向 蓉,隋 洪,張瑞雄
(南方醫(yī)科大學附屬小欖醫(yī)院檢驗科,廣東 中山 528415)
尿液常規(guī)分析是診斷泌尿系統(tǒng)疾病的重要指標之一,在腎和尿路疾患的診斷和鑒別診斷、疾病嚴重程度和預后的判斷中都有極其重要的意義。在臨床實驗室工作中,顯微鏡檢細胞形態(tài)學是最基本的技能,顯微鏡檢測被稱為尿液有形成分檢測的金標準。隨著基礎醫(yī)學的發(fā)展,各種尿液分析儀相繼出現(xiàn),干化學分析儀能在短時間內(nèi)提供十幾項尿液化學數(shù)據(jù)[1],全自動尿沉渣分析儀在實驗室的廣泛使用,較好地解決了尿沉渣檢查中細胞定量分析的問題。本文就以上3種方法對1 172份尿液標本中的有形成分紅細胞、白細胞、管型及酵母菌進行分析,結(jié)果如下:
1.1 標本來源 隨機選擇2010年9~12月住院患者和門診患者尿樣1 172份。患者用一次性尿杯收集尿樣約10 ml,所有標本先行儀器檢測,完畢后再離心鏡檢,所有檢測均控制在2 h內(nèi)完成。
1.2 儀器與試劑 美國IRIS公司的IQ-200全自動尿沉渣分析儀及配套試劑和質(zhì)控品;BIO RAD公司提供的AX-4280尿液分析儀及配套試劑,其質(zhì)控品采用2個濃度Liquichek TM尿液質(zhì)控品(液體);OLYMPUS顯微鏡。
1.3 方法 AX-4280尿液分析儀聯(lián)合IQ-200全自動尿沉渣分析儀。每天檢測標本前對IQ-200全自動尿沉渣分析儀進行Focus調(diào)焦和陰性陽性質(zhì)控物測試,測試在控后方可檢測標本。AX-4280尿液分析儀用BioRad公司提供的陰性陽性質(zhì)控物進行監(jiān)測,在控后方可檢測標本。該儀器聯(lián)合后的流水線:先行AX-4280尿液分析儀干化學分析,然后利用IQ-200全自動尿沉渣分析儀,上機操作嚴格按儀器操作說明書進行。顯微鏡檢按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[2]進行,并由同一操作者完成。
1.4 統(tǒng)計學方法 統(tǒng)計分析采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件,對3種方法的檢測結(jié)果比較用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
IQ-200全自動尿沉渣分析儀參考值由威仕達公司提供:紅細胞(RBC)0~17/μl,白細胞(WBC)0~28/μl,管型0~2/ul,酵母菌0~11/μl。顯微鏡檢按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》RBC<3/HP,WBC<5/HP,管型<0/LP,酵母菌<0/LP,超出為陽性標本。
2.11 172例尿標本RBC、WBC 3種檢測方法 在1 172份標本中,紅細胞檢出率:AX-4280干化學法和IQ-200沉渣分析儀比較差異有統(tǒng)計學意義(P=0.011);沉渣鏡檢與IQ-200沉渣分析儀比較差異有統(tǒng)計學意義(P=0.000);沉渣鏡檢與AX-4280干化學法比較差異有統(tǒng)計學意義(P=0.000)。白細胞檢出率:AX-4280干化學法和IQ-200沉渣分析儀比較差異無統(tǒng)計學意義(P=0.752);沉渣鏡檢與IQ-200沉渣分析儀比較差異無統(tǒng)計學意義(P=0.080);沉渣鏡檢與AX-4280干化學法比較差異無統(tǒng)計學意義(P=0.056),見表1。
2.2 1 172例尿標本管型、酵母菌兩種檢測方法 在1 172份標本中,管型檢出率:沉渣鏡檢與IQ-200沉渣分析儀比較差異有統(tǒng)計學意義(P=0.000)。酵母菌檢出率:沉渣鏡檢與IQ-200沉渣分析儀比較差異有統(tǒng)計學意義(P=0.000),見表2。
表1 3種方法檢測RBC、WBC結(jié)果比較[份(%)]
表2 兩種方法檢測管型、酵母菌結(jié)果比較[份(%)]
AX-4280尿液分析儀使用的是干化學法,是根據(jù)尿液中相應的化學成分使尿多聯(lián)試帶上各種含特殊試劑的模塊發(fā)生顏色變化來進行定性或半定量分析,顏色深淺與尿液中相應物質(zhì)的濃度成正比。IQ-200全自動尿沉渣分析儀采用流式細胞技術(shù)和自動粒子識別系統(tǒng),在位相差顯微鏡下,由數(shù)碼相機拍攝500個高倍鏡視野照片,再通過APR軟件對尿中有形成分的大小、對比度、形狀、質(zhì)地進行鑒別提取,能夠提供定量的結(jié)果并且可以儲存或直接在屏幕上觀察,對可疑成分可任意選取進行人工復核。
