張志剛, 沈慧敏, 段辛樂, 楊順義, 高新菊

(甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)草業(yè)學(xué)院,草業(yè)生態(tài)系統(tǒng)省部共建教育部重點實驗室,中-美草地畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展中心,蘭州 730070)

二斑葉螨(Tetranychus urticae Koch)是我國北方果區(qū)常發(fā)性害螨之一,它不僅影響果樹當年的產(chǎn)量,而且還可減少果樹花芽的分化,削弱樹勢,影響第2年的產(chǎn)量[1]。由于其寄主廣、食性雜、生長速度快、繁殖率高,給防治帶來了很大困難。二斑葉螨具有較高的內(nèi)稟增長率,抗逆性很強,對多種化學(xué)殺螨劑產(chǎn)生了不同程度的抗藥性[2]。螺螨酯是拜耳作物科學(xué)公司開發(fā)的持效期較長的新型非內(nèi)吸性殺螨劑,其作用機制完全不同于現(xiàn)有的各種殺螨劑[3]。但任何新型農(nóng)藥的使用都不可避免地存在抗藥性的隱患,螺螨酯也不例外。為了延長和保持螺螨酯的使用壽命,開展螨類對螺螨酯抗藥性監(jiān)測研究成為當務(wù)之急。本文通過二斑葉螨對螺螨酯抗性選育和螺螨酯抗性種群對各種常用殺螨劑的交互抗性研究,探討螺螨酯抗性發(fā)展動態(tài),預(yù)測抗藥性產(chǎn)生的速度,及二斑葉螨對螺螨酯與多種常用殺蟲、殺螨劑之間的抗性關(guān)系具有重要的意義,可為果園科學(xué)使用螺螨酯和合理輪換用藥提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

1.1.1 供試螨類

敏感種群(S)：敏感種群2007年6月底采自甘肅蘭州國家級森林公園興隆山,該公園為國家自然保護區(qū),周圍20 km內(nèi)沒有農(nóng)作物,也未施用任何農(nóng)藥。在實驗室內(nèi)采用雌雄單系(一雌一雄在飼養(yǎng)臺上飼養(yǎng))繁殖飼養(yǎng)而成,不接觸任何藥劑。

抗螺螨酯種群(SP-R)：螺螨酯抗性種群從二斑葉螨敏感種群中分出部分,用低濃度(殺死種群60%個體的濃度)螺螨酯(spirodiclofen)在室內(nèi)經(jīng)多代選育成抗藥性種群。

1.1.2 供試藥劑

95.7 %螺螨酯原藥(紅太陽集團有限公司),1.8%阿維菌素乳油(石家莊志誠農(nóng)藥化工有限公司),97.1%甲氰菊酯原藥(紅太陽集團有限公司),50 g/L噻螨酮乳油(日本曹達株式會社);0.2%苦皮藤生物堿乳油(蘭州衛(wèi)康生物有限公司);25 g/L氯氟氰菊酯乳油(成都華西農(nóng)藥有限公司);15%噠螨靈乳油(江蘇蘇化集團新沂農(nóng)化有限公司);16%噠螨?四螨嗪乳油(英國LK作物科學(xué)有限公司);40%氧化樂果乳油(青島堿業(yè)股份有限公司雙收農(nóng)藥分公司);4.5%氯氰菊酯乳油(湖北沙隆達股份有限公司);20%三唑錫乳油(山東招遠三聯(lián)化工廠);15%毒死蜱乳油(華北制藥集團愛諾有限公司);20%三氯殺螨醇乳油(武漢漢南化工有限公司);5%唑螨酯懸浮劑(北京綠色農(nóng)華植保科技有限公司);20%四螨嗪乳油(山東華陽和樂有限公司);20%苯丁錫乳油(山東華陽科技有限公司);34%柴油?噠螨靈乳油(江蘇輝豐農(nóng)華股份有限公司);10%瀏陽霉素乳油(湖南亞華種業(yè)股份有限公司生物藥廠);20%噠?水胺硫磷乳油(山東華陽科技股份有限公司)。

