北京市藥品審評(píng)中心（100053）馮欣 劉鶴 田曉娟 周宏 佟利家

生物治療藥（RBP）在治療危及生命的疾病和慢性疾病方面具有顯著的療效，但其成本通常很高，從而限制了病人對(duì)其的使用，特別是在發(fā)展中國(guó)家。最近，第一批主要的原研生物治療藥的專利或數(shù)據(jù)保護(hù)到期，對(duì)這些藥物的仿制將進(jìn)入一個(gè)新的時(shí)期。對(duì)仿制原研生物治療藥得到的這些制品，不同地區(qū)及機(jī)構(gòu)組織有不同的描述，如EMEA稱為生物相似物、FDA稱為后續(xù)蛋白制品、Canada稱為后入生物制品。本文暫且稱為生物相似物（SBP）。

1 生物相似物與生物治療藥的區(qū)別

SBP之所以不能稱為仿制藥，與化學(xué)藥品的仿制藥的區(qū)別在于RBP本身的特殊性。其中包括分子量大小、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性、分子相互作用的立體特異性。SBP與原研RBP的生產(chǎn)工藝不同也難以完全仿制。但RBP的臨床使用和已確定的安全性有助于生物相似物的發(fā)展。在大多數(shù)國(guó)家，仿制藥的監(jiān)管框架已建立。由仿制藥和原研藥之間結(jié)構(gòu)一致和生物等效性，通常就可以判斷療效等效。但該方式不適用于SBP的批準(zhǔn)，因?yàn)镽BP通常有相對(duì)復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，而且SBP的生產(chǎn)和質(zhì)量控制是依據(jù)其自身的研發(fā)程序，通常情況下不能獲得原研藥的信息。即使是生產(chǎn)工藝上微小的差別都可能對(duì)產(chǎn)品的藥代動(dòng)力學(xué)、藥效動(dòng)力學(xué)、有效性和安全性產(chǎn)生影響。因此，目前依托生物等效性研究的仿制準(zhǔn)入模式不能科學(xué)地適用于SBP。

2 生物相似物的評(píng)價(jià)

作為確保RBP的全球質(zhì)量、安全和有效性要求的一部分，世界衛(wèi)生組織（WHO）制定了全球范圍內(nèi)認(rèn)可的規(guī)范和標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用于這些制品的評(píng)價(jià)[1]。在生物標(biāo)準(zhǔn)化專家委員會(huì)（ECBS）上制定的書面標(biāo)準(zhǔn)，可作為制定生物醫(yī)藥產(chǎn)品的生產(chǎn)、質(zhì)量控制及綜合監(jiān)管的國(guó)家規(guī)定的基礎(chǔ)。生物相似物的范圍在不斷擴(kuò)大，許多國(guó)家正在進(jìn)行研制或已許可。2007年，WHO 正式確認(rèn)需要對(duì)SBP評(píng)價(jià)和綜合監(jiān)管的指導(dǎo)原則。2009年，WHO 生物標(biāo)準(zhǔn)化專家委員會(huì)第60次會(huì)議上通過，對(duì)SBP的評(píng)價(jià)指導(dǎo)原則在WHO技術(shù)報(bào)告叢書中發(fā)表[2]。該指導(dǎo)原則適用于已完善和已表征的RBP，例如重組DNA衍生治療蛋白。疫苗、血漿衍生制品及重組類似物不在該原則內(nèi)。該指導(dǎo)原則是為了SBP的許可提供全球認(rèn)可的原則，可以作為各國(guó)監(jiān)管機(jī)構(gòu)建立生物相似物的許可的框架基礎(chǔ)。

3 生物相似物的研發(fā)程序

與所有藥物的研發(fā)程序是一樣的，SBP的研發(fā)是分階段進(jìn)行的，首先是進(jìn)行其生產(chǎn)工藝研究，然后進(jìn)行全面的質(zhì)量研究，而后進(jìn)行非臨床和臨床研究。全面的SBP與RBP的比較研究，可以簡(jiǎn)化非臨床和臨床研究，RBP的非臨床和臨床研究數(shù)據(jù)也可以用于支持生物相似物的安全性和有效性。筆者從藥學(xué)研究方面簡(jiǎn)單地介紹一下該指導(dǎo)原則：

3.1 SBP的生產(chǎn)工藝研究資料需要提供生產(chǎn)工藝相關(guān)的整套數(shù)據(jù)，包括表達(dá)載體、細(xì)胞庫、細(xì)胞培養(yǎng)、發(fā)酵、收獲、純化、修飾、灌裝及穩(wěn)定性考察資料。SBP的生產(chǎn)工藝應(yīng)與RBP的標(biāo)準(zhǔn)保持一致，應(yīng)優(yōu)化生產(chǎn)工藝，使SBP與RBP的差異最小化，這樣可以最大程度的降低SBP的臨床程序和最大程度降低對(duì)臨床安全性和有效性的影響。如果有證據(jù)表明某種差異對(duì)特定的臨床效果無影響，這種差異是可以預(yù)期和接受的?？梢岳斫忾_發(fā)SBP的生產(chǎn)企業(yè)不能獲得RBP的生產(chǎn)工藝的細(xì)節(jié)，因此在生產(chǎn)工藝上會(huì)有差異，除非與RBP的生產(chǎn)企業(yè)有合同約定。

