姬曉鵬,蔣 斌,潘 琳,黃 河,宋其貴,馮中培
(四川大竹縣人民醫(yī)院,大竹縣 635100)
血小板活化在冠心病、心肌缺血、動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生、進(jìn)展、轉(zhuǎn)歸中具有重要作用。冠狀動(dòng)脈內(nèi)血栓主要由血小板組成,其不僅可以減少冠狀動(dòng)脈內(nèi)血流或造成缺血,而且對(duì)缺血后梗死范圍的擴(kuò)展及預(yù)后有著不可忽視的作用。血小板活性的增加是引起動(dòng)脈粥樣硬化和造成斑塊不穩(wěn)定的重要危險(xiǎn)因素[1,2]。環(huán)磷酸腺苷(cAMP)、血栓素A2(TXA2)、前列腺環(huán)素(PGI2)與血小板功能密切相關(guān),丹參可提高cAMP、PGI2含量,降低TXA2含量[3],抑制血小板聚集。目前,臨床上廣泛使用的丹參制劑主要有復(fù)方丹參片、復(fù)方丹參滴丸和丹參片等。本試驗(yàn)擬觀察復(fù)方丹參片和丹參片對(duì)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者血小板活化的作用并進(jìn)行比較,為臨床合理用藥提供試驗(yàn)依據(jù)。
90例入選病例來(lái)自本院心血管內(nèi)科2007年1月~2009年7月住院患者,有明確癥狀、體征,并經(jīng)冠狀動(dòng)脈CT血管造影確診為冠狀動(dòng)脈粥樣硬化。分為復(fù)方丹參片組、丹參片組和對(duì)照組。3組年齡、性別、病情程度、伴發(fā)疾病及既往史的評(píng)分差異無(wú)顯著性(P>0.05),具有可比性。剔除了腫瘤、病危和藥物不能耐受者。另設(shè)正常組30例,系本院健康體檢者,未發(fā)現(xiàn)心、肺、肝、腎及內(nèi)分泌或新陳代謝疾病。本試驗(yàn)經(jīng)過(guò)本院學(xué)術(shù)委員會(huì)批準(zhǔn)。
復(fù)方丹參片組:口服復(fù)方丹參片(四川省某制藥有限公司,規(guī)格:每片600 g,國(guó)藥準(zhǔn)字Z20020119)3 片,tid;丹參片組:口服丹參片(河南省某制藥股份有限公司,規(guī)格:每片0.48 g,國(guó)藥準(zhǔn)字Z20073141)3 片,tid;對(duì)照組:給予安慰劑。療程為2個(gè)月。
低溫離心機(jī)(美國(guó)Sigma公司);Light CyclerⅡ型實(shí)時(shí)熒光定量基因擴(kuò)增系統(tǒng)(德國(guó)Roche公司);放射免疫計(jì)數(shù)器(成都中宇儀器有限公司)。試劑Trizol(德國(guó)Roche公司);Rnasin(寶生物工程(大連)有限公司);逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、熒光定量Realtime PCR試劑盒(上海東洋坊科技有限公司);cAMP、TXA2、PGI2放免試劑盒(南京凱基生物技術(shù)有限公司)。
方法采用realtime RT-PCR法檢測(cè)全血中前列腺環(huán)素I2合酶(PTGIS)信使核糖核酸(mRNA)的表達(dá)及放射免疫法檢測(cè)血清中cAMP、TXA2、PGI2的表達(dá)[4]。
本試驗(yàn)采用放射免疫法測(cè)定血漿中cAMP、TXA2、PGI2的表達(dá)。結(jié)果如表1所示,與正常組比較,對(duì)照組冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者血漿中cAMP、PGI2表達(dá)明顯降低,TXA2明顯升高;復(fù)方丹參片和丹參片能明顯升高冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者血漿中cAMP、PGI2表達(dá),明顯降低血漿中TXA2中的表達(dá)(P<0.01);復(fù)方丹參片組的升高和降低幅度均明顯大于丹參片組(P<0.01)。
表1 復(fù)方丹參片與丹參片對(duì)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者血漿中cAMP、TXA2、PGI2表達(dá)的影響(±s,n=30)Tab 1 Effect of Compound danshen tablets and Danshen tablets on the expression of cAMP,TXA2,PGI2in patients with coronary atherosclerosis(±s,n=30)
表1 復(fù)方丹參片與丹參片對(duì)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者血漿中cAMP、TXA2、PGI2表達(dá)的影響(±s,n=30)Tab 1 Effect of Compound danshen tablets and Danshen tablets on the expression of cAMP,TXA2,PGI2in patients with coronary atherosclerosis(±s,n=30)
與正常組比較:*P<0.01;與丹參片組比較:#P<0.01;與對(duì)照組比較:ΔP<0.01vs.normal group:*P<0.01;vs.danshen tablets group:#P<0.01;vs.control group:ΔP<0.01
PGI2/pg·mL-1 474.31±84.08185.63±38.51*298.31±70.36#Δ 241.38±58.79Δ組別正常組對(duì)照組復(fù)方丹參片組丹參片組cAMP/pg·mL-1 17.23±3.344.26±1.08*9.87±2.13#Δ 7.16±1.62Δ TXA2/pg·mL-1 11.39±2.9534.95±7.62*20.72±5.06#Δ 25.74±6.11Δ
本試驗(yàn)采用realtime RT-PCR法檢測(cè)全血中PTGIS mRNA的表達(dá)。結(jié)果如表2所示,與正常組比較,對(duì)照組冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者全血中PTGIS mRNA表達(dá)明顯降低;復(fù)方丹參片和丹參片能明顯升高冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者全血中PTGIS mRNA表達(dá),2組分別升高了171.19%、86.44%(P<0.01)。
