陸慧娟,關(guān)翠林,岳志勁
(山西大同大學(xué)化學(xué)與化工學(xué)院,山西大同037009)
黃芪為豆科植物(Leguminosae)蒙古黃芪(Astragalus membranaceus (Fisch)Bge.var.monholicus(Bge.)Hsiao)或膜莢黃芪 (Astragalus membranaceus(Fisch)Bge.)的干燥根,具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力、利尿、抗衰老、降血壓、擴(kuò)張冠狀血管和全身末梢血管以及抗菌等作用,是臨床常用的中藥之一[1].中草藥澤瀉(Alismatis rhizoma)系澤瀉科植物澤瀉(Alismaorientalis(Sam)Juzep.)的塊莖,產(chǎn)于福建、四川等地,能顯著降低血總膽固醇和甘油三酯含量并有利尿、抗菌及降血糖作用[2].鐵是人體的必需微量元素之一,參與血紅蛋白的合成、細(xì)胞呼吸、電子傳遞、DNA合成并參與酶活性反應(yīng)[3].缺鐵使酶活性降低,細(xì)胞功能紊亂,體力減弱,容易疲勞,還可引起組織器官異常,細(xì)胞免疫功能缺陷,對(duì)感染的易感性增高[4].中草藥中微量元素形態(tài)分析屬于新型交叉研究課題,中藥中微量元素對(duì)人體的作用并不決定于總濃度,而是取決于該元素所處化學(xué)形態(tài)的特性,在不同形態(tài)下即處于不同的價(jià)態(tài)、絡(luò)合狀態(tài)和作用靶位環(huán)境,具有不同的親脂性和生物活性,表現(xiàn)出不同的藥效[5].因此對(duì)中藥中鐵的形態(tài)進(jìn)行研究具有積極的現(xiàn)實(shí)意義.本實(shí)驗(yàn)采取中藥常用煎煮方式制取水煮液,采用正辛醇-水分配體系模擬中藥水煎液在人體胃腸中的分配情況,用紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定黃芪與澤瀉藥材、水煎液中鐵的含量及水煎液中水溶態(tài)鐵、醇溶態(tài)鐵含量,計(jì)算出鐵的水煮溶出率,探討了酸度變化 (人體的胃腸酸度)對(duì)鐵形態(tài)的影響,為深入探討中藥中微量元素在中藥藥性、藥效方面的作用機(jī)制奠定理論基礎(chǔ).
美國(guó)PE公司Lamda-35紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì),PHS-25型數(shù)字酸度計(jì)(上海大中分析儀器廠).
黃芪(產(chǎn)地:山西),澤瀉(產(chǎn)地:四川):購(gòu)于山西省大同市平城藥店,洗凈,80℃烘干6 h,粉碎至40目,再于80℃烘干1 h,置干燥器中備用.正辛醇(沈陽(yáng)市試劑三廠).
所用試劑均為分析純;水為二次蒸餾水.
稱(chēng)取藥材各2.000 0 g,分別加30 mL混酸(HNO3:HClO4=4:1),110℃ 消解 15 min,冷卻定容.用鄰二氮菲分光光度法測(cè)定總鐵含量.
稱(chēng)取黃芪和澤瀉各10.000 0 g,煎煮三次,第一次加水200 mL,煎煮2 h,第二次和第三次均加水100 mL,煎煮1 h,沸騰后保持微沸,合并三次水煎液,用布氏漏斗過(guò)濾,將水煎液平分成三份.
分別取一組水煎液,各加混酸10 mL,110℃消解15 min,冷卻后定容至50 mL容量瓶中,鄰二氮菲分光光度法測(cè)水煎液鐵含量,即實(shí)際服入量,據(jù)鐵在水煎液和藥材中含量的比值求算溶出率.
分別取水煎液兩組,調(diào)pH值,一組調(diào)為胃液酸度(pH=1.3),一組調(diào)為小腸酸度(pH=7.6),放置過(guò)夜,每份均加入正辛醇5 mL,振蕩萃取2 h,萃取2次,合并兩次萃取的水相和醇相.水相加混酸10 mL,110℃ 消解15 min,冷卻后定容至50 mL容量瓶中,鄰二氮菲分光光度法測(cè)定不同靶位酸度下水煎液中水溶態(tài)鐵濃度(Cw),差減法求得醇溶態(tài)鐵的濃度(Co).
準(zhǔn)確移取適量處理好的樣品溶液于25 mL容量瓶中,加入10% 鹽酸羥胺1.0 mL,搖勻,放置2 min,再加入5 mL HAc-NaAc緩沖溶液 (pH=4.7),0.12%鄰二氮菲2.0 mL,定容,搖勻后放置2 min.以樣品溶液做參比,用1 cm比色皿在510 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度.
在實(shí)驗(yàn)條件下,F(xiàn)e(Ⅱ)質(zhì)量濃度在 0.1~0.6 μg·mL-1范圍內(nèi)符合比爾定律.線性回歸方程為:A=0.204 7 c(μg·mL-1)+0.005 1,相關(guān)系數(shù) γ=0.999 5,表觀摩爾吸光系數(shù)為1.1×104L·mol-1.cm-1,檢出限為 13.7 μg·L-1.
黃芪與澤瀉中鐵的總含量、水煎液鐵含量、水煎液中水溶態(tài)鐵與醇溶態(tài)含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1.
表1 黃芪與澤瀉中各種形態(tài)鐵的含量(n=3)
中藥水煎液中不同靶位(胃、腸)酸度,所含的H+或OH-活度不同,對(duì)鐵形態(tài)分布影響明顯,醇溶態(tài)鐵的劑量和成分不同,生物活性不同,這為同一味中藥治療不同疾病即藥物作用靶位不同所用劑量不同找到一定的理論依據(jù).
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