胡立志， 李 靜， 張 珮， 桂 卉

(湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙410007)

吳藿降壓滴丸原料藥由淫羊藿提取物和吳茱萸提取物組成，主要用于治療高血壓見(jiàn)有肝寒、濁氣上逆等病證。吳茱萸味苦辛，具有通降之功，能使上逆之氣下行，能夠降肝之濁氣，使肝氣平和而到達(dá)血壓自平。淫羊藿為補(bǔ)陽(yáng)藥，不宜用于陰虛陽(yáng)亢類型的高血壓病，但對(duì)于非陽(yáng)亢類高血壓，適量的配以本品的提取物，利用提取物中黃酮苷類的降壓作用，與吳茱萸一起相須使用，多個(gè)降壓途徑并行，降壓效果更好。經(jīng)提取精制制成滴丸后，有效的降壓成分得到富集，減少了服用量，同時(shí)，又能發(fā)揮滴丸在胃腸道中崩解快、無(wú)溶解過(guò)程、吸收快、生物利用度高的優(yōu)勢(shì)。本試驗(yàn)選用不同的基質(zhì)制成滴丸，以淫羊藿苷為溶出指標(biāo)比較了不同基質(zhì)制得滴丸的體外溶出度，為選擇合適的滴丸基質(zhì)提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

SP-756紫外分光光度計(jì)(上海光譜儀器有限公司);島津AUY120型分析天平;ZRS-8G智能溶出度實(shí)驗(yàn)儀(天津大學(xué)無(wú)線電廠);KQ5200DE型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);淫羊藿苷對(duì)照品(批號(hào)110737-200415)購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所;吳藿降壓滴丸(自制);人工胃液按中國(guó)藥典方法配制，實(shí)驗(yàn)所用其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 吳藿降壓滴丸的制備［1］吳茱萸經(jīng)提取純化，再濃縮干燥得到浸膏后，粉碎，過(guò)100目篩，得吳茱萸浸膏粉，備用;淫羊藿經(jīng)40%乙醇提取過(guò)濾后，過(guò)大孔樹(shù)脂純化處理后，同法干燥，粉碎，得到淫羊藿浸膏粉。將兩種干浸膏粉按一定比例混合后分別用泊洛沙姆-188(Poloxamer-188)、聚乙二醇4000(PEG4000)、聚乙二醇6000(PEG6000)作為基質(zhì)制成滴丸。

2.2 滴丸中淫羊藿苷的定量方法［2-3］

2.2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇 精密稱取淫羊藿苷、不同基質(zhì)制備的吳藿降壓滴丸、不同基質(zhì)制備的空白滴丸適量，用人工胃液稀釋，制成淫羊藿苷對(duì)照品溶液、不同基質(zhì)制備的吳藿降壓滴丸供試品溶液、以及不同基質(zhì)制備的空白滴丸的陰性對(duì)照品溶液。以人工胃液為空白對(duì)照，將上述對(duì)照品溶液及供試品溶液用0.45 μm的微孔濾膜過(guò)濾后，分別在200 nm～400 nm范圍內(nèi)進(jìn)行紫外波長(zhǎng)掃描，結(jié)果對(duì)照品溶液和供試品溶液在270 nm處有最大吸收峰，而陰性對(duì)照品溶液在此無(wú)吸收，且供試品溶液中其他成分對(duì)淫羊藿苷的紫外吸收光譜無(wú)影響，故選擇270 nm為測(cè)定波長(zhǎng)。

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密稱取淫羊藿苷對(duì)照品10mg于量瓶中，加甲醇溶解并定容，配制成質(zhì)量濃度為1 mg/mL的貯備液，再精密量取1 mL于100 mL的量瓶中，用人工胃液定容配制成10mg/L的淫羊藿苷對(duì)照品溶液，分別精密移取對(duì)照品溶液 1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL 于 10 mL 的量瓶中，人工胃液定容后，在2.2.1項(xiàng)條件下測(cè)定吸光度A值。以質(zhì)量濃度(C)為橫坐標(biāo)，吸光度(A)為縱坐標(biāo)，線性回歸，得回歸方程:A=0.0387C+0.0221，r=0.9995，表明在1.0 ～10.0 μg/L 范圍內(nèi)線性良好。

2.2.3 精密度及重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn) 精密吸取淫羊藿苷對(duì)照溶液6份，分別按2.2.1項(xiàng)紫外條件下操作測(cè)定，得RSD=1.56%(n=6)。

2.2.4 回收率實(shí)驗(yàn) 分別取2.2.2項(xiàng)下配得的10 mg/L的淫羊藿苷對(duì)照品溶液適量，加入不同基質(zhì)制備的空白滴丸所制成的供試品溶液，分別按2.2.1項(xiàng)紫外條件下操作測(cè)定吸光度，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程求得藥物濃度，計(jì)算回收率，結(jié)果Poloxamer-188、PEG4000、PEG6000為基質(zhì)制得的吳藿降壓滴丸的回收率分別為 99.9%、97.2%、95.3%，RSD 分別為1.28%、2.24%、2.14%(n=6)。

