李真姬 黃長軍 田貴華 宋 萌 指導老師 李志剛
北京中醫(yī)藥大學針灸推拿學院 (北京 100029)
顱腦損傷(craniocerebral injury,CCI)是一種致死率和致殘率很高的疾病,在我國的發(fā)生率以及由其致傷致殘、致死的傷員也逐年增加[1]。本研究應用高效液相色譜法,觀察電針對顱腦損傷大鼠腦組織 5-HT和 N E含量的影響,探討電針治療顱腦損傷的機制。
1 材料和方法 1.1 動物及分組雄性 SD大鼠 88只,體重 220±30g,隨機分為 11組:空白組、6h模型組、12h模型組、24h模型組、48h模型組、6d模型組、6h針刺組、12h針刺組、24h針刺組、48h針刺組、6d針刺組,每組 8只。
1.2 顱腦損傷大鼠模型的制備 大鼠稱重,腹腔注射10%的水合氯醛麻醉。正中切開,用牙科鉆在冠狀縫后 1.5mm,中線旁 2.5mm處鉆一直徑 5mm骨窗。利用改進 Feeney大鼠顱腦創(chuàng)傷模具,用 40g砝碼置于 35cm高處造成顱腦損傷。模型組和針刺組造成左頂葉局限性腦挫裂傷??瞻捉M不開顱窗,不施打擊。
1.3 顱腦損傷大鼠針刺方法及血清制備 針刺組針刺“印堂”、“百會”兩穴,電針刺激,“百會”穴接陰極,“印堂”穴接陽極。持續(xù)脈沖電流,時間 30min。空白組和模型組在治療時間不作治療,但要抓取并束縛,以保證飼養(yǎng)條件相同。
1.4 取材及指標檢測 各組在造模后 12h斷頭取腦,剝離損傷部位皮質(zhì),放入-80℃?zhèn)溆?。用高效液相色譜法檢測腦組織 5-HT和 NE含量。
1.5 統(tǒng)計學方法 實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準誤表示,統(tǒng)計學分析采用 t檢驗。
2 實驗結(jié)果 2.1 針刺對顱腦損傷腦組織 5-HT含量的影響。
表1 各組顱腦損傷大鼠不同時間 5-HT含量(±s,ng/g)
表1 各組顱腦損傷大鼠不同時間 5-HT含量(±s,ng/g)
表1顯示,各組大鼠腦組織相比,模型組的腦組織 5-HT含量均明顯高于空白組(39.241±6.518),差異極顯著;24h、48h和 6d針刺組的含量也明顯高于空白組 ,差異極顯著;6h和 12h針刺組的腦組織 5-HT含量與空白組相比,差異不顯著,P>0.05。
組 別 6h 12h 24h 48h 6d模型組針刺組61.65±10.49 40.46± 8.29△64.20±8.55 45.93± 7.79△76.88±15.17 58.43±5.53 79.65±11.15 61.71±8.42 79.27±13.42 53.28±10.52
表2 各組顱腦損傷大鼠不同時間 NE含量(±s,ng/g)
表2 各組顱腦損傷大鼠不同時間 NE含量(±s,ng/g)
表2示,各模型組 NE含量均高于空白組(334.85±46.41),差異極顯著;6h和 12h模型組的 N E含量顯著高于針刺組,差異顯著;24h、48h和 6d模型組的 N E含量也明顯高于空白組和針刺組,差異顯著;而各時間針刺組的 NE含量雖然也高于空白組,但差異不顯著,P> 0.05。
組 別 6h 12h 24h 48h 6d模型組針刺組417.58±62.56 351.10±31.27 451.91±60.42 363.00±70.24 455.82±42.79 368.62±67.69 461.66±81.63 360.43±74.15 450.45±51.69 364.90±66.03
討 論 顱腦損傷后腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)及其受體系統(tǒng)的異常改變,參與了繼發(fā)性顱腦損傷的發(fā)病過程,可導致腦血流異常、腦組織代謝異常和腦水腫,并能直接破壞神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細胞。中樞神經(jīng)系統(tǒng)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的種類很多,顱腦損傷時,以兒茶酚胺類和 5-羥色胺(5-HT)變化最為顯著,在一定程度上與病情密切相關(guān)[2]。實驗及臨床資料已經(jīng)證實,顱腦損傷急性期腦組織內(nèi) 5-HT濃度顯著升高,高濃度的 5-HT可直接引起細胞凋亡,且具有濃度和時間依賴效應[3]。腦皮質(zhì)神經(jīng)細胞膜上 5-HT受體顯著增多,與大量增加的 5-HT遞質(zhì)相互作用,是早期外傷性腦水腫發(fā)生與發(fā)展的重要因素[4]。 5-羥色胺和去甲腎上腺素都是目前比較公認的內(nèi)源性損傷因子。這些因子既可直接損害腦細胞,可以通過破壞血腦屏障,誘發(fā)和加重腦水腫等方式來激發(fā)和加重機體的繼發(fā)性損害[5]。文獻報道,腦損傷時 5-HT、NE、DA等單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量明顯增高[6]。大量的NE還可以引起腦血管痙攣、腦缺血及血管內(nèi)皮細胞損傷致血一腦脊液屏障開放而導致腦水腫和繼發(fā)性腦損害[7]。
本研究結(jié)果表明,顱腦損傷后大鼠 5-HT和 N E含量明顯升高,且呈逐漸升高的趨勢,到 48h達高峰,隨后降低。針刺后使顱腦損傷大鼠腦組織 5-HT和 N E含量的升高趨勢得以控制,使升高的 5-HT和 N E含量下降。研究結(jié)果提示,顱腦損傷可能引起腦組織神經(jīng)遞質(zhì)代謝和釋放紊亂,針刺可能通過糾正5-HT和 N E代謝和釋放紊亂而減輕顱腦損傷的病理損害,對腦組織起到一定的保護作用。
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