犬C-反應(yīng)蛋白的研究進(jìn)展

張海霞,夏兆飛

(中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,北京海淀100193)

C-反應(yīng)蛋白(C-reactive protein,CRP)是犬的一種主要的急性期反應(yīng)蛋白(acute phase protein,APP)。在機(jī)體受到炎癥、感染和組織損傷等刺激時(shí),促炎細(xì)胞因子IL-1、IL-6和 TNF-α?xí)T導(dǎo)肝臟合成CRP,其在24～48 h內(nèi)可升高100～1 000倍[1],升高程度與組織的損傷程度有關(guān)。國外已經(jīng)對犬CRP進(jìn)行了大量的研究,國內(nèi)還無相關(guān)報(bào)道。

1 CRP的生物化學(xué)特性

1.1 CRP的發(fā)現(xiàn) 1930年,Tillet和Francis發(fā)現(xiàn)一些急性期肺炎病人的血清能與肺炎鏈球菌的莢膜C-多糖發(fā)生沉淀反應(yīng),后來證實(shí)血清中引起沉淀反應(yīng)的是一種蛋白質(zhì),即稱為C-反應(yīng)蛋白。1966年,Dillman&Coles首次發(fā)現(xiàn)了犬的CRP;1972年,Riley&Zontine分離出了犬的CRP[2]。

1.2 犬CRP的結(jié)構(gòu) CRP是一種環(huán)狀正五聚蛋白,它是首個(gè)被發(fā)現(xiàn)的急性期反應(yīng)蛋白。犬CRP的分子量約為100 kD,由5個(gè)亞單位組成,每個(gè)亞單位的分子量為20 kD,其中的2個(gè)亞單位是糖基化的[2-3]。

1.3 犬CRP的測定方法及影響因素 常用的測定犬CRP的方法有ELISA法、比濁免疫分析法、乳膠凝集法等,ELISA法的應(yīng)用最為廣泛。研究表明,一種以免疫色譜法為原理的快速測定法及以導(dǎo)磁率為基礎(chǔ)的診斷方法,也可用于犬CRP水平的評估;時(shí)間分辨免疫熒光測定法也可用于測定全血、唾液、滲出液中的CRP水平[3]。

Mdas Kjelgaard-Hansen等研究發(fā)現(xiàn),用于測定人CRP水平的商品化的比濁免疫分析法(2003)和反向乳膠凝集法(2008)可用于犬CRP的測定,但是,其他研究指出,犬的CRP與抗人的CRP抗體沒有交叉反應(yīng)性或反應(yīng)性極弱,測定人CRP的方法不能用于測定犬CRP。

溶血、脂血和高膽紅素血癥都會(huì)影響CRP的測定結(jié)果,但是,升高的程度不會(huì)對結(jié)果的判讀造成顯著的影響[4]。

2 不同生理狀況對犬CRP水平的影響

2.1 年齡、性別和品種 CRP的水平不受年齡和性別的影響。但是,年齡較大的犬在炎癥狀況下CRP水平的升高要更顯著,在一個(gè)注射松節(jié)油或金黃色葡萄球菌的試驗(yàn)性研究中,3月齡和18月齡犬的CRP峰值要顯著高于1月齡犬[3]。

灰獵犬的白細(xì)胞參考值比其他品種低,但其CRP水平與其他品種相比,卻沒有顯著差異[5]。

2.2 妊娠和發(fā)情周期 犬在妊娠期的CRP水平顯著升高,可能與胚胎植入、胎盤生長所引起的炎癥反應(yīng)及激素水平的改變有關(guān)。而犬的CRP水平與發(fā)情周期沒有相關(guān)性,不能用于判斷發(fā)情階段[6]。

2.3 晝夜節(jié)律和日變化 成年健康犬的CRP水平不受晝夜節(jié)律和日變化的影響。某試驗(yàn)研究顯示,在24 h內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)采集血樣,測定犬的CRP水平,沒有發(fā)現(xiàn)顯著的變化;在4周內(nèi)的不同天采集血樣,測定其CRP水平,也未發(fā)現(xiàn)顯著的變化[3]。

2.4 肥胖和糖皮質(zhì)激素 肥胖犬的CRP水平則比正常犬低,且CRP水平與胰島素/葡萄糖比率和膽固醇水平呈負(fù)相關(guān),由此結(jié)果可推斷,在肥胖和胰島素抵抗的犬,CRP的產(chǎn)生會(huì)受到抑制[7]。

