王蕓蕓，劉利軍

(寧夏師范學(xué)院化學(xué)與化學(xué)工程學(xué)院，寧夏 固原 756000)

大孔樹脂(Macroporous resin)是一種不溶于酸、堿及各種有機(jī)溶劑的有機(jī)高分子聚合物，具有吸附容量大、吸附速度快、解吸條件溫和、易于再生、使用壽命長等優(yōu)點(diǎn)，近年來已廣泛應(yīng)用于黃酮類化合物等植物活性成分的提取和分離，尤其適于工業(yè)化生產(chǎn)。作者在此采用AB-8大孔樹脂分離純化了甘草總黃酮。

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 材料、試劑與儀器

甘草渣，寧夏紅寺埠。

95%乙醇、NaOH、碳酸鈉，北京化工廠；乙酸乙酯、硝酸鋁、亞硝酸鈉、HCl、石油醚，天津化學(xué)試劑廠。以上試劑均為分析純。

AB-8大孔樹脂，滄州寶思化工有限公司。

TU-1810型紫外可見分光光度計，北京普析通用有限責(zé)任公司；BS224S型電子天平，北京賽多利斯科學(xué)儀器公司。

1.2 方法

1.2.1 AB-8大孔樹脂的預(yù)處理[1]

AB-8大孔樹脂用乙醇浸泡24 h，充分溶脹后裝柱，用30%乙醇洗至流出液加蒸餾水無渾濁現(xiàn)象，再用蒸餾水洗滌至無醇，備用。

1.2.2 甘草總黃酮的制備[2]

1.2.3 甘草總黃酮的分離純化

(1)裝柱：取處理好的AB-8大孔樹脂20 g置于80 cm×2 cm的離子交換柱，加95%乙醇浸沒，待樹脂沉積好后，倒去多余的乙醇，用水洗滌，待用。

(2)層析：將制備的甘草總黃酮粗品溶于熱水，調(diào)pH值至6～7，用已預(yù)處理過的AB-8大孔樹脂柱層析，以40%乙醇溶液為洗脫液，收集濃縮，得0.4 g甘草總黃酮，測定純度。

1.3 分析與檢測

1.3.1 熔點(diǎn)的測定

測定甘草總黃酮純化前后的熔點(diǎn)，進(jìn)行比較。

1.3.2 總黃酮含量的測定

分別稱取甘草總黃酮粗品和純化產(chǎn)品各0.1 g，用100 mL 80%乙醇溶解，分別移取1.0 mL置于10 mL容量瓶中，加入0.3 mL 5%亞硝酸鈉，6 min后再加入10%硝酸鋁溶液，再過6 min，加入4 mL 4%氫氧化鈉，用水定容至刻度，15 min后用紫外可見分光光度計進(jìn)行全波長掃描，在510 nm處均有最大吸收。平行測定3次。

按下式計算總黃酮含量(W)：

式中：A為吸光度值；V1為移取的體積，mL；V2為稀釋后的體積，mL；V為提取總體積，mL。

2 結(jié)果與討論[2，3]

2.1 熔點(diǎn)分析

上柱前甘草總黃酮粗品的熔點(diǎn)為206～214℃，上柱后純化產(chǎn)品的熔點(diǎn)為210～214℃，表明經(jīng)AB-8大孔樹脂純化后產(chǎn)品純度有所提高。

2.2 紅外光譜分析(圖1)

由圖1可以看出，AB-8大孔樹脂純化甘草總黃酮粗品效果較好。

圖1 純化前后甘草總黃酮的紅外光譜

2.3 總黃酮含量測定

甘草總黃酮純化前后的總黃酮含量見表1。

表1 純化前后總黃酮的含量

由表1可以看出，純化后總黃酮含量明顯增加，計算得到平均純度提高了39.97%。這表明經(jīng)AB-8大孔樹脂純化后甘草總黃酮產(chǎn)品純度明顯提高。

3 結(jié)論

采用AB-8大孔樹脂分離純化甘草總黃酮?？傸S酮含量分析表明，純化后的產(chǎn)品總黃酮含量較純化前明顯增加，平均純度提高了39.97%；紅外光譜分析表明，AB-8能較好地純化甘草總黃酮。為生產(chǎn)高濃度的甘草總黃酮及進(jìn)一步精制甘草黃酮粗提物提供了快捷、有效的方法。

[1] 何琦，及元喬，丁立生，等. D140大孔吸附樹脂銀杏黃酮提取純化性能研究[J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2001，13(1)：56-59.

[2] 曹群華，瞿偉菁，李家貴，等. 大孔樹脂吸附純化沙棘籽渣總黃酮的研究[J]. 中國中藥雜志，2004，29(3)：226-228.

[3] 馮福盛，宣春生，陳樹偉，等.吸附樹脂AB-8對甘草酸的吸附性能及其提取純化中的應(yīng)用[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，1998，10(l)：60-64.