申圭良

（湖南農(nóng)業(yè)雜志社，湖南 長沙 410005）

害螨在棉花、果蔬等經(jīng)濟(jì)作物上均常年發(fā)生，通常造成12%～20%的產(chǎn)量損失，嚴(yán)重時(shí)超過25%，同時(shí)影響農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量，是主要農(nóng)作物生物災(zāi)害之一。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國螨類危害需防治的面積近千萬公頃。

我國長期使用化學(xué)農(nóng)藥防治害螨，但藥劑的品種和數(shù)量上均顯不足，且因殘留、污染環(huán)境等原因，現(xiàn)有的部分化學(xué)殺螨劑受到限制或被禁止使用。此外，螨類繁殖快，對(duì)化學(xué)農(nóng)藥易產(chǎn)生抗性，導(dǎo)致藥劑的使用濃度越來越高。因此，研究開發(fā)和推廣高效、低殘留、不污染環(huán)境的新型殺螨劑，配合發(fā)展“無公害農(nóng)產(chǎn)品”，是發(fā)展無公害農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)的緊迫任務(wù)。瀏陽霉素是從土壤中的灰色鏈霉菌瀏陽變種在發(fā)酵過程中提煉出來的殺螨活性物質(zhì)。本文通過瀏陽霉素對(duì)柑橘全爪螨及棉二斑葉螨的室內(nèi)毒力測定與田間防效的研究，為其在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)實(shí)踐中的應(yīng)用提供了理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 供試螨

供試螨為柑橘全爪螨和棉二斑葉螨，分別采集于湖南省農(nóng)科院園藝所柑桔園和湖南農(nóng)大試驗(yàn)場的棉花地，置于室內(nèi)以豇豆苗進(jìn)行連續(xù)飼養(yǎng)，室內(nèi)相對(duì)濕度70%～80%，溫度28℃。按試驗(yàn)需要提供卵和各齡期幼蟲。

1.2 瀏陽霉素對(duì)柑橘全爪螨和棉二斑葉螨的室內(nèi)毒力測定

1.2.1 對(duì)螨卵的毒力測定 參考Melody（1991）的浸葉碟法（Leaf disk dip method）[1]。采集平整的柑桔和棉花葉片，凈化后剪成2 cm×2 cm小方塊，葉面朝下貼在水隔離飼養(yǎng)臺(tái)上，每塊葉片挑接二斑葉螨雌成螨20～30頭，置于27℃下產(chǎn)卵12 h，然后去掉雌成螨，檢查記錄卵數(shù)，每一濃度處理4塊葉片，共計(jì)卵數(shù)在100粒以上，卵齡在36～48 h進(jìn)行測定（卵齡不同，對(duì)藥劑的敏感程度有差異）。將帶卵的葉片分別浸入各處理的藥液中，輕輕搖動(dòng)，5 s取出,然后放在吸水紙上晾干，再放回水隔離飼養(yǎng)臺(tái)上，待對(duì)照組卵孵化并發(fā)育至若螨階段，統(tǒng)計(jì)各處理死亡率，再用Abbott公式求得校正死亡率。

1.2.2 對(duì)螨趨避活性測定 參照張鐘寧等（1993）[4]的方法，用去離子水+丙酮（80+20）溶液分別對(duì)原藥稀釋為4個(gè)濃度。將供試樣品作為處理液，涂在洗凈吸干水分后的葉片正反面沿葉中脈的一側(cè)，另一側(cè)涂溶劑做對(duì)照。待藥液干后接種螨蟲20頭，分別于12、24和36 h檢查葉中脈兩側(cè)螨蟲棲息數(shù)目，棲于葉中脈的螨蟲不計(jì)算在內(nèi)。共設(shè)3次重復(fù)。

