王正蓉，程樹(shù)強(qiáng)，夏曙華，彭曉楓，王 琴

（1.貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院 檢驗(yàn)系臨床檢驗(yàn)學(xué)教研室，貴州貴陽(yáng)550004；2.貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系，貴州貴陽(yáng)550004）

近年來(lái)UF-100全自動(dòng)尿沉渣分析儀在臨床上得到了廣泛應(yīng)用，它對(duì)尿沉渣直接熒光染色后利用流式細(xì)胞和電阻抗原理進(jìn)行檢測(cè)[1]，具有精密度好、參數(shù)多、簡(jiǎn)便快速等特點(diǎn)[2]。為了證實(shí)其可靠性，本文選擇住院和門(mén)診病人的尿液RBC和WBC陽(yáng)性標(biāo)本，從精密度，線性，攜帶污染率和可比性等方面對(duì)其進(jìn)行評(píng)價(jià)，探討其臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 來(lái)自貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院附院門(mén)診和住院部患者的新鮮尿液。

1.2 儀器與試劑 日本Sysmex公司生產(chǎn)的UF-100全自動(dòng)尿沉渣分析儀及其配套試劑(染液色；R8011；稀釋液：R8006；鞘液 G8084)和質(zhì)控品（批號(hào)A8008）、OLYMPUS顯微鏡、牛鮑氏細(xì)胞計(jì)數(shù)板。

1.3 方法

1.3.1 UF-100法 儀器正常開(kāi)機(jī)后進(jìn)行日質(zhì)控，新鮮尿液標(biāo)本取10mL按儀器操作要求進(jìn)行測(cè)定。

1.3.2 計(jì)數(shù)板法將尿液充分混勻并充入牛鮑氏細(xì)胞計(jì)數(shù)板內(nèi)，靜置2min后，計(jì)數(shù)10個(gè)大格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)，按下列公式計(jì)算出每微升尿液RBC、WBC數(shù)。RBC、WBC數(shù)/μl=10個(gè)大格內(nèi)細(xì)胞數(shù)

1.3.3 精密度 選取在UF-100尿液分析儀上測(cè)定的新鮮尿液標(biāo)本（RBC,WBC>100/μl）,再測(cè)定 10 次，計(jì)算均值，標(biāo)準(zhǔn)差，變異系數(shù)。

1.3.4 線性范圍 選取在UF-100尿液分析儀上測(cè)定的新鮮尿液標(biāo)本（RBC=1448/μl,WBC=346.6/μl),用正常尿液離心后的上清進(jìn)行 1：2,1：4,1：8,1：16,1：32,1：64倍比稀釋?zhuān)♂寴?biāo)本重復(fù)測(cè)定3次取均值。

1.3.5 攜帶污染率 連續(xù)3次高值測(cè)定（H1,H2,H3）后，立即作連續(xù)3次低值測(cè)定（L1,L2,L3）,按公式（L1-L3）/(H3-L3)×100%計(jì)算。

1.3.6 可比性 選擇 2~100/μl、100~500/μl、>500/μl三個(gè)濃度范圍的RBC、WBC標(biāo)本各35例，采用雙盲法分別用牛鮑氏細(xì)胞計(jì)數(shù)板和UF-100法進(jìn)行計(jì)數(shù)，細(xì)胞計(jì)數(shù)由臨檢科具有豐富臨床檢驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)的兩位檢驗(yàn)人員采用雙盲進(jìn)行計(jì)數(shù)，結(jié)果取均值。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法 使用SPSS11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，UF-100法與牛鮑氏細(xì)胞計(jì)數(shù)板法的結(jié)果采用配對(duì)t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 精密度檢測(cè) 依照Sysmex儀器說(shuō)明書(shū)要求RBC 、WBC 精密度 CV(%)應(yīng)在(±10.0%)范圍 ，從檢測(cè)結(jié)果可見(jiàn)RBC、WBC精密度CV在此范圍內(nèi)，符合要求；檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 UF-100 RBC和WBC精密度測(cè)定結(jié)果（n=10）

2.2 線性檢測(cè) 用RBC、WBC的理論值和UF-100的測(cè)定值進(jìn)行線性回歸相關(guān)分析，可知相關(guān)系數(shù)均大于 0.99；結(jié)果見(jiàn)表 2、圖 1、圖 2。

表2 UF-100 RBC、WBC線性回歸統(tǒng)計(jì)

2.3 攜帶污染率 UF-100檢測(cè)尿RBC,WBC的攜帶污染率分別為0.14%和0.17%,在實(shí)驗(yàn)室可接受范圍內(nèi)。結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 Sysmex UF-100攜帶污染率測(cè)試結(jié)果

