張金生 黃艷群 趙 瑞 陳 文* 原 霞 蔣燕燕 朱獻章 張建宏 陳小鵬
(1.河南農(nóng)業(yè)大學牧醫(yī)工程學院,鄭州 450002;2.華南農(nóng)業(yè)大學動物科學學院,廣州 510642;3.鄭州基業(yè)生物工程有限公司,鄭州 450001)
益生素、木聚糖酶和淀粉酶對朗德鵝產(chǎn)肝性能、脂肪沉積及血清生化指標的影響
張金生1黃艷群1趙 瑞2陳 文1*原 霞1蔣燕燕1朱獻章1張建宏1陳小鵬3
(1.河南農(nóng)業(yè)大學牧醫(yī)工程學院,鄭州 450002;2.華南農(nóng)業(yè)大學動物科學學院,廣州 510642;3.鄭州基業(yè)生物工程有限公司,鄭州 450001)
為了研究益生素、木聚糖酶和淀粉酶對朗德鵝產(chǎn)肝性能、脂肪沉積、內臟器官及血液生化指標的影響,試驗選取32只平均體重為(3.43±0.10)kg的健康朗德母鵝,隨機分為4個組,每組8個重復,每個重復1只鵝。對照組朗德鵝填喂基礎飼糧,木聚糖酶組、益生素組和淀粉酶組朗德鵝的飼糧是在基礎飼糧中分別添加100 g/t木聚糖酶、4 000 g/t益生素、200 g/t淀粉酶,填飼期共23 d。結果表明:1)木聚糖酶組、益生素組、淀粉酶組朗德鵝的肥肝重分別比對照組提高了4.96%(P>0.05)、13.08%(P<0.05)、2.88%(P>0.05);料肝比分別比對照組降低了6.86%(P>0.05)、15.75%(P>0.05)和6.24%(P>0.05)。2)各添加劑組朗德鵝的腹脂重、腸脂重、皮下脂肪厚均高于對照組,其中益生素組的腹脂重、腸脂重顯著高于對照組(P<0.05)。3)各添加劑組朗德鵝的法氏囊指數(shù)、脾臟指數(shù)均高于對照組,其中在脾臟指數(shù)方面達到了顯著水平(P<0.05);各添加劑組朗德鵝的腺肌胃指數(shù)相對于對照組均有降低的趨勢(P>0.05),此外,益生素組的胰腺指數(shù)顯著低于其他各組(P<0.05)。4)益生素組的血清葡萄糖含量最高,甘油三酯和總膽固醇含量最低,而木聚糖酶組和淀粉酶組的血清葡萄糖、甘油三酯和總膽固醇含量均高于對照組(P>0.05);益生素組的血清總蛋白、白蛋白、尿素氮和尿酸的含量及谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶的活性均顯著低于對照組(P<0.05)。可見,添加木聚糖酶、益生素和淀粉酶均能不同程度地提高朗德鵝的產(chǎn)肝性能,促進脂肪代謝,改善機體的消化和免疫狀況,其中益生素的添加效果顯著。
益生素;木聚糖酶;淀粉酶;鵝;肥肝;脂肪沉積;器官指數(shù);血清生化指標
在鵝肥肝生產(chǎn)中,短時間內給鵝填飼大量高能飼糧(其中玉米占90%以上)易造成鵝的內源性消化酶分泌相對不足、消化道內微生態(tài)平衡失調等現(xiàn)象,加之玉米中的支鏈淀粉難以被機體消化及其細胞壁的抗營養(yǎng)作用[1],使得飼糧在鵝體內消化不徹底、吸收利用率低,從而導致生產(chǎn)報酬低等一系列問題。木聚糖酶和淀粉酶是常用的飼用酶制劑,其中木聚糖酶具有破壞細胞壁結構以釋放細胞內養(yǎng)分、降低食糜黏度等作用,淀粉酶可以提高動物對淀粉的利用率。益生素是一種無毒副作用的“綠色”添加劑,含有大量有益菌及其代謝產(chǎn)物和生長促進因子,具有維持腸道微生物平衡、提高機體健康水平、促進生長、提高飼料轉化率等效果。目前有關酶制劑和益生素在雞、豬生產(chǎn)中應用的報道很多,效果也較理想[2-4],但在鵝肥肝生產(chǎn)中的應用研究則相對較少。盡管于世浩等[5]研究了益生素和酶制劑對朗德鵝產(chǎn)肝性能和腸道微生物菌群的影響,但目前有關添加木聚糖酶、淀粉酶和益生素對填飼期朗德鵝產(chǎn)肝性能、脂肪沉積、內臟器官指數(shù)和血清生化指標影響的報道較少。本試驗旨在通過研究木聚糖酶、淀粉酶和益生素對填飼期朗德鵝的產(chǎn)肝性能、脂肪沉積、內臟器官指數(shù)和血清生化指標的影響,進一步認識和探求益生素和酶制劑對朗德鵝的不同作用效果和作用機制,為其在鵝肥肝生產(chǎn)中更好地應用提供參考依據(jù)。
木聚糖酶活性為20 000 IU/g(四川禾本生物工程有限公司提供),添加量為100 g/t;淀粉酶活性為20 000 IU/g(廣東省江門市英恒生物飼料有限公司提供),添加量為200 g/t;益生素主要成分是酵母菌和咯酸桿菌,活性為106CFU/g(鄭州基業(yè)生物工程有限公司提供),添加量為4 000 g/t。