1.2.3 對(duì)雌成螨的毒力測定 參照FAO1980推薦的玻片浸漬法（Slide dip method）[3]，將雙面膠帶剪成二三厘米長，貼在顯微鏡載玻片的一端，用鑷子揭去粘膠上的紙片，用零號(hào)毛筆挑取大小一致、個(gè)體鮮艷、行動(dòng)活潑的雌成螨，將其背部粘在雙面膠帶上(注意：不要粘住螨足、螨須和口器)，每塊載片粘25頭，每個(gè)濃度處理5片，共計(jì)100頭螨。將粘有雌成螨的玻片放在干凈的大培養(yǎng)皿內(nèi)，皿中鋪一層濕濾紙并放一濕棉球，加蓋玻璃板，置于27℃下經(jīng)4 h后鏡檢，如有死亡個(gè)體則補(bǔ)粘活螨后再進(jìn)行測定。在預(yù)試的基礎(chǔ)上將藥劑用去離子水+丙酮（80+20）溶液[9]稀釋為4個(gè)濃度，把帶螨玻片一端浸入藥液中，輕輕搖動(dòng)，5 s后取出，然后小塊濾紙吸干附在螨體周圍和膠帶上的多余藥液，對(duì)照組浸清水。處理后的玻片分別放在上述的大養(yǎng)蟲皿中，在27℃下經(jīng)12、24 h后，利用雙目解剖鏡檢查結(jié)果，檢查時(shí)，用小毛筆尖輕輕觸及螨體，無反應(yīng)者記為死亡個(gè)體。

1.2.4 數(shù)據(jù)處理及有關(guān)的統(tǒng)計(jì)和計(jì)算公式 按Abbott公式計(jì)算校正死亡率。將藥劑處理劑量對(duì)數(shù)值作為X，校正死亡率幾率值（查幾率值表）為Y，利用Excel軟件進(jìn)行數(shù)值回歸，求其直線毒力回歸方程及LC50（致死中濃度），并進(jìn)行差異顯著性分析；用SAS軟件進(jìn)行分析，求其95%的置信區(qū)間。

1.3 田間藥效試驗(yàn)

按農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)規(guī)定，選取具有代表性的2塊柑橘園和2塊棉田作為試驗(yàn)場所。將瀏陽霉素原藥配制成10%乳油，以使試驗(yàn)時(shí)施藥均勻。試驗(yàn)設(shè)計(jì)10% 瀏陽霉素乳油用 20、30、40 mL/667m2，以15%達(dá)螨靈乳油用15 mL/667m2為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照，噴清水為空白對(duì)照，共5個(gè)處理，每個(gè)處理4個(gè)重復(fù)，20個(gè)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)50 m2，隨機(jī)排列。施藥方式采用工農(nóng)16型背負(fù)式手動(dòng)噴霧器噴霧，噴灑均勻。每處理小區(qū)5點(diǎn)取樣，每點(diǎn)查5片葉，共固定調(diào)查25張有螨葉片。藥前調(diào)查蟲口和螨卵基數(shù)，藥后1、3、7、10 d各調(diào)查1次殘存活螨數(shù)和螨卵孵化數(shù)，計(jì)算蟲口減退率和校正防效，并進(jìn)行顯著性測定，比較其效果。

表1 瀏陽霉素對(duì)柑橘全爪螨和棉二斑葉螨的室內(nèi)毒力測定

2 結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)毒力測定

2.1.1 瀏陽霉素對(duì)螨卵的毒力 瀏陽霉素殺卵效果見表1。由表1可知：瀏陽霉素2.00、1.00、0.75、0.50、0.25 mg/L對(duì)柑橘全爪螨殺卵的校正防治效果分別為25.1%、18.4%、9.1%、9.8%和4.6%；對(duì)棉二斑葉螨殺卵的校正防治效果分別為13.4%、7.1%、7.2%、1.4%和1.4%。這表明，瀏陽霉素高濃度（2 mg/L）對(duì)柑橘全爪螨和棉二斑葉螨的螨卵有一定的殺傷力，而低濃度對(duì)螨卵無影響。

2.1.2 瀏陽霉素對(duì)螨趨避的活性 結(jié)果見表2。經(jīng)SPSS統(tǒng)計(jì)軟件分析，回歸與相關(guān)結(jié)果表明，處理濃度與處理效果具有非常顯著的相關(guān)性。對(duì)柑橘全爪螨，相關(guān)系數(shù)為0.925～0.986；對(duì)棉二斑葉螨，相關(guān)系數(shù)為0.962～0.989。由表2可知，高濃度瀏陽霉素（2.00 mg/L和1.00 mg/L）在施藥后36 h對(duì)柑橘全爪螨和棉二斑葉螨具有較強(qiáng)的拒食作用，而低濃度（0.25～0.75 mg/L）對(duì)螨的拒食作用較弱。