3.2 應(yīng)用適當(dāng)?shù)纳⑸砗蜕飳W(xué)分析方法對(duì)RBP和SBP進(jìn)行全面的質(zhì)量研究。應(yīng)對(duì)活性成分的初級(jí)和高級(jí)結(jié)構(gòu)、翻譯后修飾、生物學(xué)活性、純度、雜質(zhì)、產(chǎn)品相關(guān)活性物質(zhì)和相關(guān)免疫學(xué)特性提供詳細(xì)的資料。當(dāng)進(jìn)行RBP和SBP可比性研究時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)差異，應(yīng)評(píng)估其對(duì)于安全性和有效性的潛在影響。這要考慮到RBP的質(zhì)量特性和臨床效果的相關(guān)性，RBP的臨床使用以及批間差異。生物學(xué)活性測(cè)定是對(duì)蛋白功能特性劑型的測(cè)定，可以判斷某種突變體是否有活性（產(chǎn)品相關(guān)成分）還是失活（定義為雜質(zhì)），是通過理化方法確定高級(jí)結(jié)構(gòu)的補(bǔ)充。因此，具有一定精密度和準(zhǔn)確度的相關(guān)生物學(xué)測(cè)定方法對(duì)于確定SBP與RBP的無顯著功能差異具有重要意義。對(duì)于多重生物學(xué)活性的產(chǎn)品，應(yīng)對(duì)活性進(jìn)行一系列相關(guān)功能性測(cè)定，以作為產(chǎn)品鑒別的一部分。如果有適當(dāng)?shù)膰?guó)際或者國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品/參考品，活性測(cè)定應(yīng)依據(jù)這些標(biāo)準(zhǔn)品或者參考品。國(guó)際或者國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品和參考品可以用于效價(jià)測(cè)定并以IU或U為單位。在可比性研究中，不能作為RBP使用。因?yàn)椴荒塬@得RBP生產(chǎn)過程中所必要的信息，所以評(píng)價(jià)SBP與RBP雜質(zhì)分布圖是很困難的，生產(chǎn)工藝不同，生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的雜質(zhì)不同。如果有明顯差異，則要評(píng)價(jià)其對(duì)安全性、療效及免疫原性的潛在影響。對(duì)生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的雜質(zhì)檢查是極為必要的，特別是生產(chǎn)用的細(xì)胞株。免疫學(xué)特性應(yīng)證明SBP與RBP在特異性、親和力、受體結(jié)合動(dòng)力學(xué)和相關(guān)的Fc的功能活性方面的可比性。

3.3 全面的質(zhì)量研究后制定詳細(xì)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。SBP的分析方法和每個(gè)試驗(yàn)參數(shù)的范圍都要給出參考并進(jìn)行驗(yàn)證。應(yīng)根據(jù)大量批次的SBP來確定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。因?yàn)樯a(chǎn)過程不同，SBP與RBP的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)也不同。應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)流程，通過測(cè)定和對(duì)比SBP與RBP的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。SBP的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)可以控制RBP重要的質(zhì)量特性（如鑒別、純度、效價(jià)；如有相關(guān)性，需要關(guān)注其顆粒大小、電荷分布、疏水性等方面的分子不均一性；唾液酸化的程度；多肽鏈的數(shù)目；功能區(qū)的糖基化；聚合程度；宿主細(xì)胞蛋白和DNA殘量）。生產(chǎn)企業(yè)需要證明質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中不能存在限度的設(shè)定明顯超出RBP的變異性范圍，除非已經(jīng)過驗(yàn)證。

3.4 穩(wěn)定性研究應(yīng)根據(jù)各國(guó)的藥品監(jiān)督管理機(jī)構(gòu)的相關(guān)指導(dǎo)原則來進(jìn)行。應(yīng)有研究證明哪些檢定方法是與產(chǎn)品穩(wěn)定性相關(guān)的。穩(wěn)定性分為包括加速和長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)。加速穩(wěn)定性試驗(yàn)中應(yīng)研究不同條件下（溫度、濕度、光線、機(jī)械攪拌）的穩(wěn)定性。加速穩(wěn)定性試驗(yàn)可以顯示產(chǎn)品的隱藏特性，增加評(píng)價(jià)的依據(jù)，對(duì)于鑒別蛋白產(chǎn)品的降解途徑也是很重要的，可以提示在生產(chǎn)及運(yùn)輸保存過程中要進(jìn)行的附加控制以確保產(chǎn)品的安全性。加速穩(wěn)定性是RBP與SBP可比性研究的重要組成部分，通過研究降解特點(diǎn)來判斷產(chǎn)品的相似性，這部分?jǐn)?shù)據(jù)應(yīng)體現(xiàn)在申報(bào)資料中。穩(wěn)定性數(shù)據(jù)應(yīng)支持成品、原液的儲(chǔ)存、運(yùn)輸條件及有效期，以及顯著改變保存時(shí)間的保存媒介。穩(wěn)定性試驗(yàn)所使用的直接接觸藥品的內(nèi)包材及容器應(yīng)與實(shí)際使用的一致。時(shí)間、溫度的穩(wěn)定性試驗(yàn)將決定產(chǎn)品的保存條件和有效期，這些有可能和RBP一樣，也可能有所不同。

我國(guó)2007年版本的《藥品注冊(cè)管理辦法》對(duì)治療用生物制品的管理有詳細(xì)規(guī)定，其中第15類已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的生物制品，是按照新藥程序來申報(bào)的。我國(guó)對(duì)重組生物制品有一系列的技術(shù)指導(dǎo)原則，但針對(duì)SBP還未制定相應(yīng)的技術(shù)指導(dǎo)原則。