劉 燕，應(yīng)月青，夏茂華，趙 京，楊明海，原 蕾，張成林

（1.北京動(dòng)物園，北京 西城100044；2.北京市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所，北京 朝陽(yáng)100026）

2009年底，本園1只獨(dú)角犀牛出現(xiàn)跛行。大約兩個(gè)月后，臥地不起。兩周后死亡。剖檢見(jiàn)關(guān)節(jié)腔內(nèi)有大量積液。積液涂片染色見(jiàn)到成鏈排列的革蘭陽(yáng)性球菌。后經(jīng)培養(yǎng)鑒定為停乳鏈球菌類(lèi)馬亞種（Streptococcusdysgalatiae），具體情況介紹如下。

1 發(fā)病情況

2009年10月初發(fā)現(xiàn)該獨(dú)角犀牛“邦蒂”行走時(shí)雙后肢明顯異常，表現(xiàn)為雙蹄抬起時(shí)不能正常向前而是朝對(duì)側(cè)運(yùn)步，導(dǎo)致雙蹄互相磨蹭，且站立時(shí)后軀不穩(wěn)，左右搖晃，后肢收于腹下。到10月24日站立時(shí)疼痛表現(xiàn)非常明顯，經(jīng)常因后肢不能負(fù)重，轉(zhuǎn)彎時(shí)致后軀臥倒。雙前肢也逐漸出現(xiàn)疼痛現(xiàn)象，不能正常邁步，臥地后起立困難。從11月初起病情急劇惡化，很難站立，幾乎每走一步都會(huì)摔倒，長(zhǎng)時(shí)間臥地。渾身皮膚多處在地面磨損出血，很難自行吃食。幾日后已經(jīng)不能站立，總是左側(cè)臥，偶爾前肢能把身體前半部抬起，但不能完全站立起來(lái)，頭部大部分時(shí)間靠在地上，呼吸急促。試圖采取輸液等積極治療措施，但由于頭部活動(dòng)幅度較大，人員不能靠近，輸液沒(méi)有成功，僅采血檢查。次日凌晨死亡。

2 剖檢變化

胃黏膜出血，肝囊腫，心肌壞死，腎臟壞死，陰道黏膜腫瘤，子宮黏膜腫瘤，陳舊性下頜瘺，雙后肢趾間皮膚破損并出血。四肢肌肉筋膜下有淡黃色膠凍樣組織和大量清亮透明液體；部分肌肉顏色較淡。右前肢肘關(guān)節(jié)關(guān)節(jié)面凸側(cè)軟骨粗糙不完整；左側(cè)股骨頭局部磨損嚴(yán)重；雙后肢跗關(guān)節(jié)關(guān)節(jié)囊內(nèi)有渾濁的液體。

3 病原菌分離與鑒定

3.1 分離培養(yǎng) 抽取死亡犀牛關(guān)節(jié)腔液，經(jīng)革蘭染色并鏡檢。病料接種于血液瓊脂平板，于37℃條件下培養(yǎng)24～48h。關(guān)節(jié)腔液經(jīng)革蘭染色見(jiàn)到大量成鏈革蘭陽(yáng)性球菌。該菌經(jīng)培養(yǎng)形成圓形、光滑、凸起、有β溶血環(huán)的菌落，鏡檢為陽(yáng)性球菌，成雙、單個(gè)或者短鏈排列。

3.2 生化特性鑒定 挑取純化的細(xì)菌的單個(gè)菌落分別做氧化酶、觸酶、糖發(fā)酵等試驗(yàn)，鑒定其生物學(xué)特性。觸酶（－），CAMP（－），β葡萄糖醛酸苷酶試驗(yàn)（＋），馬尿酸鈉（－），6.5%耐鹽試驗(yàn)（－），桿菌肽耐藥試驗(yàn)（－），V－P（－）。根據(jù)該生化試驗(yàn)結(jié)果初步判定為停乳鏈球菌。

3.3 半自動(dòng)鑒定系統(tǒng)鑒定 根據(jù)染色結(jié)果、氧化酶和觸酶試驗(yàn)結(jié)果，選擇合適的法國(guó)梅里埃公司API細(xì)菌鑒定系統(tǒng)試劑條進(jìn)行鑒定。本菌株為觸酶陰性的陽(yáng)性球菌，選擇APISTREP鑒定試紙條進(jìn)行鑒定。鑒定結(jié)果為停乳鏈球菌類(lèi)馬亞種（Streptococcusdysgalatiae），鑒定百分率為98%。

3.4 動(dòng)物試驗(yàn) 將本菌培養(yǎng)24h的新鮮肉湯培養(yǎng)液，調(diào)整菌濃度至109CFU/mL。選取0.1mL、0.2 mL和0.5mL 3種濃度，分別腹腔注射體重20g左右的小鼠，每種濃度注射3只小鼠。對(duì)照組的3只小鼠注射0.2mL無(wú)菌肉湯。除對(duì)照組小鼠外，其余均于48h內(nèi)死亡，。并從死鼠心血分離到該菌。

4 結(jié)果與討論

獨(dú)角犀牛是世界上瀕臨滅絕的動(dòng)物，現(xiàn)全球僅存2 200余頭，大部分生活在印度。本園獨(dú)角犀?！鞍畹佟保菩?，1978年10月出生，現(xiàn)年31歲。由于其年齡偏大，跗關(guān)節(jié)感染鏈球菌后導(dǎo)致左側(cè)股骨頭局部壞死引起痛疼，伴隨年老造成運(yùn)動(dòng)減少，臥地時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、體重過(guò)大壓迫呼吸循環(huán)系統(tǒng)功能不暢，最終導(dǎo)致死亡。停乳鏈球菌屬于蘭氏C群鏈球菌，較多地感染獸類(lèi)，可以導(dǎo)致豬、牛、馬、犬、禽膿腫、心內(nèi)膜炎及乳腺炎等等。從珍稀野生動(dòng)物體內(nèi)分離到停乳鏈球菌的病例比較少見(jiàn)。