yī)院或醫(yī)務(wù)室進行緊急傷口處理。非常重要的是要做好跟進，如采血進行檢測、對動物進行檢查/檢測、對試驗操作/飼養(yǎng)管理/設(shè)施/籠具等進行重新評估以預(yù)防再次發(fā)生、甚至在必要時對受傷員工提供心理咨詢。由于篇幅所限不能詳述，請有興趣的讀者朋友參考“Prevention of and Therapy for B Virus Exposure.Clinical Infectious Diseases 2002;35:1191－1203.”和“Monkey B Virus(Cercopithecine herpesvirus 1).Comparative Medicine 2008;58(1): 11－22”等文。

麻疹多是由人類傳染給實驗動物猴。其病原體是人麻疹病毒，可通過氣溶膠以及人 －人接觸而傳播。非人靈長類麻疹的臨床癥狀有免疫抑制(請注意麻疹和麻疹的免疫接種均可影響猴結(jié)核菌素皮試的結(jié)果)、皮疹、結(jié)膜炎、面部紅斑、肺炎、腹瀉、流產(chǎn)、柯氏斑點等。麻疹的病理學(xué)表現(xiàn)為間質(zhì)性肺炎、潰瘍性腸結(jié)腸炎、淋巴排空、和合胞體細胞等。

甲型肝炎，亦可稱為傳染性肝炎或猴肝炎，人為其主要宿主。主要是以食物或水為媒介傳播、或經(jīng)口傳播。該病在猴常為隱性感染，不表現(xiàn)出癥狀，潛伏期為 2～6周。在感染的急性期，AST和ALT水平顯著增高并持續(xù)2～3周，然后恢復(fù)至正常水平。此病在人表現(xiàn)為隱性或急性發(fā)作的發(fā)熱、惡心和厭食等。

結(jié)核病的病原體主要是結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)和 牛 型 分 枝 桿 菌(Mycobacterium bovis)。結(jié)核的傳播途徑主要有與人類接觸、直接的接觸、氣溶膠、吸入、分泌物或臟污物。少見于野生的非人靈長類動物，但猴對此病易感。常無臨床癥狀直至疾病后期出現(xiàn)咳嗽、淋巴結(jié)病、嗜睡、消瘦、食欲不振、甚至死亡。

志賀氏病的病原體為福氏志賀菌(Shigella flexneri)和宋內(nèi)氏志賀菌(Shigella sonnei)。該病主要經(jīng)由糞－口途徑進行傳播。隱性攜帶者較常見。一般不表現(xiàn)臨床癥狀或表現(xiàn)為腹瀉。志賀氏病在人類表現(xiàn)為急性胃腸炎，伴有急性腹痛、腹瀉、惡心和發(fā)熱。可發(fā)展為敗血癥。也可能是無臨床癥狀的隱性感染。

彎曲桿菌有時需要檢測，因有過出口至美國的猴類曾發(fā)現(xiàn)過有彎曲桿菌，而其可致嬰幼兒腹瀉甚至死亡。在猴類主要有兩種彎曲桿菌，即空腸彎曲桿菌和結(jié)腸彎曲桿菌。它為纖細彎曲的革蘭氏陰性桿菌，主要通過糞口傳播，隱性攜帶者較多。該病的臨床癥狀主要表現(xiàn)為水樣至血樣腹瀉，體重減輕，流產(chǎn)，也可表現(xiàn)為慢性間歇性腹瀉。在病理學(xué)上病變主要出現(xiàn)在小腸和結(jié)腸，表現(xiàn)為黏膜發(fā)紅、水腫、增生和糜爛。

阿米巴病主要由一種原蟲，即溶組織性內(nèi)阿米巴引起。非人靈長類是其主要宿主，但動物很少發(fā)病或有腸炎。傳播方式主要經(jīng)皮膚或衣物沾染有感染動物的糞便，隨后又經(jīng)口感染了傳染性卵囊。該病在人主要為無癥狀攜帶，可能會感染大腸腸壁，導(dǎo)致阿米巴性結(jié)腸炎。臨床癥狀可能有中度水樣腹瀉，直至急性暴發(fā)性血樣或黏液性的密集腹瀉，伴發(fā)熱或寒顫。如未經(jīng)治療，該病可表現(xiàn)為遷延不愈長達數(shù)月，并時有加重，有時還可在不同器官出現(xiàn)阿米巴膿腫，但較罕見。非人靈長類動物可視為無癥狀攜帶者和潛在傳染源。有臨床癥狀的動物應(yīng)積極治療，以減少排蟲。

4 如何安全地從事實驗動物相關(guān)工作

如何提高涉及非人靈長類動物的實驗人員的工作安全?(1)要通過教育和培訓(xùn)，讓其知曉這些人畜共患病及其危害，及這些疾病的基礎(chǔ)知識如病原學(xué)臨床癥狀傳播機制等。(2)要加強動物的飼養(yǎng)和管理。(3)要有良好的獸醫(yī)護理計劃，特別是預(yù)防醫(yī)學(xué)計劃，確保動物的健康和福利。(4)嚴格按照相關(guān)規(guī)程穿戴個人防護設(shè)備。(5)按照既定的工作準則和試驗方案工作。(6)要知曉并嚴格遵循暴露后應(yīng)采取的急救措施。