3.1 紅細胞檢測 表1的數(shù)據(jù)表明,采用干化學法檢測紅細胞陽性率最高,原因在于它所檢測的是游離的血紅蛋白,在這點上它優(yōu)于IQ-200沉渣分析儀和沉渣鏡檢,但也因其是采用血紅蛋白類過氧化酶法,尿液中含有的肌紅蛋白、對熱不穩(wěn)定酶、氧化劑或菌尿均可導致假陽性的出現(xiàn),如果尿液中存在大量維生素C,又可競爭性抑制反應而產(chǎn)生假陰性結(jié)果[3]。在IQ-200沉渣分析儀檢測紅細胞陽性而沉渣鏡檢陰性的78例標本中,鏡檢多可見各種結(jié)晶,偶見酵母菌,可見IQ-200檢測紅細胞易受尿液中的草酸鈣結(jié)晶、尿酸鹽結(jié)晶、菌尿等的影響而出現(xiàn)假陽性。但顯微鏡檢也有其無法克服的缺點,如離心過程使細胞丟失、破壞、變形,不同操作人員的誤差,以及不能檢測已溶解破壞的紅細胞,可能造成診斷的假陰性[4]。
3.2 白細胞檢測 干化學法檢測白細胞,采用的是中性粒細胞酯酶法,中性粒細胞胞質(zhì)中含有酯酶,而單核細胞淋巴細胞胞質(zhì)中無酯酶,因此檢測只對粒細胞敏感。如尿液中污染甲醛,或高濃度膽紅素,或使用某些藥物如呋喃妥因時會呈現(xiàn)假陽性結(jié)果,如尿液中含維生素C,或尿液中含有大劑量先鋒霉素Ⅳ、慶大霉素等藥物,或尿蛋白大于5 g/L時,會呈現(xiàn)假陰性結(jié)果[3]。IQ-200可將小圓細胞和某些結(jié)晶誤判為白細胞,人工審核時??砂l(fā)現(xiàn)。血尿或尿中紅細胞量極大時易歸類到白細胞,渾濁尿由于雜質(zhì)較多也可導致IQ-200白細胞檢測出現(xiàn)假陽性。
3.3 管型和酵母菌檢測 由于尿液的有形成分較為復雜和儀器檢測的方法所限,導致IQ-200檢測管型和酵母菌假陽性率較高,IQ-200常將尿液中的菌絲、黏液絲及類管型異物等誤判為管型,將某些變形或重疊紅細胞等誤判為酵母菌,通過人工審核可提高其準確性,但有些病理性管型和疑似酵母菌仍無法準確判斷,此時必須將尿液離心鏡檢減少假陽性,當干化學法提示蛋白陽性而IQ-200檢測管型為陰性時也需將尿液離心鏡檢減少假陰性??梢奍Q-200對病理的管型、酵母菌等判斷能力較低,此時必須以顯微鏡檢方可做出判斷。
尿有形成分的檢查是對泌尿系統(tǒng)疾病做出診斷定位、鑒別診斷及預后判斷的重要常規(guī)試驗項目。在一般性狀檢查或化學試驗中不能發(fā)現(xiàn)的異常變化,??赏ㄟ^沉渣檢查發(fā)現(xiàn)[1]。尿液檢查結(jié)果的準確度直接關(guān)系到臨床的診斷。IQ-200全自動尿沉渣分析儀、AX-4280尿液分析儀這些自動化系統(tǒng)有較高的靈敏度和重復性,且可得到多項尿液化學數(shù)據(jù),工作效率得到提高,極大降低了人工顯微鏡檢復查的比率,減少了傳統(tǒng)沉渣分析的人為主觀性,提高了結(jié)果的可信度,但不可替代顯微鏡檢[5]。迄今為止,沒有一臺儀器的檢測結(jié)果能完全替代顯微鏡,尿沉渣鏡檢以獨特的臨床價值仍是尿液分析儀中不可缺少的檢查手段]6]。因此在日常工作中IQ-200、AX-4280尿液分析儀及顯微鏡檢應聯(lián)合應用。同時還應當把握好分析前、分析中、分析后的各項事宜,例如標本的采集運送、使用的器材、尿液分析儀的質(zhì)控物、尿沉渣檢查的標準化結(jié)果的人工審核以及與臨床的溝通等,方可發(fā)出準確、及時、全面的尿液分析結(jié)果。
[1]叢玉隆,馬駿龍.當代尿液分析技術(shù)與臨床[M].北京:中國科學技術(shù)出版社,1998:2.
[2]葉應嫵,王毓三.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].2版.南京:東南大學出版社,1997:133-135.
[3]熊立凡,李樹仁.臨床檢驗基礎[M].3版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2004:188.
[4]叢玉隆,馬駿龍,鄧新立.尿液常規(guī)分析質(zhì)量控制及臨床應用研究體會[J].臨床檢驗雜志,2001,19(4):241-243.
[5]李 雯,王文華,劉 燦.三種尿沉渣檢測法在尿有形成分檢測中的臨床應用[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2007,28(4):342-344.
[6]陳 莉.干化學法檢測尿潛血與沉渣鏡檢紅細胞的結(jié)果誤差分析[J].海南醫(yī)學,2007,18(12):151-152.