王磊 劉斌（南開大學(xué)天津300071）

基因橫向轉(zhuǎn)移在細(xì)菌進(jìn)化中的作用

王磊 劉斌（南開大學(xué)天津300071）

生物進(jìn)化研究處于生物科學(xué)體系的核心和前沿。自達(dá)爾文創(chuàng)立進(jìn)化論以來(lái)，隨機(jī)突變一直被認(rèn)為是進(jìn)化的動(dòng)力，基因橫向轉(zhuǎn)移在進(jìn)化中的作用和發(fā)生機(jī)制是近年來(lái)生物進(jìn)化研究中的難點(diǎn)。在項(xiàng)目研究過(guò)程中創(chuàng)新研究方法，探索極端環(huán)境細(xì)菌重要功能和細(xì)菌表面多糖抗原的進(jìn)化規(guī)律，研究基因橫向轉(zhuǎn)移的作用和發(fā)生機(jī)制。項(xiàng)目完成對(duì)認(rèn)識(shí)生物進(jìn)化具有重要科學(xué)意義，對(duì)微生物遺傳育種、新發(fā)病原體防控等具有重要應(yīng)用價(jià)值。

基因橫向轉(zhuǎn)移細(xì)菌進(jìn)化

生物進(jìn)化研究處于生物科學(xué)體系的核心和前沿。自達(dá)爾文創(chuàng)立進(jìn)化論以來(lái)，隨機(jī)突變一直被認(rèn)為是進(jìn)化的動(dòng)力，基因橫向轉(zhuǎn)移在進(jìn)化中的作用和發(fā)生機(jī)制是近年來(lái)生物進(jìn)化研究中的難點(diǎn)，“基因橫向轉(zhuǎn)移為什么及如何在眾多物種間發(fā)生？（Why does lateral transfer occur in somany speciesand how？）”被Science列為需要解決的125個(gè)重要科學(xué)問題之一。由于研究難度較大，研究人員較少，關(guān)于基因橫向轉(zhuǎn)移的作用和機(jī)制的論文也較少。

無(wú)法有效發(fā)現(xiàn)受體中的橫向轉(zhuǎn)移片段、無(wú)法溯源供體研究發(fā)生機(jī)制、橫向轉(zhuǎn)移基因功能未知而無(wú)法研究其作用成為該問題的主要研究難點(diǎn)。代表著生命對(duì)環(huán)境極限適應(yīng)能力的極端環(huán)境細(xì)菌和具有自然界中最豐富生物多樣性之一的細(xì)菌表面多糖抗原，是研究這一問題的良好材料，只是相關(guān)研究尚處起步階段。我們自2002年開始，創(chuàng)新研究方法，探索極端環(huán)境細(xì)菌重要功能和細(xì)菌表面多糖抗原的進(jìn)化規(guī)律，研究基因橫向轉(zhuǎn)移的作用和發(fā)生機(jī)制。通過(guò)基因組和比較基因組學(xué)方法，發(fā)現(xiàn)和鑒定了大量受體中的橫向轉(zhuǎn)移片段；通過(guò)比較基因組學(xué)和多糖結(jié)構(gòu)分析相結(jié)合的方法，在具有相似多糖結(jié)構(gòu)的細(xì)菌中溯源獲得了部分橫向轉(zhuǎn)移片段的供體信息，并研究了橫向轉(zhuǎn)移發(fā)生機(jī)制；通過(guò)功能基因組學(xué)和生物化學(xué)方法研究相關(guān)基因功能，在遺傳事件和功能改變之間建立聯(lián)系，并研究了橫向轉(zhuǎn)移的作用。本項(xiàng)目對(duì)認(rèn)識(shí)生物進(jìn)化具有重要科學(xué)意義，對(duì)微生物遺傳育種、新發(fā)病原體防控等具有重要應(yīng)用價(jià)值。

2002年至2008年2月，本項(xiàng)目共在SCI刊物發(fā)表論文40篇（影響因子大于3.0的18篇），他人正面引用296次。8篇代表性論文（王磊教授均為通訊作者）他人正面引用154次，其中28次被Nature Reviews Microbiology等國(guó)際權(quán)威刊物的綜述性文章正面評(píng)論。獲31項(xiàng)發(fā)明專利授權(quán)。獲2007年天津市自然科學(xué)一等獎(jiǎng)和2009年第二屆談家楨生命科學(xué)創(chuàng)新獎(jiǎng)。

