傅俊范, 石建華, 周如軍, 嚴(yán)雪瑞, 史會(huì)巖, 蘇 丹

(沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院,沈陽(yáng) 110161)

輪葉黨參[Codonopsis lanceolata(Sieb.et Zucc.)Jrautv.]別名羊乳、四葉參、山胡蘿卜等,為桔?？泣h參屬多年生纏繞草本藥食兩用植物。其根可入藥,有補(bǔ)虛潤(rùn)肺、通乳排膿、解毒療瘡之功效[1]。除含有藥用成分外,尚含有多種對(duì)人體有益的營(yíng)養(yǎng)成分,如淀粉、糖、纖維素、胡蘿卜素、17種人體必需的氨基酸及豐富的Ca、P、Fe礦物質(zhì)等[2]。近年來(lái)隨著出口量加大,野生資源減少,輪葉黨參在遼寧東部山區(qū)人工栽培面積日益增大,在此過(guò)程中病害問(wèn)題日益嚴(yán)重。輪葉黨參斑枯病是遼寧省近年來(lái)普遍發(fā)生的一種毀滅性的新病害,在生產(chǎn)上造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失,影響了輪葉黨參種植業(yè)的發(fā)展。經(jīng)查閱相關(guān)文獻(xiàn),迄今尚未見(jiàn)對(duì)該病的系統(tǒng)研究報(bào)道?，F(xiàn)將輪葉黨參斑枯病初步調(diào)查結(jié)果和病原鑒定報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 病害調(diào)查及癥狀觀(guān)察

2008年對(duì)遼寧新賓、清原,沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)百草園、藥材園內(nèi)的輪葉黨參斑枯病進(jìn)行了系統(tǒng)調(diào)查。采取隨機(jī)取樣法,即隨機(jī)抽取一定面積、一定數(shù)量的植株,調(diào)查發(fā)病數(shù)量、每株發(fā)病葉數(shù),統(tǒng)計(jì)分析發(fā)病率和病情指數(shù)。根據(jù)輪葉黨參斑枯病田間發(fā)病特點(diǎn),綜合其他藥用植物葉斑病分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),制定出輪葉黨參斑枯病分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)(表1)。

表1 輪葉黨參斑枯病分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

1.2 病葉采集和病原菌分離

采集具有典型癥狀的病葉,用塑料袋裝好,帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行分離。分離前,先將病葉用清水沖洗干凈,采用常規(guī)組織分離法和孢子懸液分離法分離[3]。

1.3 致病性測(cè)定

采用離體葉片接種法,取輪葉黨參健葉,用無(wú)菌水反復(fù)沖洗。用制備好的孢子懸液進(jìn)行懸滴和針刺接種,無(wú)菌水為對(duì)照,接種后進(jìn)行保濕培養(yǎng),共進(jìn)行葉背面接種、葉正面接種、葉背面刺傷接種和葉正面刺傷接種4個(gè)處理,每處理6個(gè)葉片,每個(gè)葉片3個(gè)懸滴點(diǎn),逐日觀(guān)察記錄發(fā)病狀況[3]。根據(jù)柯赫氏法則,對(duì)發(fā)病葉片進(jìn)行再分離,顯微鏡下觀(guān)察分離得到的病菌是否與原接種菌株相同[3]。

2 結(jié)果與分析

2.1 發(fā)病調(diào)查

2008年對(duì)遼寧新賓、清原和沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)地區(qū)的輪葉黨參斑枯病進(jìn)行系統(tǒng)調(diào)查,病田率為100%,病株率為34%～81%,病情指數(shù)為15.2～52.6。病害始發(fā)期為6月下旬,發(fā)病高峰期集中在7月中旬到8月中旬。

2.2 癥狀觀(guān)察

田間調(diào)查發(fā)現(xiàn),輪葉黨參斑枯病主要危害葉片,從底層葉片開(kāi)始發(fā)病,病斑近圓形或不規(guī)則形,褐色,邊緣紫色,直徑1～5 mm,后期幾個(gè)病斑可連在一起(見(jiàn)圖1),病斑上產(chǎn)生小黑點(diǎn)(分生孢子器),發(fā)病嚴(yán)重時(shí),葉片枯黃或提早落葉,有的病斑有穿孔(見(jiàn)圖2)。

2.3 病原菌鑒定

該菌生長(zhǎng)緩慢,在輪葉黨參葉片煎汁加PDA培養(yǎng)基上25℃光照培養(yǎng)30 d,菌落直徑28～34 mm(如圖3)。菌落質(zhì)密,隆起,呈灰黑色或墨綠色。分生孢子針形,無(wú)色,基部鈍圓,頂端較尖,有些兩端均略尖,1～4個(gè)隔膜,正直或微彎,大小為(18～42)μ m×(1～2)μ m(如圖4)。分生孢子器埋生于葉兩面,散生或聚生(如圖 5),初埋生,后突破表皮,球形或近球形,直徑 65 ～115 μ m,高 50～ 115 μ m 。 器壁膜質(zhì),褐色 ,由 2～ 3 層細(xì)胞組成,壁厚 5～ 7.5 μ m,胞壁暗褐色。

