中藥研發(fā)及審報時應(yīng)注意的問題

段文龍

（中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，北京海淀 100081）

一、近年新獸藥注冊概況

見表1、表2。

二、中藥研發(fā)的策略（準(zhǔn)備階段）

1.隨時了解獸藥、藥品（中藥）及與新藥研究相關(guān)的包括藥味篩選、工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、藥理毒理、臨床療效研究、判定的新動態(tài)。

2.主動了解國家藥品（中藥）、獸藥管理形式、政策。

3.深入研究藥品（中藥）、中獸藥注冊技術(shù)指導(dǎo)原則；如果已申報過的企業(yè)要特別注意評審意見。這些技術(shù)原則集中了中藥專家集體智慧的結(jié)晶，對中獸藥研發(fā)具有指導(dǎo)意義。

4.結(jié)合本身實(shí)際（人員、設(shè)施、設(shè)備），開發(fā)適合自己產(chǎn)品。

表1 2005-2010年我國新獸藥的注冊情況

表2 2005-2010年我國新獸藥的審查情況

5.擬研發(fā)產(chǎn)品相關(guān)資料的準(zhǔn)備（文獻(xiàn)），包括“病”的現(xiàn)代診斷指標(biāo)、“證”的分類、“療效”的判定指標(biāo)、與“病”“證”相關(guān)的動物模型方法、擬定處方藥味的藥理與標(biāo)準(zhǔn)研究（單味及相似處方）、攻毒毒株特性如支氣管炎。

三、中獸藥研發(fā)時應(yīng)注意問題

（一）處方篩選

1.藥材基源。不僅是獸藥典收載，且應(yīng)標(biāo)示具體種屬、產(chǎn)地、部位，因?yàn)檫@些有可能導(dǎo)致臨床療效不一致。初次篩選時應(yīng)注意選擇藥材級較高的、文獻(xiàn)報道與所治療疾病相近的品種，處方確定后再進(jìn)行相關(guān)種屬、產(chǎn)地、采收季節(jié)、部位全面研究（成本、實(shí)際生產(chǎn)）。

2.炮制品確定。一般先選文獻(xiàn)報道與所治療疾病相近的炮制品進(jìn)行藥味篩選研究，確定處方后再選擇其他炮制品進(jìn)行試驗(yàn)（與療效相連）。

3.藥味篩選研究。需結(jié)合藥效試驗(yàn)（病理模型）、靶動物模型，并選擇有代表性指標(biāo)作為判斷標(biāo)準(zhǔn)。

■ 選藥入方原則：（1）因證入藥；（2）因病入藥；（3）前瞻性入藥；（4）因動物、因時、因地制宜入藥；（5）因藥入藥；（6）要符合中藥組方理論基礎(chǔ)；（7）符合配伍關(guān)系。

4.制劑處方篩選。包括單因素比較法、正交設(shè)計、均勻設(shè)計或其它，在輔料性質(zhì)及其篩選方面，注意改劑型配比時要與原處方一致。

（二）生產(chǎn)工藝中應(yīng)注意的問題生產(chǎn)工藝包括前處理（鑒定與檢驗(yàn)、凈制、粉碎）、提取、純化、濃縮、干燥和制劑技術(shù)、中試等。應(yīng)注意工藝合理性、工藝參數(shù)。

1.前處理（粉碎）。注意粉碎粒度與粉碎的技術(shù)參數(shù)，如出粉率、溫度（揮發(fā)油）、粉碎方法（糖或膠質(zhì)高柔軟），微粉質(zhì)控與提取一致。

2.提取工藝。在選擇提取工藝時要考慮：（1）藥材粒度；（2）是否浸泡和浸泡時間；（3）采用分煎或者合煎；（4）提取方法，比如煎煮或回流工藝中提取溶媒與用量（包括溶媒濃度、加水量）、提取次數(shù)、提取時間、提取溫度等；滲漏工藝中滲漏溶媒（包括溶媒濃度）、溶媒用量或滲漏液收集量、溫度；水解工藝中溶媒種類、酸堿種類、用量（pH值）、水解時間、水解溫度；（正交試驗(yàn)）（5）過濾方法：一般過濾（不同方法、不同濾材等）、超濾、離心過濾、靜置過濾、低溫沉淀后過濾或其他過濾方法。