2.4 可比性 選擇 2-100/μl、100-500/μl、>500/μl三個(gè)濃度范圍的RBC、WBC標(biāo)本各35例，采用雙盲法分別用牛鮑氏細(xì)胞計(jì)數(shù)板 和UF-100法進(jìn)行計(jì)數(shù)，結(jié)果RBC在<500/μl濃度范圍內(nèi)無(wú)顯著性差異（P>0.05），>500/μl的濃度范圍有顯著性差異（P<0.05）;WBC在2-100/μl濃度范圍內(nèi)無(wú)顯著性差異（P>0.05）,>100/μl的濃度范圍有顯著性差異（P<0.05）。結(jié)果見(jiàn)表4

表4 UF-100法和牛鮑氏細(xì)胞計(jì)數(shù)板測(cè)定RBC、WBC可比性分析（t檢驗(yàn)）

3 討論

Sysmex UF-100全自動(dòng)尿沉渣分析儀是目前臨床應(yīng)用于尿液分析的較先進(jìn)儀器之一，其工作原理是采用流式細(xì)胞和電阻抗原理，利用兩種染料菲啶和羧花青對(duì)細(xì)胞染色后，通過(guò)細(xì)胞的熒光強(qiáng)度、前向散射光強(qiáng)度及電阻抗的大小來(lái)區(qū)別尿中有形成分[3]。

在本文中我們對(duì)UF-100檢測(cè)RBC和WBC的精密度，線性，攜帶污染率進(jìn)行測(cè)定,從結(jié)果來(lái)看RBC和WBC精密度分別為3.8%和5.6%、線性相關(guān)系數(shù) (r)分別為0.997和0.999、攜帶污染率分別為0.14%和0.17%，均在實(shí)驗(yàn)室可接受的標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)。我們還選擇 2-100/μl、100-500/μl、>500/μl三個(gè)濃度范圍的RBC、WBC標(biāo)本各35例與牛鮑氏細(xì)胞計(jì)數(shù)板法進(jìn)行比較，結(jié)果表明RBC在<500/μl濃度范圍內(nèi)無(wú)顯著性差異（P>0.05），而>500/μl的濃度范圍有顯著性差異（P<0.05），分析其原因：我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)在RBC>500/μl這一組，有4例尿液標(biāo)本有大量草酸鈣結(jié)晶，1例尿液標(biāo)本有大量真菌孢子，這5例標(biāo)本可能均被UF100誤認(rèn)為RBC，從而導(dǎo)致兩者有顯著性差異。這與羅燕飛[4]等報(bào)道的結(jié)晶和霉菌能起RBC假陽(yáng)性結(jié)果相一致。實(shí)驗(yàn)結(jié)果還表明WBC在2-100/μl濃度范圍內(nèi)無(wú)顯著性差異（P>0.05）,而 >100/μl的濃度范圍有顯著性差異（P<0.05）。在進(jìn)行人工計(jì)數(shù)時(shí)，我們發(fā)100-500/μl和>500μl的標(biāo)本中有一部分有膿球，可能正是由于膿球的存在一方面導(dǎo)致我們的計(jì)數(shù)誤差，另一方面可能是由于細(xì)胞團(tuán)的體積較大被UF-100誤認(rèn)為其他有形成分，從而導(dǎo)致兩者有顯著性差異.

總體來(lái)說(shuō)UF-100檢測(cè)尿液RBC和WBC，具有精密度高，線性好，攜帶污染率低，自動(dòng)化程度高，易開(kāi)展質(zhì)量控制，并能提供較多參數(shù)且在低值范圍內(nèi)準(zhǔn)確性較好等優(yōu)點(diǎn)，但由于結(jié)晶、霉菌、粘液絲、細(xì)菌等其他有形成分的影響而易出現(xiàn)假陽(yáng)性[5，6]，因而還不能完全代替人工鏡檢。因此我們可結(jié)合干化學(xué)和人工鏡檢進(jìn)行聯(lián)合過(guò)篩，來(lái)提高工作效率和檢驗(yàn)質(zhì)量。

[1]許文榮.臨床檢基礎(chǔ)驗(yàn)學(xué)[M].北京:高等教育出版社,2006.155-156.

[2]張家紅，郭麗潔.UF-100型全自動(dòng)尿沉渣分析儀臨床應(yīng)用價(jià)值分析[J].實(shí)用醫(yī)技雜志，2004，11（5）：564-566.

[3]吳教仁，林敏.UF-100全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè)尿紅細(xì)胞的應(yīng)用[J].預(yù)防醫(yī)學(xué)論壇，2005，11（4）：421-422，426.

[4]羅燕飛，龔彩平.UF-100全自動(dòng)尿沉渣分析儀對(duì)紅細(xì)胞、白細(xì)胞檢測(cè)的影響因素分析[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2007，23（15）：2429-2430.

[5]崔海霞.UF-100全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè)尿紅細(xì)胞假陽(yáng)性結(jié)果分析[J].延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)學(xué)報(bào)，2008，31（3）:193-194.

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