隨機挑選32只體重為(3.43±0.10)kg、健康的商品代肥肝用朗德母鵝作為試驗填飼鵝,隨機分成4組,每組8個重復,每個重復1只鵝。填飼所用的基礎飼糧由蒸煮加工后的玉米、鵝油、食鹽和復合多維組成,其中玉米占 96%~98%,鵝油占 2%~3%,食鹽占0.5%~1.0%,具體組成可根據(jù)鵝的消化情況和天氣變化靈活調整,每次填飼前現(xiàn)配現(xiàn)用。對照組填飼基礎飼糧,木聚糖酶組、益生素組、淀粉酶組填飼飼糧是在基礎飼糧的基礎上分別添加100 g/t木聚糖酶、4 000 g/t益生素和200 g/t淀粉酶。
預試期:預飼前對圈舍、料槽、飲水槽等消毒,并對鵝只進行驅球蟲處理。預試期為10 d,采用地面平養(yǎng),自由采食和飲水。
填飼期:填飼期為23 d,填飼期間自由飲水,保持舍內干燥、通風、清潔。填飼過程中輕抓輕放鵝只,注意觀察鵝的健康狀況。
所有試驗鵝由同一位熟練的填飼員進行填飼。開填1周內,根據(jù)鵝的消化情況及氣溫變化逐漸增加每天填飼次數(shù)和每次填飼量,每天的填飼次數(shù)由3次逐漸增加到5次;待鵝適應填飼之后,每天定時填飼5次,每只鵝每次填飼450 g左右的飼糧,準確記錄每只鵝每天的飼糧攝入量。
填飼結束后,禁食6 h,稱其體重,然后進行屠宰和頸靜脈采血。將全血3 000 r/m in離心后,制得血清,-20℃保存,以便測定血清中葡萄糖、甘油三酯、總膽固醇、總蛋白、白蛋白、尿素氮、尿酸的含量及谷丙轉氨酶和谷丙轉氨酶的活性。胴體冷凍后采用縱向剖腹法取肝,剔除膽囊及其周圍結締組織后稱其鮮重,并分離腹脂、腸脂、法氏囊、脾臟、胰腺、肌胃和腺胃,稱其重量,同時用游標卡尺測量其尾脂腺前2 cm處的皮下脂肪厚。
內臟器官指數(shù)(g/kg):以內臟器官鮮重(g)占活體重(kg)的比例表示。
試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 14.0中One-way ANOVA進行統(tǒng)計分析,Duncan氏多重比較,結果以平均值±標準差表示,以P<0.05作為差異顯著性判斷標準。
由表1可知,與對照組相比,各添加劑組朗德鵝的肥肝重、肝體比均有所提高,其中益生素組、木聚糖酶組和淀粉酶組的肥肝重分別比對照組提高了13.08%(P<0.05)、4.96%(P>0.05)、2.88%(P>0.05);而料肝比分別比對照組降低了15.75%(P>0.05)、6.86%(P>0.05)和 6.24%(P>0.05)。由此可見,3種添加劑均存在提高朗德鵝的產(chǎn)肝性能的趨勢,其中添加益生素的效果最好。
表1 木聚糖酶、益生素和淀粉酶對朗德鵝產(chǎn)肝性能的影響Tab le 1 Effects of xylanase,p robiotics and am y lase on fatty liver perform ance of Landes geese
由表2可知,木聚糖酶組、益生素組和淀粉酶組朗德鵝的腹脂重、腸脂重、皮下脂肪厚均高于對照組,其中腹脂重均顯著高于對照組(P<0.05);益生素組腸脂重顯著高于對照組和淀粉酶組(P<0.05),而腹脂重和皮下脂肪厚卻低于木聚糖酶組和淀粉酶組(P>0.05)。這表明益生素和酶制劑均能不同程度地提高填飼期朗德鵝的脂肪沉積能力。
表2 木聚糖酶、益生素和淀粉酶對朗德鵝屠體脂肪沉積的影響Table 2 Ef fects of xy lanase,p robiotics and amy lase on the fat deposition in carcass of Landes geese
由表3可知,各添加劑組朗德鵝的法氏囊指數(shù)和脾臟指數(shù)均大于對照組,其中在脾臟指數(shù)方面的差異達到了顯著水平(P<0.05);益生素組朗德鵝的胰腺指數(shù)顯著低于其他各組(P<0.05),木聚糖酶組和淀粉酶組朗德鵝的胰腺指數(shù)也低于對照組,但差異不顯著(P>0.05);各組朗德鵝的腺肌胃指數(shù)之間無顯著差異(P>0.05),但與對照組相比,木聚糖酶組、益生素組和淀粉酶組朗德鵝的腺肌胃指數(shù)均有降低的趨勢。
表3 木聚糖酶、益生素和淀粉酶對朗德鵝內臟器官指數(shù)的影響Table 3 Effects of xylanase,probiotics and amylase on the internalorgan indices of Landes geese g/kg