表2 復(fù)方丹參片與丹參片對(duì)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者全血中PTGIS mRNA的影響(±s,n=30)Tab 2 Effect of Compound danshen tablets and Danshen tablets on the mRNAexpression of PTGIS in patients with coro nary atherosclerosis(±s,n=30)
表2 復(fù)方丹參片與丹參片對(duì)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者全血中PTGIS mRNA的影響(±s,n=30)Tab 2 Effect of Compound danshen tablets and Danshen tablets on the mRNAexpression of PTGIS in patients with coro nary atherosclerosis(±s,n=30)
與正常組比較:*P<0.01;與丹參片組比較:#P<0.01;與對(duì)照組比較:ΔP<0.01vs.normal group:*P<0.01;vs.danshen tablets group:#P<0.01;vs.control group:ΔP<0.01
組別正常組對(duì)照組復(fù)方丹參片組丹參片組PTGIS/-actin 0.28±0.0480.059±0.0092*0.16±0.033#Δ 0.11±0.029Δ
急性冠狀動(dòng)脈綜合征(ACS)是由于冠狀動(dòng)脈內(nèi)粥樣斑塊破裂、血小板聚集和血栓形成導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈完全或不完全阻塞引起的一組臨床綜合征,是嚴(yán)重危害人類健康的一大類疾病。大量的研究結(jié)果表明,冠脈缺血后血小板聚集和黏附功能增強(qiáng),血小板功能變化最明顯的是 TXA2-PGI2系統(tǒng)[5,6]。TXA2、PGI2均為花生四烯酸(AA)的代謝產(chǎn)物,TXA2可使冠脈收縮和血小板聚集;PGI2的作用則可使冠脈擴(kuò)張、血小板解聚;PGI2/TXA2的平衡是維持正常血小板功能和血液凝固的重要機(jī)制,也是保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞免疫損傷的重要環(huán)節(jié)。cAMP作為血小板的第二信使對(duì)血小板功能的調(diào)節(jié)起重要作用。激活血小板的物質(zhì)如凝血酶、TXA2、前列腺素內(nèi)過(guò)氧化物(PGH2、PGG2)等可抑制腺苷環(huán)化酶(AC),降低血小板內(nèi)cAMP水平,而升高cAMP的藥物能抑制誘聚劑誘導(dǎo)的血小板聚集。cAMP主要通過(guò)降低細(xì)胞內(nèi)Ca2+水平、抑制血小板肌球蛋白磷酸化、促進(jìn)PGE2和PGI2的合成、抑制TXA2合成以及抑制凝血酶與其受體結(jié)合等抑制血小板的活化。
丹參(Salvia miltiorrhiza)為唇形科鼠尾草屬多年生草本植物,具有擴(kuò)張微血管,降低血液黏稠度,改善血液黏、濃、聚、滯狀態(tài),從而改善微循環(huán)的作用。復(fù)方丹參片主要由丹參、三七和冰片組成。丹參活血化瘀、清心安神、通脈止痛,為君藥;三七活血化瘀、通經(jīng)止痛,為臣藥;冰片辛香走竄,能通竅止痛、醒神化濁、引經(jīng)入藥,為佐使藥,三藥共奏活血化瘀、理氣止痛之功。復(fù)方丹參片有抗心肌缺血、改善血流變學(xué)、抗動(dòng)脈硬化、抗心律失常、抗腦缺血損傷等作用。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),相對(duì)于正常組,冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者血漿中cAMP、PGI2、PTGIS mRNA表達(dá)明顯降低,TXA2表達(dá)明顯升高。說(shuō)明冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者血小板的活化程度比正常人高,這與既往研究結(jié)果相符。復(fù)方丹參片組和丹參片組能明顯升高冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者血漿中cAMP、PGI2、PTGIS mRNA表達(dá),降低血漿中TXA2的表達(dá),且復(fù)方丹參片組的升高和降低幅度均明顯大于丹參片組。說(shuō)明二者均能抑制血小板的活化,對(duì)ACS的發(fā)病均具有防治作用,但復(fù)方丹參片抑制血小板的活化強(qiáng)于丹參片??傊?,復(fù)方丹參片能更好地防治冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者ACS的發(fā)生。
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[3]范衛(wèi)明,張金鳳,王連文,等.復(fù)方丹參滴丸預(yù)防治療TIA的臨床觀察及對(duì)血漿cAMP、cGMP的影響[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志,2003,1(10):571.
[4]Matsumoto H,Naraba H,Murakami M,et al.Concordant induction of prostaglandin E2synthase with cyclooxygenase-2 leads to preferred production of prostaglandin E2over thromboxane and prostaglandin D2in lipopolysaccharide-stimulated ratperitoneal macrophages[J].Biochem Biophys Res Commun,1997,230(2):110.
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