1.2 試驗方法

1.2.1 二斑葉螨抗性種群選育

從采集的敏感種群中分出二斑葉螨部分個體,待擴繁后用螺螨酯處理,通過淘汰選擇培育抗性種群,方法是以螺螨酯殺死二斑葉螨種群60%左右個體的濃度,用微型噴霧器噴霧處理二斑葉螨種群,葉背、葉面以噴霧均勻,但不流失為度。每處理5次進行1次室內(nèi)毒力測定,計算其致死中濃度(LC50),并與敏感種群比較,求出抗性指數(shù)(resistance index,RI)。RI等于抗性種群(R)LC50與敏感種群(S)LC50的比值。RI＜1表示負交互抗性,1＜RI＜5為無交互抗性或無抗性;RI＞5有交互抗性或有抗性[4]。

1.2.2 二斑葉螨室內(nèi)毒力測定

用18種藥劑對室內(nèi)培養(yǎng)的二斑葉螨敏感種群(S)、螺螨酯抗性種群(SP-R)進行室內(nèi)生物測定。測定方法參照FAO[5]推薦的測定害螨抗藥性的標準方法—玻片浸漬法(slide-dip method)。其方法是將雙面膠帶剪成2～3 cm長,貼在載玻片的一端,用鑷子揭去粘膠上的紙片,用零號毛筆挑取大小一致、體色鮮艷、行動活潑的雌成螨,將其背部粘在雙面膠帶上(注意：不要粘住螨足、螨須和口器),每片粘40頭,分成3行。在溫度(25±1)℃,相對濕度為75%的人工氣候箱中放置1 h后,用雙目鏡觀察,剔除死亡和不活潑個體,保留30頭。將藥劑稀釋5～7個濃度,把帶螨載玻片一端浸入藥液中,輕輕搖動,5 s后取出,迅速用吸水紙吸干螨體及周圍多余的藥液,放入直徑為10 cm培養(yǎng)皿中,置于溫度(25±1)℃,相對濕度為75%的人工氣候箱中,24 h后檢查結(jié)果,用毛筆輕觸螨體,以螨足不動者為死亡。每個藥劑濃度設(shè)3次重復(fù),另以蒸餾水作對照。所得數(shù)據(jù)經(jīng)DPS軟件和Excel處理,求出18種殺蟲殺螨劑對二斑葉螨敏感種群(S)、螺螨酯抗性種群(SP-R)的毒力回歸方程式、相關(guān)系數(shù)、LC50和 95%置信限,并用卡方值進行檢驗。

2 結(jié)果與分析

2.1 二斑葉螨對螺螨酯的抗性選育結(jié)果

螺螨酯對二斑葉螨抗性選育結(jié)果(表1)表明：用螺螨酯對二斑葉螨種群處理26代后,其LC50由5.13 μ g/mL上升為 301.78 μ g/mL,抗性指 數(shù)達到58.83。二斑葉螨對螺螨酯的抗性上升分為4個階段：F3～F5,F5～F17,F17～F23和 F23～F26?？剐在?/p>

勢上顯示F3～F23抗性進展呈現(xiàn)快慢交錯上升趨勢,與常規(guī)殺蟲劑抗性發(fā)展有所不同的是,螺螨酯前期抗性培育中,抗性發(fā)展極為緩慢,由于二斑葉螨大量被淘汰,種群恢復(fù)極慢,甚至出現(xiàn)種群滯育現(xiàn)象。這與昆蟲抗藥性前期形成抗性雜合個體,后期形成抗性純合個體有關(guān)[6]。

2.2 二斑葉螨抗螺螨酯種群(SP-R)對18種殺蟲殺螨劑的交互抗性

表2中可看出：二斑葉螨抗螺螨酯種群對甲氰菊酯、氯氰菊酯有輕微的交互抗性,其RI分別為11.54、10.03;而對苯丁錫、四螨嗪、苦皮藤生物堿、阿維菌素、氯氟氰菊酯、噠螨?四螨嗪、噠?水胺硫磷、三唑錫、三氯殺螨醇、噠螨靈、氧化樂果無交互抗性 ;其 RI 分別為 4.95、4.66、4.40、4.23、4.18、3.85、3.55 、2.84 、2.74 、1.59、1.49;對瀏陽霉素、毒死蜱、噻螨酮、柴油?噠螨靈、唑螨酯可能存在負交互抗性 ,其 RI分別為 0.71、0.42、0.37、0.36 、0.23。