2.2.5 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取淫羊藿苷對(duì)照品溶液，分別于0、1、2、4、6、8 h 于 270 nm 處測(cè)定吸光度，RSD 為 1.05%(n=6)，表明該溶液在8h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.2.6 吳藿降壓滴丸中淫羊藿苷量分析 精密稱取不同基質(zhì)制備的吳藿降壓滴丸各20粒，計(jì)算平均質(zhì)量，研細(xì)，稱取與平均質(zhì)量相應(yīng)的滴丸分別置于1000 mL量瓶中，加入人工胃液，超聲1h，冷卻至室溫后，人工胃液定容，按2.2.1項(xiàng)下操作，測(cè)定吸光度，重復(fù) 6次，結(jié)果 Poloxamer-188、PEG4000、PEG6000為基質(zhì)制得的吳藿降壓滴丸的平均吸光度值分別為 0.211、0.252、0.264，RSD 為 0.67%、1.33%、1.37%(n=6)。此結(jié)果可分別作為不同基質(zhì)制得吳藿降壓滴丸的100%溶出度A值。

2.3 滴丸的的體外溶出度測(cè)定

2.3.1溶出度測(cè)定方法 參照2010年版《中國(guó)藥典》規(guī)定，選用漿法［4］進(jìn)行測(cè)定，1000 mL的人工胃液作為溶出介質(zhì)，溫度(37±0.5)℃，轉(zhuǎn)速100 r/min。分別精密稱取不同基質(zhì)制得的吳藿降壓滴丸，投入溶出杯中后，于 1、3、5、10、15、20、30、45、60 min分別抽取溶出介質(zhì)10 mL(同時(shí)加補(bǔ)10 mL的空白介質(zhì))，0.45 μm 的微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液按 2.2.1 項(xiàng)紫外條件下操作測(cè)定吸光度A值，重復(fù)測(cè)定6粒，分別與100%溶出度測(cè)定值A(chǔ)作比較，求出各時(shí)間下的絕對(duì)累積溶出度［5-6］。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1 ～3。

表1 Poloxamer-188為基質(zhì)的滴丸絕對(duì)累積溶出度結(jié)果 (n=6)

表2 PEG4000為基質(zhì)的滴丸絕對(duì)累積溶出度結(jié)果 (n=6)

表3 PEG6000為基質(zhì)的滴丸絕對(duì)累積溶出度結(jié)果 (n=6)

2.3.2 溶出度測(cè)定結(jié)果 以表1，表2，表3中的平均累積溶 出度數(shù)值(±s)為縱坐標(biāo)，時(shí)間t(min)為橫坐標(biāo)，繪制溶出度曲線圖，結(jié)果見(jiàn)圖1。

圖1 不同基質(zhì)制得滴丸的溶出曲線圖

2.3.3 溶出曲線的擬合 將表1，表2，表3中的數(shù)據(jù)按威爾布公式在 Excel中計(jì)算處理［7］，分別求得溶出參數(shù) T0.5、Td、m，結(jié)果見(jiàn)表4。

3 討論

3.1 經(jīng)預(yù)試實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在不同的溶出介質(zhì)中，不同基質(zhì)制得的滴丸的溶出量不同(結(jié)果見(jiàn)表5)，而以在人工胃液中的滴丸的溶出量最大，故本實(shí)驗(yàn)選用人工胃液作為溶出基質(zhì)。

3.2 從溶出曲線圖中可以看出，以Poloxamer-188為基質(zhì)，滴丸的溶出量最大，可達(dá)(99.03 ±1.26)%，而以PEG4000與PEG6000為基質(zhì)，滴丸的溶出量?jī)H為(95.75±1.29)%和(91.77±2.38)%，表明以 Poloxamer-188為基質(zhì)制得的滴丸的溶出效果較好。

表4 不同基質(zhì)制得的滴丸溶出度參數(shù)計(jì)算結(jié)果 (n=6)

表5 不同溶出介質(zhì)中滴丸的溶出量結(jié)果

3.3 通過(guò)對(duì)表4中的溶出參數(shù)T0.5、Td數(shù)據(jù)比較分析，結(jié)果表明以Poloxamer-188為基質(zhì)制得滴丸的T0.5與以PEG4000、PEG6000為基質(zhì)制得滴丸的T0.5相比，有顯著性差異;而以Poloxamer-188為基質(zhì)制得滴丸的 Td與以PEG4000、PEG6000為基質(zhì)制得滴丸的Td相比，沒(méi)有顯著性差異，說(shuō)明以PEG類為基質(zhì)的滴丸，其溶出速度在T0.5時(shí)間段快于以Poloxamer-188為基質(zhì)的滴丸，而在Td時(shí)間段的溶出速度沒(méi)有差異。

3.4 淫羊藿苷的水溶性較差，但實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，其在各類溶出介質(zhì)中能夠很好的溶出，這可能是由于本實(shí)驗(yàn)中所用的基質(zhì)為表面活性劑，能夠增強(qiáng)淫羊藿苷在水溶性介質(zhì)中的溶出效果所致。

［1］胡立志，文雅萍，桂 卉.吳藿降壓滴丸的成型工藝研究［J］.中成藥，2011，33(3):527-529.

［2］桂 卉，李 靜，胡立志.吳藿降壓滴丸與片劑的體外溶出比較研究［J］.湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，30(9):99-101.

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［4］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典:2005年版一部［S］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:附錄73.

［5］何 群，周景來(lái)，謝宗明.兩種轉(zhuǎn)速下測(cè)定麻杏石甘滴丸體外溶出度的研究［J］.中草藥，1998，21(7):455.

［6］何 群，曾 嶸，王 麗，等.麻杏石甘滴丸與栓劑體外溶出度比較［J］.中成藥，2002，22(12):833-835.

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［8］劉明芝，周仁郁.中醫(yī)藥統(tǒng)計(jì)學(xué)與軟件應(yīng)用［M］.北京:中國(guó)中醫(yī)藥出版社，2006:8.