滋腎寧神膠囊中芍藥苷在制劑工藝中的熱穩(wěn)定性考察

陳劍平，林榮鋒，張惜強(qiáng)，何耀慧，黃曉其，林吉，施旭光，蘇子仁*

(1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣東廣州 510006;2.廣東宏興集團(tuán)股份有限公司，廣東潮州 521011)

滋腎寧神膠囊中芍藥苷在制劑工藝中的熱穩(wěn)定性考察

陳劍平1，林榮鋒1，張惜強(qiáng)2，何耀慧1，黃曉其1，林吉1，施旭光1，蘇子仁1*

(1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣東廣州 510006;2.廣東宏興集團(tuán)股份有限公司，廣東潮州 521011)

滋腎寧神膠囊;芍藥苷;熱穩(wěn)定性;熱降解動力學(xué);HPLC

目的:考察不同工藝因素對滋腎寧神膠囊中芍藥苷含量的影響，初步探討芍藥苷熱降解動力學(xué)，進(jìn)而優(yōu)化工藝。方法:采用高效液相色譜法測定不同工藝因素制備的滋腎寧神膠囊中間體中芍藥苷的含量。結(jié)果:滋腎寧神膠囊制劑工藝過程中加熱溫度及時間是影響芍藥苷含量的主要因素;芍藥苷在復(fù)方水提液中熱降解反應(yīng)符合一級反應(yīng)方程，隨溫度的升高熱降解速率常數(shù)K顯著增大。結(jié)論:滋腎寧神膠囊制劑工藝過程應(yīng)避免高溫及長時間受熱;采用減壓濃縮及真空干燥可降低芍藥苷降解速率，明顯減少芍藥苷損失。

滋腎寧神膠囊是由炒白芍、制何首烏、熟地黃、五指毛桃等十六味藥制成的膠囊劑，具有滋補(bǔ)肝腎、寧心安神的功效。用于治療肝腎虧損、頭暈耳鳴、失眠多夢、怔忡健忘、腰酸遺泄、神經(jīng)衰弱等癥。滋腎寧神膠囊是由國家衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)收載的中藥保護(hù)品種滋腎寧神丸改進(jìn)而成［1］。方中炒白芍具有養(yǎng)血和陰、補(bǔ)肝腎之功效，筆者在滋腎寧神膠囊的工藝研究中發(fā)現(xiàn)，其指標(biāo)成分芍藥苷化學(xué)性質(zhì)較不穩(wěn)定，受工藝因素影響較大。本文從提取、濃縮、干燥工藝及其參數(shù)等方面入手，考察了不同制劑工藝因素對芍藥苷含量的影響。

1 儀器與試藥

DIONEX SUMMIT P680高效液相色譜儀(美國戴安公司);試驗(yàn)室專用超純水機(jī)(重慶利迪現(xiàn)代水技術(shù)設(shè)備有限公司)，舒美KQ5200DA型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司，40 KHz，200 W)，HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋(上海悅豐儀器儀表有限公司)，DZF-6051型真空干燥箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)，DHG-9070A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)，F(xiàn)WG型微波干燥箱(西安市亞寶制藥機(jī)械廠)。

芍藥苷對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號:110736-200629)。

實(shí)驗(yàn)所用藥材均由廣東宏興集團(tuán)股份有限公司宏興制藥廠提供;乙腈為色譜純試劑(Merck公司)，水為超純水，其它試劑均為分析純。

SPSS/PC V10.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析軟件(用于數(shù)據(jù)統(tǒng)計及回歸方程計算)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件Phenomenex Luna C18色譜柱(4.6 mm×250 mm，5 μm);流動相乙腈-0.1%磷酸(14∶86);檢測波長230 nm;流速1.0 mL/min;柱溫30℃。