1 項(xiàng)目的主要研究成果

1.1 首次揭示了細(xì)菌長(zhǎng)鏈烷烴降解途徑和關(guān)鍵酶的功能，發(fā)現(xiàn)了一株重要石油降解細(xì)菌，適應(yīng)油藏環(huán)境最關(guān)鍵的烷烴降解能力的進(jìn)化形成是由基因橫向轉(zhuǎn)移介導(dǎo)的

石油微生物在高溫、低氧的油井中生存，以烷烴等石油成分為唯一營(yíng)養(yǎng)源。石油微生物，尤其是降解長(zhǎng)鏈烷烴的菌株，在石油開采和污染治理領(lǐng)域具有重要應(yīng)用價(jià)值。目前對(duì)石油微生物的研究主要集中在菌種的分離，而對(duì)其降油的分子機(jī)制及進(jìn)化途經(jīng)的研究基本是空白。我們從大港油田分離到一株具有專一降解長(zhǎng)鏈烷烴能力的革蘭氏陽(yáng)性嗜熱細(xì)菌——NG80-2。綜合運(yùn)用基因組學(xué)和功能基因組學(xué)方法，分析了該菌株降解長(zhǎng)鏈烷烴、適應(yīng)油藏環(huán)境的分子機(jī)制以及進(jìn)化途經(jīng)。

基因組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)NG80-2攜帶的土壤菌是典型的代謝纖維二糖、木聚糖等植物多糖來(lái)源的基因，并且這些基因沒有在最近發(fā)生基因橫向轉(zhuǎn)移的痕跡；同時(shí)NG80-2具有土壤菌典型的代謝途徑，包括20種必需氨基酸的合成途徑等，表明NG80-2起源于土壤菌。

結(jié)合基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、熒光定量PCR、體內(nèi)功能互補(bǔ)及體外酶學(xué)方法，首次在國(guó)際上鑒定了長(zhǎng)鏈烷烴降解途經(jīng)及編碼基因。解析了該途徑中的關(guān)鍵蛋白——長(zhǎng)鏈烷烴羥化酶（LadA）的結(jié)構(gòu)和作用機(jī)理。LadA為目前已知的降解烷烴碳鏈最長(zhǎng)（C15－C36）的羥化酶，與已報(bào)道的中短鏈烷烴羥化酶相比具有更廣泛的應(yīng)用價(jià)值。功能研究發(fā)現(xiàn)LadA對(duì)長(zhǎng)鏈烷烴分子的捕獲和結(jié)合是整條降解途徑中的關(guān)鍵步驟，直接決定著細(xì)菌可降解烷烴碳鏈的長(zhǎng)度。

發(fā)現(xiàn)ladA在過(guò)去不太長(zhǎng)的進(jìn)化時(shí)間內(nèi)通過(guò)基因橫向轉(zhuǎn)移進(jìn)入NG80-2，結(jié)合該菌中其他烷烴降解相關(guān)基因，從而形成了該菌降解長(zhǎng)鏈烷烴的能力。因此，ladA通過(guò)基因橫向轉(zhuǎn)移進(jìn)入NG80-2是其從土壤菌進(jìn)化為石油降解菌的關(guān)鍵步驟。

成果于2007年在PNAS上發(fā)表，并入選當(dāng)年“中國(guó)高等學(xué)校十大科技進(jìn)展”。同年10月Nature系列期刊的Nature Reviews Microbiology在其《新聞與分析》News&Analysis欄目用半頁(yè)的篇幅整體性評(píng)論介紹了該成果：“基因組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)了對(duì)于NG80-2菌株適應(yīng)油藏環(huán)境具有重要作用的一系列基因；發(fā)現(xiàn)獲得一個(gè)來(lái)自質(zhì)粒的烷烴單加氧酶基因ladA（編碼的蛋白催化烷烴降解途徑的第一步反應(yīng)）是NG80-2形成長(zhǎng)鏈烷烴降解能力的關(guān)鍵；NG80-2靈活的呼吸系統(tǒng)有益于其生存；NG80-2基因組上具有的許多編碼序列（包括一系列多糖的降解基因和一個(gè)植物來(lái)源木聚糖的代謝基因簇等）表明其起源于土壤菌”，“微生物用于環(huán)境污染物的生物修復(fù)是研究熱點(diǎn)”，“NG80-2菌株分離自中國(guó)油田地下深層油藏環(huán)境，可以在有氧環(huán)境下利用C15-C36的長(zhǎng)鏈烷烴作為唯一碳源；烷烴作為石油的主要成分，是石油污染生物修復(fù)的主要靶標(biāo)”，“LadA蛋白由于具有氧化難以降解的長(zhǎng)鏈烷烴的能力，因此在生物修復(fù)方面具有重要應(yīng)用價(jià)值”等。