首先談一下動物的飼養(yǎng)管理。要注重人和動物的交流，使彼此熟悉和增加信任感，以減少動物對人的傷害，及人類活動對動物產(chǎn)生的應(yīng)激。要對動物進行積極有效的訓(xùn)練，這種訓(xùn)練應(yīng)該深入到日常的飼養(yǎng)管理過程中去，在動物試驗研究和獸醫(yī)臨床護理過程中也要有所體現(xiàn)。具體到日常的飼養(yǎng)管理，一定要保持良好的環(huán)境消毒和衛(wèi)生、動物的飼養(yǎng)要保持一貫性、要給與動物良好的正面刺激并定期進行強化以形成良好的條件反射(主要體現(xiàn)在動物表現(xiàn)出的合作性和配合飼養(yǎng)管理和實驗操作)。而且動物的環(huán)境豐富度和福利也要落到實處，力求讓動物“身心”都健康，這樣一方面可以保證高品質(zhì)的動物試驗研究、也可提高動物的福利進而可以盡可能地減少動物對人和相關(guān)操作的“敵對”，從而減少對動物和操作人員的傷害。

其次，要注重獸醫(yī)護理體制的建設(shè)和實施。首先要對實驗動物供應(yīng)商進行考核，盡可能做到只購買和使用健康的和高品質(zhì)的實驗動物。具體到實驗動物的品質(zhì)和健康環(huán)節(jié)，獸醫(yī)應(yīng)該審核批準實驗動物供應(yīng)商(一般應(yīng)通過問卷調(diào)查、實地審核來評估供應(yīng)商的實驗動物飼養(yǎng)管理、獸醫(yī)護理、動物福利［IACUC，如適用］、職業(yè)健康和安全、人員培訓(xùn)、設(shè)施及其維護、動物運輸、相關(guān)認證等)，并稽核/監(jiān)查動物運輸器具和過程。在定購/接受實驗動物前，應(yīng)審閱動物健康檔案/種群健康監(jiān)測報告。在試驗開始前和過程中要進行相應(yīng)的實驗動物隔離檢疫和獸醫(yī)檢查;疾病的發(fā)現(xiàn)、監(jiān)測、預(yù)防、診斷、治療和處置;以及行為學(xué)和福利管理。

再次，要建立和逐步完善個人防護設(shè)備的穿戴規(guī)程并嚴格執(zhí)行。如要按照危險性分析和評估，適當?shù)卮┐魅槟z手套、口罩/呼吸器、眼部的保護裝置、連體服、和安全鞋/靴等。

最后，一旦發(fā)生意外要嚴格按照既定的緊急處理規(guī)程進行急救和處理。要請相關(guān)的職業(yè)健康安全專家獻計獻策，結(jié)合本單位的實際，制定并不斷完善職業(yè)健康安全手冊/規(guī)程。一旦該規(guī)程/手冊成文，就應(yīng)該切實落實執(zhí)行。要強調(diào)對員工的培訓(xùn)和預(yù)先演練，要知道緊急救治的方法和相關(guān)的聯(lián)系人。要注意與時俱進，掌握并及時和員工溝通分享相關(guān)領(lǐng)域的最新動態(tài)和研究進展，進一步完善相關(guān)規(guī)程。

總之，健康安全問題人人有責(zé)。公司/單位要建立職業(yè)健康安全手冊/規(guī)程，組織培訓(xùn)，并實時評估和完善職業(yè)健康安全的規(guī)程。員工要學(xué)習(xí)領(lǐng)會和執(zhí)行該規(guī)程并在必要時獻計獻策。在進入動物房前，要按規(guī)定穿戴適宜的個人防護設(shè)備;出動物房時，要脫下個人防護裝置并洗手消毒。中國在實驗動物相關(guān)的職業(yè)健康安全方面起步晚，在相關(guān)立法的層面、在理念上和實踐上和發(fā)達國家相比還是有很大的差距。國內(nèi)目前這方面的專業(yè)人才也是鳳毛麟角，很是匱乏。好在現(xiàn)如今科學(xué)和信息的國際化，我們可以借鑒國外已有的較成熟的職業(yè)健康安全理論與實踐，辯證地學(xué)習(xí)，結(jié)合我們國家的實際，取其精華去其糟粕，就如同是站在巨人的肩膀上，因此可以更快更好更有效地發(fā)展我國的實驗動物相關(guān)的職業(yè)健康安全體系。

An Overview on Laboratory Animal Related Occupational Health and Safety，and Zoonoses

WANG Hui，SHEN Zhi，PANG Wan－yong
Charles River Laboratories Greater China Preclinical Services Shanghai Ltd.

Moral obligation and regulatory requirements dictate that employers provide a safe and healthful workplace so as to safeguard employees from unnecessary risks.The goal of an occupational health and safety(OHS) program is to prevent occupational injury and illness.The principal focus of the program should be on the control of hazards and the reduction of risks，as opposed to merely satisfying regulations.The objective of this manuscript was to describe the importance and the key elements of a laboratory animal related OHS Program，namely administrative procedures;facility design and operation;exposure control;education and training;occupational health－care services;equipment performance; information management;emergency procedures and program evaluation.The common zoonotic diseases related with laboratory nonhuman primates and how to work safely with lab animals were also briefly summarized.

Laboratory Animals，Occupational Health and Safety，Zoonoses

R－332

A

1671－7856(2010)04－0001－04

2010－01－18

龐萬勇(1974－)，男，博士，研究方向:比較醫(yī)學(xué)及動物福利。