由表4可知,各試驗組朗德鵝血清中的葡萄糖、甘油三酯和總膽固醇含量差異不顯著(P>0.05),但益生素組的葡萄糖含量最高,甘油三酯和總膽固醇含量最低,而木聚糖酶組和淀粉酶組的葡萄糖、甘油三酯和總膽固醇含量均高于對照組(P>0.05)。益生素組朗德鵝的血清總蛋白、白蛋白、尿素氮、尿酸的含量及谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶的活性均最低,與對照組之間的差異均達到了顯著水平(P<0.05)。
在本試驗中,益生素組、木聚糖酶組和淀粉酶組朗德鵝的肥肝重分別比對照組提高了13.08%(P<0.05)、4.96%(P>0.05)、2.88%(P>0.05),肝體比也高于對照組(P>0.05),而料肝比分別比對照組降低了15.75%(P>0.05)、6.86%(P>0.05)和6.24%(P>0.05),這表明在朗德鵝飼糧中添加益生素、木聚糖酶和淀粉酶有提高其產(chǎn)肝性能、降低料肝比的趨勢。這與于世浩等[5]的研究結果一致,即益生素組和酶制劑組的肥肝重分別比對照組肥肝重提高12.12%和9.49%(P<0.05),且料肝比分別比對照組降低2.14和1.72(P>0.05);劉景盛等[6]的研究也表明,添加EM(有益微生物菌群)顯著改善了朗德鵝的平均肥肝重和料肝比。
此外,本試驗表明益生素的作用效果最突出,與對照組相比,益生素組朗德鵝的肥肝重提高了100.50 g,肝體比也有大于其他各組的趨勢,且料肝比最低。這可能是因為益生素一方面可在胃腸道內分泌各種消化酶,如脂肪酶、淀粉酶和蛋白酶[7],降低機體腸道內容物黏度、破解細胞壁釋放養(yǎng)分、降解抗營養(yǎng)因子、補充內源酶的不足,從而提高營養(yǎng)物質的消化和吸收率,提高動物的生產(chǎn)性能;另一方面益生素還可以調節(jié)胃腸道的微生態(tài)平衡,促進有益微生物的生長,抑制有害微生物的繁殖,增強機體的免疫力和抗病力,從而減少填飼應激,使朗德鵝表現(xiàn)出較好的產(chǎn)肝性能。
表4 木聚糖酶、益生素和淀粉酶對朗德鵝血清生化指標的影響Table 4 Effec ts of xy lanase,p robiotics and amy lase on serum biochem ical indices of Landes geese
Davail等[8]指出,脂肪肝是由食物中碳水化合物新合成的甘油三酯在肝臟大量貯存形成的,填飼也誘導新合成的甘油三酯在外周組織如脂肪組織和肌肉的沉積作用。Sim on等[9]研究表明,皮下脂肪比腹部脂肪沉積得早,但腹脂的沉積速度最快,頸部次之。在填飼過程中連續(xù)高強度地攝入富含碳水化合物的飼糧,特別是添加了可提高飼料利用率的木聚糖酶、益生素和淀粉酶之后,朗德鵝的脂肪運輸和代謝通道可能已趨向飽和,所以大量的脂肪都在沉積速度最快的腹部沉積下來了,而在皮下脂肪、腸脂中的沉積量卻相對較少[10]。因此在本試驗中,各添加劑組與對照組之間只有在腹脂重方面差異顯著,皮下脂肪厚差異不顯著;在腸脂重方面,木聚糖酶組和淀粉酶組朗德鵝的腸脂重與對照組之間無顯著差異。有報道也表明,在營養(yǎng)充足的玉米-豆粕型飼糧中添加1%酶制劑(含有木聚糖酶、蛋白酶和淀粉酶)可顯著提高42日齡和49日齡雞的腹脂率[11]。
禽類內源性脂肪與蛋白質結合后,形成親水性脂蛋白,經(jīng)門靜脈系統(tǒng)運至全身,脂蛋白到組織中經(jīng)脂蛋白脂肪酶(LPL)等酶催化分解后釋放出脂肪酸而沉積下來。這一過程是在多種酶和底物的參與下完成的,脂肪在某個部位沉積量的多少可能與LPL的活性有關。LPL活性增加可以促進外周脂肪沉積,這一點已在雞上被證明[12-13]。廉傳江等[14]研究也認為,LPL是鵝肝外脂肪組織沉淀的主要限制因子,LPL活性的升高促進肝外脂肪的大量沉積。本試驗中益生素組朗德鵝的肥肝重是最大的,但其腹脂重和皮下脂肪厚卻均存在低于木聚糖酶組和淀粉酶組的趨勢,這可能是因為添加益生素在一定程度上減弱了LPL的活性,使得朗德鵝的肝外脂肪沉積減少,肝內脂肪沉積增加。