2.2 對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品適量，加甲醇制成每1 mL含60 μg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備分別取各樣品(約相當(dāng)于炒白芍藥材0.1 g)，精密量取或精密稱定，置具塞錐形瓶中，加50%乙醇50 mL，稱定重量，超聲提取30 min，取出，放冷，補(bǔ)足減失重量，搖勻，濾過，即得。

2.4 樣品測定分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測定，即得。

3 制劑工藝過程中芍藥苷含量的影響因素考察

滋腎寧神膠囊初定的工藝為:稱取處方中除制何首烏外各藥材，加8倍量溶媒煎煮兩次，每次1.5 h，濾過，濾液濃縮至相對密度1.20(55℃)的浸膏，將制何首烏粉碎成細(xì)粉，與上述浸膏拌勻，干燥，濕法制粒，裝膠囊，即得。

3.1 提取溶媒考察稱取3倍處方量的藥材(內(nèi)含炒白芍18 g)2份，分別采用水和70%乙醇兩種溶媒按以上初定工藝進(jìn)行提取，分別得水提液和醇提液，精密量取25 mL(約含炒白芍0.177 g)濃縮至1 mL，按2項(xiàng)下方法測定各提取液中芍藥苷的含量。結(jié)果見表1。

結(jié)果顯示，水和70%乙醇提取效果相當(dāng)，提取率均達(dá)85%以上，從節(jié)約成本、生產(chǎn)和用藥安全等方面考慮，選用水作為提取溶媒較佳。

3.2 濃縮工藝因素考察取滋腎寧神方水提液24 200 mL(內(nèi)含炒白芍90 g)，平均分成4份，每2份為一組，共兩組，分別采用常壓100℃和減壓(80℃，－0.09 MPa)方式濃縮至體積為60 mL的稠膏，精密量取0.5 mL(約含炒白芍0.187 g)，按2項(xiàng)下方法測定稠膏中芍藥苷的含量。結(jié)果見表2。

表1 不同提取溶媒對芍藥苷含量的影響(n=2)

表2 不同濃縮工藝對芍藥苷含量的影響(n=2)

結(jié)果表明，減壓濃縮方法明顯優(yōu)于常壓濃縮方法;常壓濃縮溫度高，芍藥苷損失大，而減壓濃縮溫度明顯低于常壓濃縮，且芍藥苷含量顯著提高。溫度的提高可顯著降低樣品中芍藥苷的轉(zhuǎn)移率。提示在濃縮過程中，溫度是影響芍藥苷含量的主要因素之一，采用減壓濃縮方法能顯著提高芍藥苷含量。

3.3 干燥工藝因素考察取滋腎寧神方濃縮液3 000 mL(內(nèi)含炒白芍300 g)，平均分成6份，每2份為一組，共三組，分別置恒壓干燥箱、微波干燥箱和真空干燥箱內(nèi)，干燥得干膏，取約0.5 g(約含炒白芍0.165 g)，精密稱定，按2項(xiàng)下方法測定干膏中芍藥苷的含量，結(jié)果見表3。

表3 不同干燥方法中干膏的含水量及芍藥苷含量(n=2)

結(jié)果表明，真空干燥明顯優(yōu)于其它兩種干燥方法。在干燥過程中，微波干燥法與常壓干燥法相比，干燥溫度一樣但效率不同。微波干燥可明顯減少干燥時間，提高芍藥苷含量。提示受熱時間是影響樣品中芍藥苷含量的主要因素之一。而真空干燥法與微波干燥法相比，干燥溫度明顯降低，且干燥時間較少，芍藥含量顯著提高。提示溫度和受熱時間均是影響樣品中芍藥苷含量的主要因素之一。

4 受熱溫度及其時間考察

取滋腎寧神方水提液32 000 mL(內(nèi)含炒白芍120 g)，平均分成8份，每2份為一組，共四組，密封后，分別置于65℃、85℃、100℃恒溫水浴鍋及120℃油浴4個溫度值下進(jìn)行考察，并在相應(yīng)時間點(diǎn)精密量取25 mL(約含炒白芍0.1 g)，測定，得線性回歸方程，并繪制熱降解動力學(xué)曲線［2］，見表4。