表1 二斑葉螨抗螺螨酯種群選育結(jié)果

表2 二斑葉螨抗螺螨酯種群(SP-R)對18種殺蟲殺螨劑交互抗性測定結(jié)果

續(xù)表2

3 結(jié)論與討論

螺螨酯具觸殺作用,無內(nèi)吸性,其具有全新的作用機理,完全不同于現(xiàn)有的各種殺螨劑。主要抑制害螨體內(nèi)的脂肪合成,阻斷能量代謝,對螨的各個發(fā)育階段都有效,尤其對螨卵和幼螨效果好,對雌成螨的繁殖有一定的抑制作用[7]。本試驗對二斑葉螨抗螺螨酯的室內(nèi)選育結(jié)果表明：在抗性種群選育前期,二斑葉螨對螺螨酯抗性前期上升極為緩慢,噴施藥劑濃度梯度過大時,經(jīng)常發(fā)生種群滯育現(xiàn)象。在進一步選育中,抗性種群逐漸穩(wěn)定,到抗性培育后期,種群抗性增長較快。F23～F26代,抗性指數(shù)上升16.05。本試驗中二斑葉螨抗螺螨酯種群對甲氰菊酯、氯氰菊酯表現(xiàn)出一定的交互抗性(RI＞5);對苯丁錫、四螨嗪、苦皮藤生物堿、阿維菌素、氯氟氰菊酯、噠螨?四螨嗪、噠?水胺硫磷、三唑錫、三氯殺螨醇、噠螨靈、氧化樂果無交互抗性(1＜RI＜5);對瀏陽霉素、毒死蜱、噻螨酮、柴油?噠螨靈、唑螨酯具有負交互抗性(RI＜1)。螺螨酯作為一種新型殺螨劑,其殺螨機制獨特,理論上與現(xiàn)有殺螨劑不存在交互抗性,但如果不科學(xué)合理地使用,抗性問題也是不可避免的。為延長其使用壽命和延緩螨類抗藥性的產(chǎn)生,建議將螺螨酯與瀏陽霉素、毒死蜱、噻螨酮、柴油?噠螨靈、唑螨酯、苯丁錫、苦皮藤生物堿、阿維菌素、氯氟氰菊酯、四螨嗪、噠螨?四螨嗪、三唑錫、三氯殺螨醇、噠螨靈等農(nóng)藥交替、混用或輪用,避免與甲氰菊酯、氯氰菊酯等農(nóng)藥混用,一般每個生長季節(jié)最多使用2次,目前有關(guān)害螨對螺螨酯抗性研究未見報道。

[1]北京農(nóng)業(yè)大學(xué).果樹昆蟲學(xué)[M].第2版.北京：農(nóng)業(yè)出版社,1995.

[2]甘麗萍,張新虎.二斑葉螨實驗種群生物學(xué)特性的研究[J].西北農(nóng)業(yè)學(xué)報,2004,13(3)：66-69.

[3]程立生,潘俊杰.幾種殺螨劑對二斑葉螨和朱砂葉螨的毒力測定[J].植物保護,1994,20(4)：18-19.

[4]沈晉良,譚建國,肖斌,等.我國棉鈴蟲對擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的抗性監(jiān)測及預(yù)報[J].昆蟲知識,1991,28(6)：337-340.

[5]FAO.Recommended methods for measurement of pest resistance to pesticides,FAO plant production and protection paper[R].1980：21.

[6]任健,周玉書.二斑葉螨對阿維菌素的抗藥性預(yù)測研究[J].中國農(nóng)學(xué)通報,2006,22(2)：337.

[7]張懷江,仇貴生,閆文濤,等.新型殺螨劑螺螨酯防治蘋果全爪螨藥效試驗[J].中國果樹,2008(3)：41.