評價指標(biāo)要科學(xué)、客觀、可量化及合理：如轉(zhuǎn)移率、浸出物、成分含量、生物學(xué)或藥效指標(biāo)應(yīng)視文獻(xiàn)報道或具體情況而定。

動態(tài)回流提取、常溫超高壓、超聲波、微波輔助、酶法、分子蒸餾、超臨界萃取、大孔吸附樹脂、膜分離、澄清技術(shù)、分子印跡等提取技術(shù)應(yīng)用。

特別注意：提取物質(zhì)基礎(chǔ)（黃酮、生物堿、多糖）的一致性和質(zhì)量特征的重現(xiàn)性（指紋圖譜）。部位提取的方法與文獻(xiàn)一致。

3.純化。純化時應(yīng)考慮劑型與服用量、有效成分與去除成分性質(zhì)、后續(xù)制劑成型工藝需要、生產(chǎn)的可行性等。方法如醇沉濃度、醇與包衣溶劑影響。應(yīng)注意醇沉濃度、用量、試驗(yàn)依據(jù)。

■ 注意事項(xiàng)：醇沉工藝中醇的加入濃度、用量、醇沉后的含醇量及其與后制劑工藝（包衣）的影響；水沉工藝中水沉的加水量；柱分離工藝中分離介質(zhì)種類、用量、徑高比，洗脫溶媒種類、用量、流速、上樣量等；萃取純化中萃取溶媒、溶媒量、萃取次數(shù)。

4.濃縮、干燥。首先是方法的確定如離心、沉淀、柱分離，噴霧、流床、常壓或減壓，其次是考察指標(biāo)如相對密度、含水量、含量測定。要特別注意溶媒的回收。

5.制劑。（1）輔料品種、數(shù)量及與制劑的適宜性；（2）濕法或干法制粒（制備技術(shù)）；（3）細(xì)料藥、貴重藥、毒性藥混合的特殊要求（非直接混合，配研法）；（4）液體制劑加入防腐劑的濃度或用量試驗(yàn)依據(jù)；（5）提取物配制方法：溶解、溶媒；（6）pH值，酸性對藥物療效的影響（抗病毒）。

6.中試。（1）中試與實(shí)驗(yàn)室工藝、參數(shù)的一致性；（2）評價指標(biāo)與藥典同類劑型項(xiàng)目的一致性；（3）中試研究規(guī)模、批次、中試場地、設(shè)備等內(nèi)容的一致性（檢測報告、試驗(yàn)場所），注意批號、投料量、半成品量、輔料量、成品量、成品率、可測成分轉(zhuǎn)移率、半成品、成品的質(zhì)量控制和檢測數(shù)據(jù)等。

■ 注意事項(xiàng)：實(shí)驗(yàn)室、中試工藝的重現(xiàn)性。

（三）質(zhì)控研究與標(biāo)準(zhǔn)制定時應(yīng)注意的問題質(zhì)控研究應(yīng)保證中藥新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)所設(shè)定的質(zhì)量指標(biāo)和檢驗(yàn)項(xiàng)目科學(xué)、合理，具有專屬性、可操作性和可重現(xiàn)性。對照藥材、對照品同時或選一。

1.根據(jù)設(shè)計的劑型參照藥典項(xiàng)目進(jìn)行檢測指標(biāo)的研究，但不局限藥典項(xiàng)目，應(yīng)根據(jù)自身制劑制定出相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)。