美國(guó)發(fā)行量排名第3的The New York Times 2007年3月20日在其科學(xué)新聞中的《觀察站》欄目以“喜歡吃石油的細(xì)菌”為題報(bào)道了該成果。指出“中國(guó)南開大學(xué)的科學(xué)家獲得了一株可以‘吃石油’的細(xì)菌的全基因組，并發(fā)現(xiàn)了負(fù)責(zé)降解長(zhǎng)鏈烷烴的關(guān)鍵酶LadA，LadA可用于石油泄漏的清理”。

1.2 比較基因組學(xué)分析了一株可在極端酸性條件下降解甲烷（第二主要溫室氣體）的細(xì)菌，發(fā)現(xiàn)了基因橫向轉(zhuǎn)移推動(dòng)了變形菌門之外該株新型甲烷氧化菌的進(jìn)化形成

甲烷是第二主要溫室氣體，極酸性地?zé)岘h(huán)境是大氣中甲烷的主要來(lái)源之一，微生物降解是甲烷分解的主要途徑。以前普遍認(rèn)為只有變形菌門（Proteobacteria）中的一些菌株具有甲烷代謝相關(guān)基因，但這些菌株只能在中性或中度酸性的環(huán)境生長(zhǎng)。變形菌門之外是否存在甲烷氧化菌，如存在它們是如何獲得甲烷氧化能力成為目前的研究熱點(diǎn)。

該工作分離到可在pH值為1.5的極端酸性環(huán)境下降解甲烷的菌株V4，通過(guò)基因組測(cè)序、比較基因組學(xué)和進(jìn)化分析，確定該菌為疣微菌門（Verrucomicrobia）細(xì)菌。該成果獲得了疣微菌門中第一個(gè)完整基因組序列，比較基因組學(xué)工作發(fā)現(xiàn)V4全部編碼蛋白中的23%（包括甲烷單加氧酶等參與甲烷降解途徑的酶）與進(jìn)化關(guān)系較遠(yuǎn)的變形菌門細(xì)菌的編碼蛋白相似性最高，表明V4與變形菌門中的甲烷氧化菌等遠(yuǎn)緣菌之間在很久的進(jìn)化時(shí)間之前發(fā)生了大量基因橫向轉(zhuǎn)移事件，這些事件是V4獲得甲烷降解能力和完整細(xì)胞功能的動(dòng)力。

發(fā)現(xiàn)V4具有3個(gè)不同的編碼甲烷單加氧酶（負(fù)責(zé)甲烷降解途徑中的關(guān)鍵的第一步）的操縱子，其相似性為50%～90%，但它們與變形菌門中的甲烷單加氧酶基因進(jìn)化距離較遠(yuǎn)，并形成了一個(gè)獨(dú)立的進(jìn)化分支，說(shuō)明將甲烷代謝相關(guān)基因引入V4的橫向轉(zhuǎn)移事件發(fā)生在很久的進(jìn)化時(shí)間之前，且其后在疣微菌門和變形菌門之間沒有發(fā)生相關(guān)橫向轉(zhuǎn)移。

我們的研究成果于2007年在Nature發(fā)表。Annual Review of Microbiology 2009年在題目為“The Expanding World of Methylotrophic Metabolism”的綜述中全面介紹了甲基營(yíng)養(yǎng)菌的代謝機(jī)制和生態(tài)方面的最新研究進(jìn)展，其中對(duì)該成果的評(píng)論為：“發(fā)現(xiàn)疣微菌門中的一些菌株具有氧化甲烷的能力，是最壯觀（mostspectacular）的新發(fā)現(xiàn)之一，使我們對(duì)甲基營(yíng)養(yǎng)菌分布的認(rèn)識(shí)在現(xiàn)有基礎(chǔ)上有了新的擴(kuò)展”，因?yàn)椤半m然這些甲烷氧化菌與已知的變形菌門中的甲烷氧化菌親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，但它們?nèi)允褂玫湫偷念w粒型甲烷單加氧酶（進(jìn)化關(guān)系較遠(yuǎn)）來(lái)代謝甲烷”，“雖然疣微菌門中的細(xì)菌在不同環(huán)境中大量存在，但它們大部分不可培養(yǎng)，因此對(duì)于它們?cè)谔囟ㄉ锏厍蚧瘜W(xué)過(guò)程中的作用缺乏研究”。Annual Review系列每年分別對(duì)40余個(gè)學(xué)科各發(fā)表1卷年評(píng)，評(píng)述該學(xué)科中最重要的研究進(jìn)展，綜述均由各領(lǐng)域頂尖科學(xué)家撰寫，其中Annual Review of Microbiology每年對(duì)當(dāng)時(shí)微生物學(xué)領(lǐng)域若干個(gè)最重要的進(jìn)展進(jìn)行一次系統(tǒng)性的總結(jié)。