胸腺、脾臟和法氏囊是免疫細胞形成、分化和產(chǎn)生抗體的主要場所,是評價機體免疫狀態(tài)的重要指標。本試驗中各添加劑組朗德鵝的脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)均高于對照組,其中在脾臟指數(shù)方面達到了顯著水平。這與他人的研究結果一致,即在動物飼糧中添加益生素和木聚糖酶有增加免疫器官相對重量的趨勢[15-17],提高動物的免疫力。而在本試驗中,淀粉酶組朗德鵝的法氏囊指數(shù)和脾臟指數(shù)卻最高,到目前為止還未見有關淀粉酶可以提高動物免疫力的報道,這可能與本試驗填飼期的特殊飼糧有關,填飼飼糧中玉米占95%左右,此時玉米中的支鏈淀粉成為最大抗營養(yǎng)因子,添加淀粉酶可減少支鏈淀粉的抗營養(yǎng)作用,降低由于養(yǎng)分積累而孳生的有害微生物種類和數(shù)量,從而提高機體的免疫力,減輕朗德鵝的應激反應[18-19],但其具體機制有待于進一步研究。
已有報道表明,不能消化的黏性多糖可使大鼠的胃、小腸、胰腺等消化器官增大,并認為這是機體對養(yǎng)分和消化酶不足而產(chǎn)生的代償性反應[20]。高寧國等[21]研究表明,在肉鴨飼糧中添加粗酶制劑顯著降低了21日齡鴨的胰腺和小腸的相對重量。這與本試驗的結果一致,即各添加劑組朗德鵝的腺肌胃指數(shù)和胰腺指數(shù)均存在低于對照組的趨勢。這可能是由于酶制劑和益生素提高了飼糧中黏性多糖的消化吸收,降低了胃、小腸、胰腺等消化器官代償性增生反應,從而使胃腸道消化腺相對重量減輕。
3.4.1 木聚糖酶、益生素和淀粉酶對朗德鵝血糖及血脂的影響
血清中甘油三酯和總膽固醇是反映機體脂類代謝水平的2個重要指標,其含量升高對機體健康不利。在本試驗中,益生素組有提高朗德鵝血清中葡萄糖的含量、降低甘油三酯和總膽固醇的含量的趨勢。這表明益生素可能一方面提高了朗德鵝對能量飼料的利用,另一方面又減少了肝內脂肪轉運至肝外進入血液循環(huán)的量,從而降低了血脂含量,促進了脂肪在肝臟的沉積。林冬梅等[22]的研究也表明:復合益生菌具有降低血清總膽固醇和高密度脂蛋白含量的作用趨勢。孔健等[23]也報道,SLP(以乳酸桿菌、雙歧桿菌為主的活菌制劑)對實驗性高膽固醇血脂癥的發(fā)生有抑制作用,對已建成的高膽固醇血脂癥動物有顯著降血脂作用,其降血脂率為33.89%~38.78%。但目前關于益生素可以降低血脂的機理尚不清楚,有待于進一步研究。
3.4.2 木聚糖酶、益生素和淀粉酶對朗德鵝蛋白質代謝的影響
血清中總蛋白和白蛋白含量升高表明蛋白質合成代謝增強,組織蛋白質沉積作用增強,從而提高動物生長性能及屠宰性能。Bas[24]研究發(fā)現(xiàn),益生素有提高血清中總蛋白、白蛋白和球蛋白的含量的趨勢。王佳麗等[25]的研究表明,在小麥飼糧中添加木聚糖酶有提高試驗鵝血清總蛋白水平的趨勢。但本試驗發(fā)現(xiàn),在飼糧中添加益生素后,朗德鵝血清中的總蛋白和白蛋白含量卻顯著降低了。White等[26]的研究表明:血清蛋白的迅速轉換和長期限制蛋白質攝入量可引起血清白蛋白含量下降。由于玉米是本試驗飼糧的主要成分,為高能量低蛋白質飼糧,大量填飼可能會引起血清白蛋白含量的下降。
此外,血清中尿素氮、尿酸和肌酐酸等物質都是禽類蛋白質代謝的最終產(chǎn)物,血清中上述物質含量的多少間接反映禽類對蛋白質和氨基酸物質的利用情況。血清尿素氮和尿酸含量降低表明氮在體內沉積增加,飼料中蛋白質利用率提高;血清尿素氮和尿酸含量升高表明蛋白質分解代謝增強,氮沉積減少[27]。楊海英[28]的試驗表明益生素和低聚木糖可使仔豬血清尿素氮含量降低,促進蛋白質沉積,這與本試驗結果一致,即益生素、木聚糖酶和淀粉酶使低蛋白質飼糧中的蛋白質和氨基酸得到充分利用,其中益生素的效果顯著。另外,當血糖濃度升高時,胰島素也反饋性升高來降低血糖濃度,而胰島素能通過影響細胞膜的轉運系統(tǒng)促進細胞對氨基酸和葡萄糖的攝取,增加蛋白質和糖原的合成,因此,益生素、木聚糖酶和淀粉酶在增加朗德鵝血液中血糖含量的同時,也提高了其對蛋白質的利用率。
3.4.3 木聚糖酶、益生素和淀粉酶對朗德鵝肝臟功能的影響
谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶活性是反映肝臟功能的重要指標,在正常情況下,這2種酶主要存在于肝細胞中,血液中含量很少,只有在肝臟受損時才會大量釋放進入血液,所以,其活性的提高意味著肝臟受損[29]。已有報道指出,這2種酶活性的升高水平與肝細胞損傷程度呈粗略平行關系[30]。本試驗中益生素組朗德鵝血清中谷草轉氨酶活性顯著低于其他各組,谷丙轉氨酶活性也顯著低于對照組,表明益生素對由填飼應激造成的肝臟損害有一定的緩解作用,這應該與益生素中含有的咯酸桿菌、酵母等有益菌有關,它們可以加強腸道微生物區(qū)系的屏障功能,防止有害物質入侵,減少對機體的損傷;另外,也可能與益生素的降血脂作用有關,因為高血脂會導致肝部功能損傷,長期高血脂會導致脂肪肝病變。