2.有粉末特性的要進(jìn)行所有藥味顯微鑒別特征研究制定。注意處方中顯微鑒別特征相同者的區(qū)別，專屬易鑒別。

3.現(xiàn)代提取工藝或微粉的進(jìn)行處方中所有藥味薄層鑒別研究。注意：（1）鑒別方法選擇依據(jù)（文獻(xiàn)報道、國標(biāo)獸藥標(biāo)準(zhǔn)），如吸附劑、展開劑、顯色劑選定；（2）陰性對照試驗(yàn)；（3）取樣量、提取方法、檢視方法與藥典或文獻(xiàn)中藥味相一致，不一致應(yīng)試驗(yàn)說明之區(qū)別；（4）供試品與對照品溶液濃度、點(diǎn)樣量基本匹配（半定量）；（5）對照藥材制備方法與制法工藝應(yīng)一致（物質(zhì)基礎(chǔ)）；（6）藥味未鑒別出時，還應(yīng)注明展開劑及其比例調(diào)整的試驗(yàn)數(shù)據(jù)；（7）有對照品，則盡量將對照藥材、對照品同時對照；（8）彩色圖譜顏色、斑點(diǎn)大小、位置對應(yīng)。

4.含量測定。包括君藥、臣藥、貴重藥、毒性藥（上下限）的多組分含量測定。應(yīng)注意的問題包括：（1）未選擇處方中君、臣藥進(jìn)行，而選擇佐、使藥，非主藥、貴重藥；（2）含量測定取樣量未在方法學(xué)考察線性范圍內(nèi)；回收率試驗(yàn)未按照規(guī)定方法進(jìn)行；含測樣品與對照品取樣量、方法學(xué)研究圖譜應(yīng)一致；（3）含量限度應(yīng)進(jìn)行至少10批實(shí)驗(yàn)室或中試樣品（確定工藝制備）檢測結(jié)果；（4）對照品批號、類別（薄層、含測）、來源、賦值；新對照藥材、對照品要注明鑒定、純化方法、含測結(jié)果與賦值方法，對照品含測方法與樣品一致（黃芪多糖紫外、液相，相對保留時間一致）；（5）注明氣相液相、指紋圖譜、氣質(zhì)、液質(zhì)等檢測技術(shù)應(yīng)用。

此外還應(yīng)注意提取工藝與質(zhì)控標(biāo)的準(zhǔn)相關(guān)性（檢測項(xiàng)目、提取的物質(zhì)基礎(chǔ)相關(guān)性），新方法與傳統(tǒng)工藝比較優(yōu)勢、數(shù)據(jù)。

（四）穩(wěn)定性試驗(yàn)中（加速試驗(yàn)、長期試驗(yàn)）應(yīng)注意的問題

1.取樣時間間隔、考察時限與規(guī)范一致性。

2.考察項(xiàng)目（關(guān)鍵）與藥典、制定標(biāo)準(zhǔn)一致性。

3.做試驗(yàn)圖譜收集，且日期相應(yīng)。

（五）藥理毒理試驗(yàn)中應(yīng)注意的問題

1.實(shí)驗(yàn)資質(zhì)單位（特毒、藥代、漁藥）。

2.試驗(yàn)設(shè)計合理（指導(dǎo)原則）。

3.觀察指標(biāo)符合文獻(xiàn)、指導(dǎo)原則以及現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究一致性。

4.注意病理圖片的放大倍數(shù)、染色方法及特征性的病理變化等。

5.試驗(yàn)結(jié)果與文獻(xiàn)報道一致。

■ 特別注意：（1）藥效模型與文獻(xiàn)報道、人醫(yī)模型一致性；（2）注明新建模型原理、成功比例（檢測指標(biāo)合理性）；（3）藥效試驗(yàn)與臨床療效、處方篩選方法的一致性。

（六）臨床試驗(yàn)

1.選擇符合資質(zhì)的試驗(yàn)單位。

2.實(shí)驗(yàn)設(shè)計方案經(jīng)過省級獸醫(yī)行政審批。

3.臨床試驗(yàn)與試驗(yàn)方案一致性。

4.高中低劑量確定原則應(yīng)有預(yù)試驗(yàn)。

5.注明受試藥物、對照藥物的批號、給藥途徑、用法用量，且檢驗(yàn)合格。

6.給藥方式與劑型、藥效試驗(yàn)、藥味篩選試驗(yàn)相一致。

7.用法用量與藥味物篩選、藥效試驗(yàn)一致性（藥味、配比）。

8.注明試驗(yàn)起止日期和試驗(yàn)地點(diǎn)。

9.人工發(fā)病。（1）陽性對照菌毒種應(yīng)為國家標(biāo)準(zhǔn)或認(rèn)可的鑒定機(jī)構(gòu)鑒定；（2）攻毒方式與菌種相一致性；（3）發(fā)病動物表現(xiàn)或癥狀與菌毒種特相性一致。