表2 不同濃度瀏陽霉素對(duì)柑橘全爪螨和棉二斑葉螨的拒食作用

2.1.3 瀏陽霉素對(duì)雌成螨的毒力 試驗(yàn)結(jié)果見表3。經(jīng)SPSS統(tǒng)計(jì)軟件分析，回歸與相關(guān)結(jié)果表明，處理濃度與處理效果具有非常顯著的相關(guān)性，防治效果隨處理濃度的增加而提高。瀏陽霉素2.00、1.00、0.75、0.50、0.25 mg/L對(duì)柑橘全爪螨的校正防治效果分別為93.5%、89.9%、81.9%、71.3%和47.5%，LC50為 0.19，95%置信區(qū)間為 0.13～0.45，回歸方程為 y=0.978 31 x+2.863 7；瀏陽霉素 2.00、1.00、0.75、0.50、0.25 mg/L對(duì)棉二斑葉螨的校正防效分別為87.2%、85.4%、78.9%、52.9%和39.3%,LC50為0.36，95%置信區(qū)間為0.24～0.66，回歸方程為y=1.269 3 x+2.948 1。新復(fù)極差測驗(yàn)結(jié)果表明，在2.00、1.00 mg/L濃度下，該藥劑對(duì)柑橘全爪螨和棉二斑葉螨的校正防治效果差異不顯著；在1.00、0.75、0.50、0.25 mg/L濃度下，平均校正死亡率差異極顯著，詳見表4。

表3 瀏陽霉素對(duì)柑桔全爪螨雌螨的室內(nèi)毒力測定

表4 瀏陽霉素對(duì)棉二斑葉螨雌螨的室內(nèi)毒力測定

2.2 田間藥效試驗(yàn)

試驗(yàn)結(jié)果見表5、表6。10%瀏陽霉素對(duì)柑橘全爪螨和棉二斑葉螨具有較好的防治效果，其中以30～40 mL/667m2的效果最好，處理間的藥效不顯著，藥后1～7 d調(diào)查，柑橘全爪螨和棉二斑葉螨的蟲口減退率分別達(dá) 88.7%～95.0%、92.7%～94.3%，校正防效分別達(dá)87.1%～95.5%、91.9%～94.4%。其效果和標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照15%噠螨靈15 mL/667m2的效果相近（蟲口減退率92.8%～94.7%，校正防效為92.9%～94.6%），差異不顯著。該藥劑20 mL/667m2的效果較差，藥后1～7 d對(duì)柑橘全爪螨和棉二斑葉螨的蟲口減退率分別為68.3%～81.1%、86.7%～89.4%，校正防效分別為71.2%～79.8%、87.8%～88.3%，其效果明顯低于30～40 mL/667m2和標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照15%噠螨靈15 mL/667m2的處理，差異極顯著。

表5 10%瀏陽霉素對(duì)柑橘全爪螨的防治效果

表6 10%瀏陽霉素對(duì)棉二斑葉螨的防治效果

3 討 論

研究結(jié)果表明，瀏陽霉素對(duì)柑橘全爪螨和棉二斑葉螨的LC50分別為0.19 mg/L和0.36 mg/L。用30～40 mL/667m210%瀏陽霉素EC防治柑橘全爪螨和棉二斑葉螨，施藥后1～7 d，防效分別可達(dá)87.1%～95.5%和91.9%～94.4%，這表明瀏陽霉素是一種較好的生物殺蟲劑，在生產(chǎn)上可以大量推廣應(yīng)用。

使用農(nóng)藥防治有害生物是綜合防治中重要手段，不合理的單一使用農(nóng)藥會(huì)造成防治對(duì)象抗藥性的產(chǎn)生、再猖撅出現(xiàn)和對(duì)環(huán)境的污染[5-9]。螨類一年一般發(fā)生數(shù)代，有的甚至10～20代[10]，更易出現(xiàn)上述情況。防治螨類的理想農(nóng)藥應(yīng)具有化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、不易分解、對(duì)作物和人畜安全、殘效期長、殺螨能力強(qiáng)等特點(diǎn)，不但殺成螨，而且對(duì)幼、若螨和卵有強(qiáng)的毒殺作用。

總的來說，瀏陽霉素對(duì)成螨和若螨有較高的防治效果，而對(duì)卵的毒力較低，生產(chǎn)上可考慮與殺卵作用較強(qiáng)的其他農(nóng)藥進(jìn)行復(fù)配或混用。

[1] kunio Ando.Tetranactin,an antibiotic miticide[J].Japan Resticide Information,1980,23（36）:36-40.