表4 各溫度下水提液熱降解動力學(xué)(n=2)

結(jié)果表明，芍藥苷在復(fù)方水提液中降解反應(yīng)符合一級反應(yīng)方程，隨著溫度的提高，芍藥苷的降解速率常數(shù)K顯著增大。而在相同溫度條件下，隨著加熱時間的增加，芍藥苷的含量不斷降低。提示溫度和受熱時間是影響芍藥苷含量的主要因素。因此，在工藝過程中應(yīng)該盡可能降低加熱溫度，并縮短加熱時間。采用減壓濃縮和真空干燥工藝，可明顯提高芍藥苷含量。

5 討論

已有的研究工作中，筆者所在實(shí)驗(yàn)室建立了制劑中芍藥苷含量測定方法［3］，該法穩(wěn)定可靠，重復(fù)性強(qiáng);并已對白芍藥材水提液在不同加熱溫度及時間下芍藥苷含量變化情況進(jìn)行考察［4］。而關(guān)于復(fù)方水提液在此方面的研究目前文獻(xiàn)尚未見報道;本文實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明單味白芍藥材水提液與本復(fù)方水提液二者在不同加熱溫度及時間下芍藥苷含量變化情況相當(dāng)，提示高溫及長時間受熱是引起芍藥苷含量下降的主要因素，而提取溶媒對芍藥苷含量影響不大;芍藥苷在堿性條件下不穩(wěn)定［5］，本復(fù)方中水提液顯弱酸性而白芍藥材水提液呈中性，均對芍藥苷含量影響不大，提示弱酸性或中性條件下芍藥苷相對穩(wěn)定。

因此，在制劑工藝過程中主要考慮溫度及加熱時間的影響，避免高溫及長時間受熱。濃縮工藝宜采用減壓濃縮，且須進(jìn)行單次濃縮工序放膏，不宜多次加料一次放膏，此法可使?jié)饪s過程中溫度明顯降低和受熱時間明顯減少;干燥工藝中采用真空干燥可明顯降低干燥溫度。為減少芍藥苷的受熱時間，亦可將稠膏于其他生藥粉拌勻后再行干燥。

此外，筆者在提取過程中發(fā)現(xiàn)，經(jīng)炒制的白芍藥材其芍藥苷提取得率明顯高于未經(jīng)炒制的白芍藥材，提示以炒白芍組方可提高本制劑中芍藥苷含量。筆者推測炒制可使白芍中芍藥苷的溶出效率增大，其原因有待進(jìn)一步研究。

［1］中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)(中藥成方制劑第十八冊)》［S］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1992:339.

［2］張兆旺.中藥藥劑學(xué)［M］.北京:中國中醫(yī)藥出版社，2003(1): 523-524.

［3］林榮鋒，何耀慧，黃曉其，等.RP-HPLC法測定消渴通絡(luò)膠囊中芍藥苷的含量［J］.中藥新藥與臨床藥理，2009，20(1):60-62.

［4］曾寶，黃曉其，易智彪，等.芍藥苷在生產(chǎn)工藝過程中的含量變化和影響因素研究［J］.中國中藥雜志，2007，32(14):1472-1474.

［5］姚仲青，朱虹，姚海峰.溫度及pH值對赤芍總苷穩(wěn)定性的影響［J］.時珍國醫(yī)國藥，2006，17(7):1214-1215.

R944

A

1001-1528(2010)05-0767-03

2009-02-07

廣東省科技計劃項(xiàng)目(2007B031408006)

陳劍平(1984－)，男，碩士研究生，主要從事中藥研究。E-mail:lycjp@126.com

*通訊作者:蘇子仁(1964－)，男，教授，主要從事中藥研究。E-mail:suziren@gzhtcm.edu.cn