英國(guó)應(yīng)用微生物學(xué)會(huì)期刊Environmental Microbiology Reports 2009年發(fā)表社論（Editorial），由甲烷氧化菌領(lǐng)域權(quán)威、英國(guó)沃里克大學(xué)的JC.Murrell教授撰寫，題目為“The microbial methane cycle”。該社論全面介紹參與甲烷循環(huán)的微生物的多樣性、性狀和代謝機(jī)制，指出該項(xiàng)目成果“獲得的甲烷氧化菌V4的基因組信息，對(duì)于疣微菌門甲烷氧化菌生理、生化特性的研究，具有難以估量的價(jià)值”。

1.3 發(fā)現(xiàn)基因橫向轉(zhuǎn)移是自然界中最豐富的生物多樣性之細(xì)菌表面多糖抗原多樣性在宿主選擇壓力下進(jìn)化形成的主要途徑，并發(fā)現(xiàn)同源重組、質(zhì)粒轉(zhuǎn)移等是橫向轉(zhuǎn)移發(fā)生的主要機(jī)制

該方面工作以人類專屬致病性志賀氏菌的所有表面多糖抗原為核心，同時(shí)選擇同為人類腸道菌的大腸桿菌、沙門氏菌（基因橫向轉(zhuǎn)移可能性較高）的表面多糖抗原，以及與志賀氏菌、大腸桿菌親緣關(guān)系較遠(yuǎn)的種屬（霍亂弧菌、軍團(tuán)菌、阪崎腸桿菌、變形桿菌等，基因橫向轉(zhuǎn)移可能性較低）中具有相似結(jié)構(gòu)或相同罕見單糖的表面多糖抗原，共計(jì)300余種，進(jìn)行基因簇、基因功能和進(jìn)化的分析，尋找基因橫向轉(zhuǎn)移是否是致病菌進(jìn)化動(dòng)力的證據(jù)。并利用其多樣性的特點(diǎn)，通過(guò)比較基因組學(xué)和多糖結(jié)構(gòu)分析相結(jié)合的方法，在具有相似多糖結(jié)構(gòu)的細(xì)菌中尋找可能的橫向轉(zhuǎn)移片段供體，以研究橫向轉(zhuǎn)移發(fā)生機(jī)制。

發(fā)現(xiàn)基因橫向轉(zhuǎn)移是人類專屬致病性志賀氏菌表面多糖抗原多樣性和該菌致病性在短時(shí)間內(nèi)快速形成的主要機(jī)制，志賀氏菌仍在快速進(jìn)化中。

我們破譯了27種志賀氏菌表面多糖抗原基因簇，結(jié)合以前的數(shù)據(jù)，系統(tǒng)地完成了對(duì)志賀氏菌全部34種表面多糖抗原遺傳信息的整體比較分析。志賀氏菌是在較近的進(jìn)化時(shí)間由3個(gè)主要的起源從大腸桿菌進(jìn)化而來(lái)的。我們發(fā)現(xiàn)志賀氏菌與大腸桿菌具有21組相同或高度相關(guān)（同源性99%～100%）的表面多糖抗原基因簇，表明在志賀氏菌從大腸桿菌分化出來(lái)之后，二者多糖抗原基因簇間頻繁的橫向轉(zhuǎn)移（主要由同源重組介導(dǎo)）是志賀氏菌表面多糖抗原多樣性快速形成的主要機(jī)制。發(fā)現(xiàn)這些基因簇在通過(guò)橫向轉(zhuǎn)移進(jìn)入志賀氏菌后，在短時(shí)間內(nèi)發(fā)生了較多遺傳事件（基因橫向轉(zhuǎn)移和突變等），表明志賀氏菌在人體環(huán)境的選擇壓力下發(fā)生了很多改變。且這類遺傳事件在志賀氏菌多糖抗原基因簇中出現(xiàn)的比率（50%）明顯高于在大腸桿菌多糖抗原基因簇中出現(xiàn)的比率（33%），表明志賀氏菌仍在“快速”進(jìn)化過(guò)程之中。