[2] 韓永奇，韓晨曦.關(guān)于我國農(nóng)藥的產(chǎn)業(yè)分析與市場觀察[J].農(nóng)藥市場信息，2010，（12）：4-6.

[3] Shi G L,Liu S Q,Cao H,et al.Acaricidal activities of extracts of Stellera chamaejasme against Tetranychus viennensis（Acari:Tetranychidae）[J].J Econ Entomol.,2004,7（6）:1912-1916.

[4] Pan W,Luo P,Fu R,et al.Acaricidal activity against Panonychus citriof a ginkgolic acid from the external seed coat of Ginkgo biloba[J].Pest Manag Sci.,2006,62（3）:283-287.

[5] 陳萬義，王明安.對(duì)我國植物源農(nóng)藥研究中幾個(gè)問題的思考[A].中國植物保護(hù)學(xué)會(huì)農(nóng)藥分會(huì).第二屆全國植物農(nóng)藥暨第六屆藥劑毒理學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C].西安：陜西科學(xué)技術(shù)出版社，2001.

[6] 馬志卿，張 興.植物源殺蟲物質(zhì)的作用特點(diǎn) [J].植物保護(hù)，2000，26（4）：37-40.

[7] 侯學(xué)文，謝建軍.生物技術(shù)在植物性殺蟲劑研究開發(fā)中的應(yīng)用[J].植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2001，28（1）：77-82.

[8] 張忠信，張光裕.害蟲基因防治新動(dòng)向——轉(zhuǎn)基因昆蟲的研究[J].昆蟲知識(shí)，1998，35（1）：5l-55.

[9] 丁錦華，尹楚道，林冠倫，等.農(nóng)業(yè)昆蟲學(xué)[M].南京：江蘇科學(xué)技術(shù)出版社，1991.

[10] 操海群，樂永德，花日茂，等.植物源農(nóng)藥研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2000，27（1）：40-44.

[11] 張采炳.從害蟲綜合防治中談農(nóng)藥發(fā)展 [J].北京農(nóng)業(yè)科學(xué),1981，28（3）：67-69.

[12] 盧 諺，柳 濤.新型生物制劑瀏陽霉素防治棉葉螨效果試驗(yàn)[J].農(nóng)村科技，2008，（1）：28-29.

[13] 胡 蓉，馬永平，徐進(jìn)平，等.AcNPV.Bt.En復(fù)配劑對(duì)甜菜夜娥幼蟲的毒力測定[J].中國生物防治，2002，18（1）：47-49.

[14] Wysoki M.Proceedings of the 20th international entomological conference[Z].Italy,1996.

[15] 向紅瓊，馮志新，羅永俊.Pluerotus ost reatus毒素產(chǎn)生的影響因素及粗毒素的殺線蟲活性[J].中國植物保護(hù)學(xué)會(huì)農(nóng)藥分會(huì)，第二屆全國植物農(nóng)藥暨第六屆藥劑毒理學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C].西安：陜西科學(xué)技術(shù)出版社，2001.

[16] Sujatha M，Chandran K A.Commercially feasible micropropagation method for Melia azedaraeh[J].Journal of Exp Bio，1997，35（7）:789-791.

[17] 劉義明，董幫貴.10%瀏陽霉素防治橙紅蜘蛛藥效試驗(yàn)[J].廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2003，24（3）：78-81.

[18] 孫廣勤，劉 剛.10%瀏陽霉素乳油防治辣椒紅蜘蛛田間藥效試驗(yàn)[J].中國蔬菜，2003，（1）：36-39.

[19] 李紹文.動(dòng)物毒素及其防御作用 [J].生物學(xué)雜志，1990，9（6）：68-77.

[20] 沈立榮，張傳溪，程家安.抗昆蟲蝎毒素及其轉(zhuǎn)基因技術(shù)的研究與應(yīng)用進(jìn)展[J].昆蟲知識(shí)，2001，38（5）：321-325.

[21] 萬樹青.生物農(nóng)藥及其使用技術(shù)[M].北京：金盾出版社，2003.31-32.

[22] 翟鳳艷，郭東峰，劉英杰.我國植物源殺菌劑研究現(xiàn)狀及展望[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，37（8）：120-123.

[23] 段永蘭，侯金麗，邢文會(huì).我國微生物農(nóng)藥的研究與展望[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，（8）：4135-4138.