在朗德鵝飼糧中添加木聚糖酶、淀粉酶和益生素均能一定程度上提高其肥肝重、降低料肝比,提高朗德鵝對營養(yǎng)物質的利用率,提高機體免疫力。其中,益生素效果顯著。
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*Correspond ing au thor,associate professor,E-mail:cchenw en@yahoo.com.cn
(編輯 何麗霞)
E ffectsof Probiotics,Xylanase and Amylase on Fatty Liver Performance,Fat Deposition and Serum Biochem ical Indices of Landes Geese
ZHANG Jinsheng1HUANG Yanqun1ZHAO Rui2CHEN Wen1*YUAN X ia1JIANG Yanyan1ZHU X ianzhang1ZHANG Jianhong1CHEN X iaopeng3
(1.College of AnimalScien ce and Veterinary Medicine,Henan Agricultural University,Zhengzhou450002,China;2.College of Animal Science,Sou th China Agricultu ral University,Guangzhou510642,China;3.Zhengzhou Jiye Biological Engineering Co.,Ltd.,Zhengzhou450001,China)
This experiment was conducted to study the effects of probiotics,xy lanase and amylase on fatty liver performance,fat deposition,internal organs and serum biochem ical indices of Landes geese.Th irty-tw o healthy Landes geese[female,(3.43±0.10)kg]were selec ted and random ly divided intofour groupswith eight rep licates in each group and one goose in each replicate.Landes geese in the control group were fed with the basal diet.Landes geese in xy lanase group,probiotics group and am ylase group were fed with the diets supp lemented with 100 g xylanase,4 000 g p robiotics and 200 g amylase per ton in the basal diet,respectively.The force-feeding experiment lasted for 23 days.The results showed as follow s:1)compared with the contro l group,the fatty liver w eight of Landes geese in xy lanase group,p robiotics group and amylase group w as increased by 4.96%(P>0.05),13.08%(P<0.05)and 2.88%(P>0.05),respectively;the ratio of feed to liver w eight was reduced by 6.86%(P>0.05),15.75%(P>0.05)and 6.24%(P>0.05),respectively.2)The abdom inal fatw eight,intestinal fat w eight and subcutaneous fat thickness of Landes geese in xy lanase group,p robiotics group and