張國平

三種交叉配血實驗方法應(yīng)用效果評價

張國平

目的對鹽水法、抗人球蛋白法及凝聚胺法交叉配血試驗進(jìn)行比較,評價三種交叉配血試驗方法的應(yīng)用效果。方法輸血送檢血液標(biāo)本 1253例,同時選用鹽水法、抗人球蛋白法及凝聚胺法進(jìn)行交叉配血試驗。結(jié)果鹽水法發(fā)現(xiàn) 1例陽性結(jié)果,凝聚胺法發(fā)現(xiàn) 3例陽性結(jié)果,且與抗人球蛋白法結(jié)果吻合。結(jié)論凝聚胺交叉配血試驗是安全有效、簡便快速、切實可行的交叉配血方法,值得推廣應(yīng)用。

鹽水法;抗人球蛋白法;凝聚胺法;交叉配血試驗

交叉配血試驗是輸血前一項重要的常規(guī)工作,其目的是檢測受血者與供血者抗原抗體是否相容,防止輸血反應(yīng)發(fā)生,確保臨床輸血安全。由于鹽水法具有簡便快速的特點,在交叉配血工作中得到廣泛應(yīng)用。但是鹽水法交叉配血試驗只能檢出不相配合的完全抗體(天然抗體IgM),而不能檢出不完全抗體(免疫性抗體IgG)[1],使其安全性受到了極大限制。為此,我們選用低離子凝聚胺(polybrene)法進(jìn)行交叉配血試驗,并和鹽水法、抗人球蛋白法進(jìn)行了比較,取得了滿意效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料 輸血送檢血液標(biāo)本 1253例。

1.2 試劑 抗 A、抗 B標(biāo)準(zhǔn)血清由長春博德生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供;A型、B型試劑紅細(xì)胞由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供;鹽水抗 D血清由英國勞博公司生產(chǎn)提供;廣譜抗球蛋白試劑由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供。polybrene試劑由臺灣東耀企業(yè)有限公司提供。

1.3 主要儀器 KA-2200細(xì)胞洗滌離心機(jī)(日本 KUBOTA),微量移液器。

1.4 血型鑒定 按照有關(guān)規(guī)范要求,對受血者及獻(xiàn)血者血液標(biāo)本進(jìn)行 ABO血型及 Rh血型鑒定[2]。選用與受血者ABO血型及Rh血型同型的獻(xiàn)血者血液進(jìn)行交叉配血實驗。

1.5 交叉配血方法

1.5.1 凝聚胺配血法交叉配血試驗,嚴(yán)格遵守試劑說明書。注意必須在顯微鏡下觀察結(jié)果,以避免弱凝集現(xiàn)象的漏檢。

1.5.2 鹽水法交叉配血試驗及抗人球蛋白法(Coombs)交叉配血試驗按有關(guān)文獻(xiàn)要求進(jìn)行操作[3]。

1.6 統(tǒng)計學(xué)處理 數(shù)據(jù)用百分率進(jìn)行統(tǒng)計處理。

2 結(jié)果

1253例凝聚胺法與傳統(tǒng)的交叉配血法結(jié)果見表1。

表11253 例凝聚胺交叉配血法和傳統(tǒng)配血法結(jié)果比較(例,%)

1253例交叉配血試驗中,鹽水法出現(xiàn)凝集陽性結(jié)果 1例,凝聚胺法、抗人球蛋白法均為 3例。其中 1例患者鹽水法、凝聚胺法、抗人球蛋白法均為陽性結(jié)果,臨床診斷及實驗室檢測證實為自身免疫性溶血性貧血患者。抗人球蛋白法出現(xiàn)凝集陽性結(jié)果的另外2例,凝聚胺法也為陽性結(jié)果,2例患者均為多次輸血的血液病患者。

3 討論

傳統(tǒng)的交叉配血有鹽水法、木瓜酶法、抗人球蛋白試驗等方法。鹽水配血法雖然簡便快速,但不能檢出免疫性抗體,單用鹽水法配血存在一定的危險性,需增加木瓜酶法或抗人球蛋白法,檢出免疫性抗體引起的配血不合,以進(jìn)一步減少輸血安全隱患。但木瓜酶法、抗人球蛋白法存在操作步驟繁瑣、反應(yīng)時間長、試劑效期短等缺點,其應(yīng)用受到一定限制。

凝聚胺法是一種簡便、快速、可靠的交叉配血方法,其基本原理是:凝聚胺是多價陽離子聚合物,能中和紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷,降低 Zeta電位,引起紅細(xì)胞非特異性凝聚,凝聚現(xiàn)象是可逆的。當(dāng)紅細(xì)胞與血清在低離子介質(zhì)中孵育,IgG抗體與紅細(xì)胞表面上的相應(yīng)抗原結(jié)合后在凝聚胺的作用下發(fā)生特異性凝集,凝集是不可逆的。當(dāng)加入枸櫞酸鈉重懸液后,枸櫞酸根的負(fù)電荷中和凝聚胺上的正電荷,非特異性的凝聚現(xiàn)象消失,而真正的特異性凝集不消失。

由表1可見,鹽水法只發(fā)現(xiàn)了 1例陽性凝集現(xiàn)象,而凝聚胺法發(fā)現(xiàn)了 3例陽性凝集現(xiàn)象,與抗人球蛋白法結(jié)果完全吻合。聚凝胺法可以檢出 IgM與IgG兩種性質(zhì)的抗體,可發(fā)現(xiàn)能引起溶血性輸血反應(yīng)的絕大多數(shù)抗體,故本法已逐漸推廣使用。但有文獻(xiàn)報道,聚凝胺法對Kell血型系統(tǒng)的部分抗體如抗 K、抗 Kpa、抗 Kpb不理想,而我國人群的 K基因頻率幾乎為 0,kk型幾乎為 100%,至今未發(fā)現(xiàn) Kell血型系統(tǒng)的抗體。

綜上所述,凝聚胺法交叉配血試驗?zāi)軝z出大多數(shù)不規(guī)則抗體,是安全有效、簡便快速的交叉配血方法,值得推廣應(yīng)用。

[1] 王培華.輸血技術(shù)學(xué).第 2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:126-131.

[2] 中華人民共和國衛(wèi)生部.臨床輸血技術(shù)規(guī)范.衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2000]184號.

[3] 中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司.全國臨床檢驗操作規(guī)程,第 3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:262-264.

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