符晨星，賀建華*，侯德興

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學 動物科學技術學院, 湖南 長沙410128；2.鹿兒島大學 農(nóng)學部，日本 鹿兒島 890- 8580）

生物體內(nèi)自由基的積累會導致一些疾病的發(fā)生[1-4]。目前國內(nèi)外大多使用丁基羥基茴香醚（BHA）、沒食子酸丙酯（PG）和2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚 （BHT）等化學合成的抗氧化劑，有研究[5]表明，這些合成抗氧化劑很有可能損害人體的酶系統(tǒng)，因此，對安全、無毒天然抗氧化劑的研究、開發(fā)日益受到重視。

荷葉、枳實和水皂角是分布較廣、產(chǎn)量較高的中草藥植物。荷葉具有很強的抗氧化能力，其清除自由基的主要成分是荷葉黃酮苷和槲皮素[6]；枳實含有生物堿和黃酮類化合物等有效成分[7]；水皂角葉中的木犀草素以及與其結構相似的多酚類物質(zhì)對脂肪酶有抑制作用[8-9]。筆者對荷葉、枳實和水皂角等3種中草藥植物的多酚含量進行測定，評估它們的抗氧化能力，試分析中草藥植物中的多酚成分與其抗氧化能力的關系。

1 材料與方法

1.1 材 料

10∶1比例濃縮的荷葉和水皂角粗提物、粗提后含 10%辛弗林的枳實粗提物，均由湖南農(nóng)業(yè)大學植物功能成分利用國家工程技術研究中心提供；DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）、沒食子酸標準品為日本 NACALAI TESQUE產(chǎn)品；50% Folin-Ciocalteu 試劑、Trolox（6-羥基-2，5，7，8-四甲基色滿-2-羧酸）標準品為美國SIGMA公司產(chǎn)品。

1.2 方 法

1） 樣品處理。荷葉、水皂角、枳實粗提物與70%乙醇混勻，離心，取上清液，過濾，濃縮后用50%二甲基亞砜（DMSO）溶解，使樣品質(zhì)量濃度為300 mg/mL。

2） 多酚定量。采用Folin-Ciocalteu法[10]。分別準確在比色盤各孔中加入50% DMSO 10、8、6、4、2、0 μL，樣品溶液0、2、4、6、8、10 μL，2% Na2CO3200 μL，50% Folin-Ciocalteu試劑10 μL，于595 nm波長下比色，測定吸光度。

3） DPPH自由基清除能力測定。采用分光光度計法[11]。在比色盤各孔中分別加入80%甲醇溶液10、8、6、4、2、0 μL，樣品溶液0、2、4、6、8、10 μL，DPPH試劑190 μL，混勻，避光在室溫下反應30 min，于490 nm波長下比色，測定吸光度。采用IC50值即反應被抑制到一半時抑制劑的濃度來衡量樣品溶液清除自由基能力。IC50值越低，清除能力越強。

數(shù)據(jù)均采用Excel軟件處理。

2 結果與分析

2.1 3種中草藥植物的多酚含量

以吸光度x為橫坐標，總酚質(zhì)量濃度y為縱坐標建立標準曲線，曲線回歸方程分別為：荷葉，y= 0.013 7x+ 0.018 9，R2= 0.990 3；枳實，y= 0.017 7x+ 0.006 3，R2= 0.998 1；水皂角，y= 0.021 1x+ 0.024 4，R2= 0.996 1。

用Folin-Ciocalteu比色法分別對荷葉、枳實和水皂角樣品進行多酚定量，結果表明，枳實的多酚含量最高，為（462.5±19.28） mg/g，其次是荷葉與水皂角，含量分別為（293.8±78.57）和（270.3±28.53） mg/g。

2.2 DPPH自由基清除能力評估

對3種樣品進行DPPH自由基清除能力測定，標準曲線回歸方程分別為：荷葉，y=－0.035 6x+ 0.394 4，R2= 0.990 3；枳實，y=－0.032x+ 0.374 7，R2= 0.992 3；水皂角，y=－0.034x+ 0.381 8，R2= 0.990 3。

分別對荷葉、枳實和水皂角提取物進行清除自由基能力測定，結果表明，清除DPPH自由基能力最強的是水皂角提取物，其次是荷葉和枳實提取物，IC50值分別為（0.021±0.003）、（0.037±0.007） 和（0.061±0.010 ） mg/mL。

以上結果表明，3種中草藥提取物中多酚含量最高的是枳實，水皂角最低，而清除DPPH自由基能力最強的是水皂角，最弱的則是枳實，說明3種中草藥抗氧化能力的強弱與其總酚含量并不呈正相關，推測水皂角中可能含有抗氧化更強的酚類化合物或其他物質(zhì)。

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英文編輯：易來賓