糖皮質(zhì)激素會(huì)引起正常犬白細(xì)胞象的變化,但不會(huì)影響CRP的水平?？寡讋┝亢兔庖咭种苿┝康耐庠葱蕴瞧べ|(zhì)激素,均未引起CRP顯著變化[8];腎上腺皮質(zhì)機(jī)能亢進(jìn)患犬的CRP水平?jīng)]有顯著改變,且腎上腺皮質(zhì)機(jī)能亢進(jìn)并發(fā)敗血癥患犬的CRP水平比單純的敗血癥患犬的CRP水平低。以上結(jié)果說明,CRP不受糖皮質(zhì)激素的影響,可以作為指示炎癥的有效指標(biāo)[9]。

3 不同疾病狀況下犬CRP水平的變化

白細(xì)胞象的檢測已成為獸醫(yī)臨床的常規(guī)檢測項(xiàng)目。與白細(xì)胞象一樣,CRP的特異性低,但其敏感性要比白細(xì)胞高的多,且反應(yīng)速度比白細(xì)胞快。目前,已報(bào)道的可引起CRP水平升高的疾病有感染、炎癥、手術(shù)創(chuàng)、免疫性疾病、腫瘤、胃腸道疾病等。

3.1 CRP與感染 試驗(yàn)誘導(dǎo)性或天然感染埃利希體、鉤端螺旋體、利什曼體、支氣管敗血性博德特氏菌、細(xì)小病毒、錐蟲等病原,均能引起CRP水平不同程度的升高,巴貝斯蟲感染未引起CRP顯著變化。

3.2 CRP與炎癥 子宮蓄膿、急性胰腺炎、骨關(guān)節(jié)炎及試驗(yàn)誘導(dǎo)性炎癥等炎性疾病均能引起CRP水平的變化。CRP水平還可用于輔助判斷患子宮蓄膿的犬是否出現(xiàn)了全身性炎癥反應(yīng)綜合征。

3.3 CRP與手術(shù) 切除病變組織的外科手術(shù)或常規(guī)生理手術(shù)(如絕育術(shù)、去勢術(shù)),都會(huì)引起CRP水平升高,其升高程度與組織損傷程度有關(guān)。例如,與常規(guī)生理手術(shù)相比,矯形外科手術(shù)引起CRP升高的程度更為明顯。另外,CRP水平還可用于監(jiān)測是否出現(xiàn)并發(fā)癥。無術(shù)后并發(fā)癥,CRP水平在拆線時(shí)明顯降低;而伴有術(shù)后并發(fā)癥,CRP水平則不會(huì)降低,還會(huì)隨著感染程度的加重而進(jìn)一步升高。因此,CRP可作為監(jiān)測術(shù)后并發(fā)癥的有效指標(biāo)。

3.4 CRP與免疫性疾病 自體免疫性溶血性貧血可引起CRP的顯著變化,且治療有效,CRP水平也會(huì)恢復(fù)正常。

3.5 CRP與腫瘤 在乳腺腫瘤,CRP不能用于判斷腫瘤是良性的還是惡性的。具有轉(zhuǎn)移性、腫瘤體直徑較大(P＞5 cm)、潰爛或伴有炎癥的腫瘤會(huì)引起CRP的顯著升高[10]。淋巴腫瘤,包括多中心性淋巴瘤、急性成淋巴細(xì)胞性白血病、慢性成淋巴細(xì)胞性白血病、多發(fā)性骨髓瘤均會(huì)引起CRP升高,多中心性淋巴瘤和急性成淋巴細(xì)胞性白血病對CRP的影響較為顯著。因此,CRP升高時(shí),應(yīng)對淋巴腫瘤進(jìn)行鑒別診斷。CRP是否能作為淋巴腫瘤的預(yù)后指標(biāo),還有待進(jìn)一步研究[11]。

3.6 CRP與胃腸道疾病 試驗(yàn)誘導(dǎo)性的胃黏膜損傷會(huì)引起CRP的顯著變化,CRP與胃窺鏡可共同用于胃損傷的診斷和監(jiān)測。炎性腸病可引起CRP的中度升高,CRP可用于判斷療效,其變化與臨床癥狀的變化也有一定的相關(guān)性。其他腸道疾病,如細(xì)菌性腸炎、腸梗阻均可引起CRP變化。

4 展望

綜上所述,CRP的測定方法限制了其在獸醫(yī)臨床的應(yīng)用,ELISA法雖廣泛用于各種相關(guān)研究中,但并不適用于臨床。與白細(xì)胞相比,CRP的反應(yīng)性更高,且受生理狀況的影響更小,可用于輔助臨床疾病的診斷,并可用于監(jiān)控術(shù)后并發(fā)癥、判斷預(yù)后及監(jiān)測治療效果。目前,雖然已經(jīng)做了大量的關(guān)于CRP研究,但是由于其特異性差,因此其與某些疾病(如內(nèi)分泌疾病、心血管疾病、敗血癥、胰腺炎等)的診斷及預(yù)后的關(guān)系還有待進(jìn)一步研究。

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