我們系統(tǒng)地研究并實(shí)驗(yàn)重現(xiàn)了由基因橫向轉(zhuǎn)移介導(dǎo)的一個(gè)細(xì)菌表面多糖抗原的進(jìn)化形成，發(fā)現(xiàn)了該過(guò)程中的橫向轉(zhuǎn)移供體、橫向轉(zhuǎn)移方式和橫向轉(zhuǎn)移的作用。痢疾志賀氏菌1型可引起嚴(yán)重的細(xì)菌性痢疾,表面多糖抗原變化可導(dǎo)致該菌致病性減弱。發(fā)現(xiàn)痢疾志賀氏菌1型由橫向轉(zhuǎn)移獲得的表面多糖抗原基因簇的供體為大腸桿菌0148，基因簇兩端的galF和gnd基因的同源重組介導(dǎo)了橫向轉(zhuǎn)移的發(fā)生，之后其基因簇中一個(gè)糖基轉(zhuǎn)移酶基因wbbG發(fā)生突變失活，同時(shí)該菌通過(guò)獲得一個(gè)外源質(zhì)粒（基因橫向轉(zhuǎn)移的初級(jí)形式）進(jìn)而獲得了一個(gè)該質(zhì)粒上的糖基轉(zhuǎn)移酶基因wbbP（與wbbG負(fù)責(zé)不同二糖鍵的合成），最終形成了有利于其致病性的多糖抗原。

發(fā)現(xiàn)遠(yuǎn)緣種屬間的基因橫向轉(zhuǎn)移也可推動(dòng)細(xì)菌表面多糖抗原多樣性的形成。

寡糖分子跨膜運(yùn)輸是生物細(xì)胞的重要功能之一，真核與原核生物的寡糖轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)具有一定共性。我們?cè)诖竽c桿菌052中首次發(fā)現(xiàn)ABC轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)負(fù)責(zé)大腸桿菌異多糖表面多糖抗原的轉(zhuǎn)運(yùn)。整體分析顯示其他大腸桿菌異多糖表面多糖抗原均通過(guò)翻轉(zhuǎn)酶完成轉(zhuǎn)運(yùn)，且基因簇中沒有ABC轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)編碼基因，表明052表面多糖抗原基因簇很可能以基因橫向轉(zhuǎn)移的方式由其他種屬進(jìn)入大腸桿菌。

該方面成果發(fā)表25篇SCI論文。2008年國(guó)際微生物學(xué)權(quán)威綜述期刊FEMSMicrobiology Reviews基于我們系統(tǒng)解析志賀氏菌表面多糖抗原多樣性遺傳進(jìn)化機(jī)理方面的成果，邀請(qǐng)王磊教授撰寫綜述，責(zé)任編輯以色列特拉維夫大學(xué)的D.Gut nick教授在邀請(qǐng)函中指出我們研究的問題“是非常及時(shí)的”，同行評(píng)審專家指出：“這是一篇對(duì)志賀氏菌0抗原遺傳和結(jié)構(gòu)令人感興趣和全面的綜述，代表了對(duì)這一領(lǐng)域重要和全新的貢獻(xiàn)”。國(guó)際主要科技圖書出版社——Springer的Endotoxins:Structure,Function and Recognition主編在2009年邀請(qǐng)王磊教授撰寫革蘭氏陰性細(xì)菌表面多糖抗原多樣性章節(jié)的邀請(qǐng)函中指出“你在這一領(lǐng)域的貢獻(xiàn)已獲得國(guó)際認(rèn)可”。

1.4 成功建立基于細(xì)菌表面多糖抗原特異分子標(biāo)識(shí)的致病菌分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)體系，在繼承傳統(tǒng)血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)優(yōu)點(diǎn)的基礎(chǔ)上，提高速度1～7倍