根據(jù)該菌的形態(tài)特征和培養(yǎng)特征,參照相關(guān)文獻(xiàn)[4-6]鑒定輪葉黨參斑枯病致病菌為黨參殼針孢(Septoria codonopsidis Ziling)。

2.4 致病性測(cè)定

試驗(yàn)結(jié)果(表2)表明,4種處理方式均能使輪葉黨參發(fā)病,并從接種的葉片上重新分離到黨參殼針孢菌(Septoria codonopsidis Ziling),證明該菌為輪葉黨參斑枯病致病菌。不同處理的發(fā)病率和發(fā)病時(shí)間均不相同,且對(duì)照沒(méi)有產(chǎn)生病斑。

表2 黨參殼針孢菌對(duì)輪葉黨參致病性測(cè)定結(jié)果

3 防治建議

3.1 田間管理

枯死病葉中帶有大量病菌分生孢子器,是翌年主要侵染來(lái)源。秋季應(yīng)徹底清潔田園,將病殘?bào)w集中燒毀。栽培密度要適宜,不要過(guò)密栽培。雨后及時(shí)排水,降低田間濕度,適時(shí)除草[7-8]。

3.2 藥劑防治

發(fā)病初期及時(shí)用藥劑防治,可噴灑50%代森錳鋅500～600倍液,或70%甲基硫菌靈600～800倍液,或50%多菌靈600倍液,或75%百菌清500～600倍液。每隔 7～10 d噴 1次,雨季5～7 d噴1次,視病情發(fā)展連續(xù)噴2～3次。

4 結(jié)論與討論

本文經(jīng)柯赫氏法則接種證病試驗(yàn),確認(rèn)輪葉黨參斑枯病菌為黨參殼針孢(S.codonopsidis Ziling)。該病6月下旬出現(xiàn),7月中旬到8月中旬為發(fā)病盛期,雨水和傷口有利于其發(fā)生,這與已報(bào)道的由殼針孢引起的藥用植物病害結(jié)果基本一致[8-9]。殼針孢屬(Septoria)真菌可以引致多種植物斑枯病[10],僅在藥用植物就已報(bào)道白芷斑枯病、柴胡斑枯病、丹參葉枯病、地黃斑枯病、黃連斑枯病、白術(shù)斑枯病和桔梗斑枯病等[11]。目前,國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)有關(guān)輪葉黨參斑枯病的系統(tǒng)研究報(bào)道。其病原學(xué)、流行發(fā)病規(guī)律等均不詳,近年隨著輪葉黨參人工種植面積擴(kuò)大,輪葉黨參病害開(kāi)始發(fā)生并呈上升趨勢(shì)。為了保障輪葉黨參產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展,為病害防治提供科學(xué)依據(jù),有關(guān)該病病原學(xué)、流行規(guī)律及防治技術(shù)有待于進(jìn)一步研究。

[1]胡偉建,馬水利,高冬梅.大有開(kāi)發(fā)利用價(jià)值的輪葉黨參[J].中國(guó)野生植物資源,2002,21(2)：25.

[2]樸奎善,申英愛(ài),韓春姬,等.輪葉黨參營(yíng)養(yǎng)成分的研究[J].中國(guó)野生植物資源,1998,17(4)：28.

[3]方仲達(dá).植病研究方法[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,1998.

[4]陸家云.植物病原真菌學(xué)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2001.

[5]魏景超.真菌鑒定手冊(cè)[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,1979.

[6]呂國(guó)忠.中國(guó)東北地區(qū)球殼孢目真菌主要屬種的分類(lèi)研究[D].遼寧：沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué),1992.

[7]李熙英,權(quán)成武,黃世辰,等.紅景天立枯病病原鑒定及藥劑防治[J].吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2002,24(2)：112-114.

[8]韓金聲.中國(guó)藥用植物病害[M].長(zhǎng)春：吉林科學(xué)技術(shù)出版社,1990.

[9]傅俊范,姚遠(yuǎn),王崇仁.龍膽草斑枯病發(fā)生初報(bào)[J].遼寧農(nóng)業(yè)科學(xué),1994(2)：56.

[10]陸家云.植物病害診斷[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,1997.

[11]郭永旺,閻愫.41種人工種植藥用植物病蟲(chóng)害調(diào)查初報(bào)[J].植保技術(shù)與推廣,2003,23(1)：18-21.