amylase group were higher than those in the control group,of wh ich the abdom inal fat weigh tand intestinal fatw eight in probiotics group were significantly higher than those in the contro l group(P<0.05).3)The bursa of Fabricius index and sp leen index of Landes geese in xylanase group,probiotics group and amy lase group were higher than those in the control group,of which the spleen index w as significantly higher than that in the control group(P<0.05);but the proventriculus and gizzard index had the tendency to decrease compared with the control group(P>0.05);in addition,the pancreas index of Landes geese in p robiotics group was significantly low er than that in the other groups(P<0.05).4)The serum glucose content of Landes geese in probiotics group w as the highest,and the triglyceride and total cholesterol contentswere the low est;however,the serum glucose,trig lyceride and total cho lestero l contents in xy lanase group and amylase group were higher than those in the control group(P>0.05);the serum totalprotein,album in,urea nitrogen and uric acid contents and the activities of aspartate am inotransferas and alanine am inotransferase of Landes geese in probiotics group were significantly low er than those in the contro l group(P<0.05).Therefore,adding xylanase,p robiotics and am ylase into the diets is e ffective on improving fatty liver perform ance,fat deposition,digestive and immune status of Landes geese by dif ferent degrees,in which probiotics has a significant effect.[Chinese Journa l of Anima l Nutrition,2010,22(6):1665-1671]
probiotics;xylanase;amylase;goose;fatty liver;fatdeposition;organ indices;serum biochem ical indices
S816.7
A
1006-267X(2010)06-1665-07
10.3969/j.issn.1006-267x.2010.06.029
2010-05-31
河南省鄭州市創(chuàng)新型科技人才隊伍建設工程(096SYJH 16092),2009年度鄭州市科技攻關項目
張金生(1986—),男,河南駐馬店人,碩士研究生,從事家禽營養(yǎng)與飼料學研究。E-mail:zh jingsheng33@126.com
*通訊作者:陳 文,副教授,碩士生導師,E-mail:cchenw en@yahoo.com.cn