表面多糖抗原具有自然界最豐富的多樣性之一，自20世紀(jì)30年代以來(lái)一直是血清學(xué)檢測(cè)的靶標(biāo)。血清學(xué)檢測(cè)目前仍是最靈敏和特異的常規(guī)使用的檢測(cè)方法。分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)具有速度快且易于大規(guī)模使用的優(yōu)點(diǎn)，是目前國(guó)際上公認(rèn)的致病菌檢測(cè)的發(fā)展方向，但當(dāng)前的難點(diǎn)在于DNA靶標(biāo)分子特異性較低，還不能取代傳統(tǒng)的血清學(xué)檢測(cè)。

表面多糖抗原多樣性由合成基因簇的遺傳多樣性導(dǎo)致。我們通過(guò)對(duì)志賀氏菌、大腸桿菌、沙門氏菌、軍團(tuán)菌等300余種表面多糖抗原基因簇的進(jìn)化分析，發(fā)現(xiàn)其中兩類基因（糖基轉(zhuǎn)移酶基因和寡糖單位處理酶基因）主要進(jìn)化方式為突變，橫向轉(zhuǎn)移現(xiàn)象很少，具有高度抗原特異性。我們據(jù)此篩選出300余種細(xì)菌（包括志賀氏菌全部34種血清型等）的多糖抗原特異分子標(biāo)識(shí)。

利用這些特異分子標(biāo)識(shí)建立了針對(duì)123種（或血清型）致病菌的快速檢測(cè)技術(shù)，包括：首次建立的針對(duì)志賀氏菌和沙門氏菌全部表面多糖抗原的分子檢測(cè)技術(shù)，針對(duì)15種血清型的志賀氏菌和致病性大腸桿菌的快速檢測(cè)技術(shù)，針對(duì)引起嬰幼兒腹瀉和敗血病的大腸桿菌0114的快速檢測(cè)方法等。該技術(shù)（3～12小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)）既繼承了血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)靈敏度高和特異性好的優(yōu)點(diǎn)，又彌補(bǔ)了其耗時(shí)長(zhǎng)、工作量大的不足（傳統(tǒng)方法需要24小時(shí)以上），具有重要應(yīng)用價(jià)值。

可檢測(cè)的123種（或血清型）致病菌包括：34個(gè)血清型的志賀氏菌、46個(gè)血清群的沙門氏菌、8個(gè)血清型的致病性大腸桿菌、23個(gè)血清型的肺炎鏈球菌，以及阪崎腸桿菌、霍亂弧菌01及0139、軍團(tuán)菌、單核李斯特菌、肺炎克雷伯氏菌、金黃色葡萄球菌、空腸彎曲桿菌、蠟樣芽孢桿菌、鏈球菌、奇異變形桿菌、銅綠假單胞菌等。

該方面成果獲31項(xiàng)發(fā)明專利授權(quán)，發(fā)表SCI論文9篇。我們建立的該檢測(cè)技術(shù)已被國(guó)內(nèi)外廣泛借鑒和引用。芬蘭國(guó)家公共衛(wèi)生研究所利用我們的技術(shù)，對(duì)分離自農(nóng)場(chǎng)居民和牛身上的樣品中的大腸桿菌0174菌株進(jìn)行了篩查。美國(guó)農(nóng)業(yè)部在建立針對(duì)不同致病菌檢測(cè)技術(shù)的2篇論文中均借鑒了我們的檢測(cè)技術(shù)并引用了我們的論文。

2 項(xiàng)目應(yīng)用

2009—2010年，我們利用這項(xiàng)技術(shù)幫助上海市疾病預(yù)防控制中心建立了較完善的致病菌分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)體系。其中針對(duì)123種細(xì)菌的分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)已應(yīng)用于2010年上海世博會(huì)的公共衛(wèi)生安全保障工作和突發(fā)事件處理并獲好評(píng)。世博會(huì)期間在常規(guī)檢測(cè)中，共完成2 160例食品、飲用水、糞便等樣品的檢測(cè)，檢出陽(yáng)性樣品30例，經(jīng)傳統(tǒng)檢測(cè)方法復(fù)核，準(zhǔn)確率為100%，未發(fā)生因漏檢而引起感染的情況。在世博會(huì)期間突發(fā)事件的處理中，我們的技術(shù)用于食物中毒、水污染、醫(yī)院內(nèi)感染等突發(fā)事件的應(yīng)急檢驗(yàn)，均快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)出志賀氏菌、沙門氏菌、軍團(tuán)菌等致病菌?！?/p>

2011-03-08