馬杰 劉丹 任吉秋

(哈藥集團(tuán)制藥總廠科研開(kāi)發(fā)中心 黑龍江哈爾濱 150046)

比阿培南是新型1β-甲基碳青霉烯類抗生素,它具有抗菌譜廣、對(duì)腎脫氫肽酶穩(wěn)定、藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)優(yōu)良、臨床治療效果好、耐受性好和不良反應(yīng)少等特點(diǎn)[1]。本品對(duì)革蘭陰性和陽(yáng)性菌的需氧菌和厭氧菌等均具有超廣譜強(qiáng)敏抗菌作用,并有良好的組織滲透性;藥代動(dòng)力學(xué)特性優(yōu)良;用于治療下呼吸道感染和泌尿道感染;臨床有效率為89.5%～100%;藥物不良反應(yīng)輕微[2]。為有效控制比阿培南中的殘留溶劑,本研究參考文獻(xiàn)[3],建立了GC法測(cè)定比阿培南中的丙酮、乙腈、二氯甲烷、四氫呋喃。

1 儀器與試藥

安捷倫6890氣相色譜儀、安捷倫7694E頂空自動(dòng)進(jìn)樣器

丙酮、乙腈(天津市科密歐化學(xué)試劑開(kāi)發(fā)中心,含量不小于99.9%);二氯甲烷、四氫呋喃(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司,含量不小于99.5%);乙酸乙酯(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司,含量不小于99.5%);比阿培南(哈藥集團(tuán)制藥總廠,批號(hào)A200909001A200909002A200909003);甲酸為分析純,水為純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱:固定相為(6%)氰丙基苯基-(94%)二甲基聚硅氧烷的毛細(xì)管柱,柱溫50℃,以氮?dú)鉃檩d氣,氫火焰離子化檢測(cè)器,檢測(cè)器溫度250℃,進(jìn)樣口溫度200℃,頂空進(jìn)樣,頂空瓶溫度80℃,平衡時(shí)間20min。

圖1 比阿培南殘留溶劑對(duì)照品圖譜Figurel1 Spectra of reference substance of residual solvents of Biapenem

2.2 溶液配制

內(nèi)標(biāo)溶液的制備:精密稱取乙酸乙酯適量,加10%的甲酸溶液制成每1mL中含0.5mg的溶液。

供試品溶液的制備:取本品約0.5g,精密稱定,置20mL頂空瓶中,精密加入內(nèi)標(biāo)溶液5mL使溶解,密封,搖勻。

對(duì)照品溶液的制備:分別稱取丙酮、乙腈、二氯甲烷、四氫呋喃適量,精密稱定,加內(nèi)標(biāo)溶液制成每1mL中含0.5mg、0.041mg、0.06mg、0.072mg的溶液,精密量取5mL置20mL頂空瓶中,密封。

2.3 專屬性試驗(yàn)

取對(duì)照品溶液按色譜條件測(cè)定,丙酮、乙腈、二氯甲烷、四氫呋喃的理論塔板數(shù)分別不低于81000、89000、90000、75000,分離度分別為3.51、4.03、30.52、4.96。見(jiàn)圖1。

2.4 線性試驗(yàn)

精密配制每mL含丙酮5mg、乙腈0.41mg、二氯甲烷0.6mg、四氫呋喃0.72mg的對(duì)照品儲(chǔ)備液,于儲(chǔ)備液中分別精密量取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0和1.2mL置6個(gè)10mL量瓶中,加入內(nèi)標(biāo)溶液稀釋至刻度,搖勻,精密量取5～20mL頂空瓶中,密封。按測(cè)定法分別進(jìn)行測(cè)定,記錄色譜圖。以濃度為橫坐標(biāo),丙酮、乙腈、二氯甲烷、四氫呋喃分別與內(nèi)標(biāo)物峰面積比值為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸,回歸方程分別為:Y＝-0.0163+0.9400X(r=0.9984)、Y＝-0.0005+0.4948X(r=0.9978)、Y＝-0.0001+1.6405X(r=0.9935)、Y＝-0.0055+1.9256X(r=0.9989),說(shuō)明丙酮在0.1～0.6 mg/mL、乙腈在0.0082～0.0492mg/mL、二氯甲烷在0.12～0.072mg/mL、四氫呋喃在0.0144～0.0864mg/mL濃度范圍內(nèi)的峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積的比值均呈良好的線性關(guān)系。

2.5 精密度和回收率試驗(yàn)

取供試品溶液,連續(xù)進(jìn)樣6次,按測(cè)定法測(cè)定,丙酮、乙腈、二氯甲烷、四氫呋喃峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積的比值的RSD分別為0.28%、3.43%、2.57%、1.59%。

精密稱取比阿培南1.000g9份置9個(gè)10mL容量瓶中,精密吸取每mL含丙酮5mg、乙腈0.41mg、二氯甲烷0.6mg、四氫呋喃0.72mg的對(duì)照品儲(chǔ)備液0.8mL、1.0mL和1.2mL各3份分別置上述10mL容量瓶中,同時(shí)加入內(nèi)標(biāo)溶液稀釋至刻度,搖勻。從每個(gè)容量瓶中精密量取5～20mL頂空瓶中,密封。按測(cè)定法分別進(jìn)行測(cè)定,同時(shí)取對(duì)照品溶液和供試品溶液按測(cè)定法測(cè)定,記錄色譜圖,按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算測(cè)得回收率。丙酮、乙腈、二氯甲烷、四氫呋喃的平均回收率分別為106.25%、110.19%、99.16%、101.43%。

2.6 樣品測(cè)定

取比阿培南3批,按上述方法制備供試品溶液,取供試品溶液和對(duì)照品溶液按測(cè)定法分別進(jìn)行測(cè)定,記錄色譜圖,見(jiàn)圖2。按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算供試品中丙酮、乙腈、二氯甲烷、四氫呋喃的殘留量,結(jié)果見(jiàn)表1。

圖2 比阿培南殘留溶劑樣品圖譜Figurel2 Spectra of sample of residual solvents of Biapenem

表1 測(cè)定結(jié)果Table1 Results of determining

3 討論

比阿培南中二氯甲烷的殘留量小,所以取樣品0.5g。比阿培南在甲酸中易溶,但考慮到甲酸的腐蝕性強(qiáng),故采用10%的甲酸溶液作為溶劑。

[1]李浩,劉浚.新型1β-甲基碳?xì)涿瓜╊惪股乇劝⑴嗄蟍J].國(guó)外醫(yī)藥:抗生素分冊(cè),2003,24(6).

[2]趙敏,趙國(guó)君,張勇.新碳青霉烯類抗生素比阿培南[J].中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志,2005,21(5).

[3]田晨煦,徐小平,廖麗云,等.毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定比阿培南中5種有機(jī)溶劑殘留量[J].中國(guó)抗生素雜志,2006,31(3).