10.自然病例收集符合常理。

12.試驗(yàn)動物來源、背景清晰。

13.診斷標(biāo)準(zhǔn)。包括臨床診斷或辨證以及必要的病例剖檢、生理生化指標(biāo)檢測、血清學(xué)、病原學(xué)診斷等數(shù)據(jù)。

14.給藥方案。劑量、劑型、途徑、間隔時間、療程與推薦給藥相同一致。

15.臨床設(shè)組。包括名稱、含量規(guī)格、批號、生產(chǎn)企業(yè)及標(biāo)準(zhǔn)推薦使用的用法用量等要與規(guī)范一致。

16.對照藥物選擇須已批準(zhǔn)且用途、治療病癥與審報藥物一致。

17.判定標(biāo)準(zhǔn)要有指標(biāo)，指標(biāo)設(shè)置要科學(xué)客觀可行，數(shù)據(jù)記錄準(zhǔn)確，數(shù)據(jù)處理合理合規(guī)，結(jié)果與文獻(xiàn)一致。

18.中藥“證”與“癥”結(jié)合，應(yīng)一一對應(yīng)。

19.療效定位。

（七）包材試驗(yàn)中注意的問題包材應(yīng)與制劑進(jìn)行了相容性、密封性試驗(yàn)研究；包材來源符合規(guī)定（GMP、批準(zhǔn)生產(chǎn)）；與文獻(xiàn)報道一致。

特別注意：處方、工藝研究、藥理藥效、臨床試驗(yàn)之間研究結(jié)果的一致性；與文獻(xiàn)報道的一致性。

四、中獸藥研發(fā)的方向

1.原料藥開發(fā)。主要包括有效成分（占提取物90%，殘留）、部位（占總提取物50%以上）篩選，中藥提取成分結(jié)構(gòu)改造，有效成分合成。

2.新制劑開發(fā)。包括新處方、輔料改變、提取物配制(配方顆粒、與處方療效相關(guān)有效部位提取)、復(fù)方提取、療效確切人藥轉(zhuǎn)獸藥。

■ 組方模式：以病癥為邏輯依據(jù)組方、古方加減化裁組方、西醫(yī)辨病與中醫(yī)辨證相結(jié)合組方、功能藥群組方、中西醫(yī)結(jié)合理念組方、現(xiàn)代藥理研究結(jié)果為依據(jù)組方。

3.優(yōu)良中藥處方二次開發(fā)。

前提：中藥材資源標(biāo)準(zhǔn)化、中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究、中藥生產(chǎn)工藝研究。

（1）新劑型開發(fā)：長效、緩釋；（2）原劑型改進(jìn)：散改口服、顆粒；（3）處方取舍：對稀貴、有毒、難溶于水及其拮抗、削弱藥效藥味進(jìn)行刪減；（4）工藝改進(jìn)，標(biāo)準(zhǔn)提高：原料基源選擇、新技術(shù)工藝、原提取工藝優(yōu)化。如：揮發(fā)油包衣、微粒、飲水劑（增溶）、按用法選擇工藝提取等。

■ 中獸藥“質(zhì)的改變”：影響體內(nèi)吸收（微粉、散劑改口服）、傳統(tǒng)工藝如粉碎改提取制劑（物質(zhì)基礎(chǔ)有變化）。

面臨的技術(shù)問題：工藝與質(zhì)控指標(biāo)的銜接；原料的多樣性和藥物成分的復(fù)雜性；藥材處理工藝與劑型的適應(yīng)性問題；設(shè)備、制備技術(shù)以及標(biāo)準(zhǔn)指標(biāo)設(shè)定（防仿制）。