陳軍義 王開功 周碧君 方 英 文 明 岳 筠 江昭華 程振濤 張雙祥

為消除或降低母源抗體對仔豬豬繁殖與呼吸障礙綜合征疫苗免疫的抑制，同時防止豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒在免疫空白期對仔豬的侵襲，試驗(yàn)通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)分別對產(chǎn)前1個月免疫豬繁殖與呼吸系統(tǒng)綜合征滅活疫苗(NVDC-JXAl)的母豬和曾感染過豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒的母豬所產(chǎn)仔豬的母源抗體進(jìn)行監(jiān)視，分析其消長規(guī)律，并在此基礎(chǔ)上確定了仔豬豬繁殖與呼吸障礙綜合征的首免日齡，從而為其他豬場提供參考依據(jù)。

1.材料與方法

1．1 材料

1.1.1 試驗(yàn)動物

在產(chǎn)前1個月免疫豬繁殖與呼吸系統(tǒng)綜合征滅活疫苗(NVDC-JXAl)的4頭母豬所產(chǎn)的40頭仔豬，貴州大學(xué)種豬場提供；曾感染過豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒豬場的6頭母豬所產(chǎn)的58頭仔豬，貴陽地區(qū)某種豬場提供。

1.1.2 試劑

豬繁殖與呼吸綜合征病毒ELISA抗體檢測試劑盒(生產(chǎn)批號為081010)，購自武漢科前動物生物制品有限責(zé)任公司。

1.1.3 疫苗

豬繁殖與呼吸系統(tǒng)綜合征滅活疫苗(NVDC-JXA1株)(20mL／瓶)，中牧實(shí)業(yè)股份有限公司成都藥械廠生產(chǎn)。

1．2 方法

1.2.1 免疫

無豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒感染豬場的妊娠母豬在產(chǎn)前1個月肌肉注射豬繁殖與呼吸系統(tǒng)綜合征滅活疫苗(NVDC-JXAl株)，4mL／頭。

1.2.2 血清樣品的采集

在4頭免疫母豬所產(chǎn)的40頭仔豬中，分別于5、10、15、20、30日齡隨機(jī)選擇20頭仔豬采集血液，離心制備血清；在曾感染過豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒豬場的6頭母豬所產(chǎn)的JJ頭仔豬中，分別在／0～14日齡、15～19日齡,20～24日齡、25～29日齡、30～34日齡、35～39日齡隨機(jī)選擇25～32頭仔豬采集血液，離心制備血清，所有血清均保存在-20℃冰箱中。

1.2.3 豬繁殖與呼吸障礙綜合征血清抗體的檢測

參照檢測試劑盒說明書進(jìn)行。試驗(yàn)成立的條件為陽性對照孔平均OD630值≥1.0，陰性對照孔平均OD630值＜0.3。結(jié)果判定：樣品OD630值大于0.42為陽性，在0.38～0.42間為可疑，小于0.38為陰性。

2.結(jié)果與分析

2.1 免疫豬繁殖與呼吸障礙綜合征滅活疫苗母豬所產(chǎn)仔豬母源抗體消長規(guī)律

采集不同日齡(5～30日齡)仔豬的血清，應(yīng)用豬繁殖與呼吸綜合征病毒ELISA抗體檢測試劑盒對各階段的仔豬血清進(jìn)行豬繁殖與呼吸障礙綜合征抗體水平監(jiān)測，結(jié)果表明，免疫豬繁殖與呼吸障礙綜合征滅活疫苗母豬所產(chǎn)仔豬的母源抗體在5日齡抗體陽性率最高(50.0%)，隨著日齡的增加豬繁殖與呼吸障礙綜合征抗體陽性水平逐漸降低，至30日齡時全部仔豬的母源抗體檢測結(jié)果為陰性。母源抗體水平總體不高，平均抗體陽性率僅為20.0%(20／100)。

2.2 曾感染豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒豬場的母豬所產(chǎn)仔豬母源抗體消長規(guī)律

采集不同日齡(10～39日齡)仔豬的血清，應(yīng)用豬繁殖與呼吸綜合征病毒ELISA抗體檢測試劑盒對各階段仔豬的血清進(jìn)行豬繁殖與呼吸障礙綜合征抗體水平監(jiān)測，結(jié)果表明，曾感染過豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒豬場的母豬所產(chǎn)仔豬的母源抗體從10～14日齡開始逐漸上升，至20～24日齡抗體陽性水平達(dá)到最高(51.9%)，此后逐漸下降，到35～39日齡抗體陽性率降為15.6%。各日齡段的母源抗體水平均比免疫母豬所產(chǎn)仔豬的母源抗體水平高。

3.討論

(1)當(dāng)前，預(yù)防豬繁殖與呼吸障礙綜合征的發(fā)生關(guān)鍵在于對豬群進(jìn)行豬繁殖與呼吸障礙綜合征疫苗的合理免疫，而仔豬首免日齡的確定則是疫苗免疫的重中之重。試驗(yàn)通過ELISA方法檢測仔豬血清樣品的豬繁殖與呼吸障礙綜合征抗體，結(jié)果表明，未感染豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒豬場的疫苗免疫母豬所產(chǎn)仔豬的母源抗體水平在5日齡時最高[50.0%(10／20)]，此后不斷下降，在30日齡下降到0(0／20)；而曾感染過豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒豬場仔豬的母源抗體水平在20～24日齡達(dá)最高，為51.9%(14／27)，此后逐漸下降，至35～39日齡下降為15.6%(5／32)。為使母源抗體既能保證仔豬在免疫空白期抵御豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒的感染，同時又能避免或降低母源抗體對仔豬豬繁殖與呼吸障礙綜合征疫苗免疫的干擾，不同類型豬場應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況采取不同的首免日齡。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，確定豬繁殖與呼吸系統(tǒng)綜合征滅活疫苗(NVDC-JXAl株)免疫母豬所產(chǎn)仔豬的首免日齡為17～20日齡，而感染過豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒豬場的母豬所產(chǎn)仔豬的首免日齡為30～34日齡。

(2)曾感染過豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒豬場的母豬所產(chǎn)仔豬的母源抗體陽性水平在10～24日齡逐漸升高，這與母源抗體在仔豬體內(nèi)抗體水平緩慢下降的自然消長規(guī)律有些出入。筆者認(rèn)為有以下原因：首先，感染豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒的母豬所產(chǎn)的部分仔豬在某些情況下血清中不能檢測出陽性母源抗體。其次，采集血液時，在仔豬群中隨機(jī)選擇25～32頭，使某一階段可能選擇的含陽性母源抗體的仔豬多。

(3)有些豬場由于曾經(jīng)感染過豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒或是引進(jìn)的外來豬種感染過該病毒，同時該病毒自身具有持續(xù)感染和隱性感染的特性，會對豬場的仔豬群構(gòu)成潛在的威脅。據(jù)報道，免疫母豬所產(chǎn)的仔豬所獲得的豬繁殖與呼吸障礙綜合征母源抗體對強(qiáng)毒感染能夠產(chǎn)生一定的保護(hù)力。因此，不論豬場是否發(fā)生過豬繁殖與呼吸障礙綜合征，只要豬場位于豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒易感區(qū)域內(nèi)，在母豬臨產(chǎn)前均應(yīng)加強(qiáng)免疫1次豬繁殖與呼吸障礙綜合征疫苗，從而使子宮內(nèi)的胎兒獲得被動免疫，并使仔豬在吮食母乳時獲得足夠的母源抗體，使仔豬在首免前有一個保護(hù)其免受該病毒侵襲的“緩沖時間帶”。