劉來正 高寶益
山銀花為忍冬科植物灰氈毛忍冬(Lonicera macranthoides Hand.-Mazz)、紅腺忍冬(Lonicera hypoglauca Miq).華南忍冬(Lonicera confusa DC).或黃褐毛忍冬(Lonicera fulvotomentosa Hsu et S.C.Cheng)的干燥花蕾或帶初開的花[1],主流品種為灰氈毛忍冬。而我院購進的“山銀花”,其來源為忍冬科植物華西忍冬(Lonicera webbiana Wall.ex DC.)的干燥花蕾[2,3]。為了更加簡便快速地鑒別真?zhèn)?,確保藥材質量,作者在以前研究[4]的基礎上,又對灰氈毛忍冬與華西忍冬進行了紫外譜線組法鑒別研究,為山銀花的真?zhèn)舞b別提供新的科學方法和依據(jù)。
1.1 TU-1901雙光束紫外可見光分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司),參數(shù):原階紫外光譜,波長范圍190~400 nm,狹縫1.0 nm;中速掃描,量程范圍 0~3 ABS。METTLER TOLEDO ABS135-S十萬分之一電子天平。
1.2 灰氈毛忍冬(購自湖南隆回金銀花科技開發(fā)公司,經(jīng)劉來正副教授鑒定),華西忍冬(我院2007年從安徽某中藥飲片有限公司購進,批號為061022,產地為山西省)。
1.3 無水乙醇、氯仿、石油醚(60℃ ~90℃)為分析純,雙蒸水(自制)。
2.1 方法 取山銀花和華西忍冬粉末(過20目篩)各4份,每份2.00 g,置20 ml具塞錐形瓶中,分別加入雙蒸水、無水乙醇、氯仿、石油醚(60℃ ~90℃)各20.0 ml,密塞,室溫放置,浸泡12 h,濾過,得供試液。供試液置1 cm石英比色皿中上機掃描測試,以相應溶劑為空白,若吸收度上限超過3.000時,將供試液以相同溶劑稀釋后再上機測試。根據(jù)測試情況,將濾液作一定稀釋(水提取液含原藥材約為0.4 mg/ml,無水乙醇提取液含原藥材約為4 mg/ml,氯仿提取液含原藥材約為10 mg/ml,石油醚提取液含原藥材約為20 mg/ml),置1 cm石英比色皿中,以相應溶劑空白為對照,在紫外可見光分光光度計掃描。
2.2 結果 山銀花和華西忍冬紫外譜線組譜線最大吸收峰數(shù)目及峰位值(見圖1~4)。它們在4種溶劑浸液紫外譜線組圖譜峰位值見表1。
圖1 水浸液紫外光譜圖
圖2 無水乙醇浸液紫外光譜圖
圖3 氯仿浸液紫外光譜圖
圖4 石油醚浸液紫外光譜圖
表1 山銀花和華西忍冬紫外譜線組圖譜峰位值
袁久榮教授首創(chuàng)的紫外譜線組法,在單一紫外譜線法鑒別中藥及其中藥復方制劑的基礎上,從中醫(yī)用藥作用的的整體觀出發(fā),著眼于中藥內所含化學成分的總體宏觀效應,改單一溶劑為4種固定溶劑,改單一紫外譜線為4條譜線組,是對中藥材和中藥制劑進行鑒別的一種新方法[5-6]。紫外譜線組法對來源于不同科不同屬的藥材的真?zhèn)舞b別有較好的鑒別效果[7-8],而對很多同科同屬[9-11]、甚至是同一種藥材的不同炮制品[12-13]、同一品種不同產地[14-16]的藥材,由于它們親緣關系很近,所含化學成分類似,但通過紫外譜線組圖譜方法,綜合比較其圖譜差異,仍然可以獲得較好的鑒別效果。
縱觀本實驗紫外譜線組全貌,山銀花與其偽品華西忍冬水提取液和石油醚提取液中紫外吸收的峰形、最大吸收峰及其峰位值差別明顯;乙醇提取液和氯仿提取液中雖然最大吸收峰峰位值相同,但峰形不同,乙醇提取液中山銀花次高峰出現(xiàn)在297 nm處,在327 nm處山銀花第3峰明顯,而華西忍冬次高峰則出現(xiàn)在291 nm處,第3峰不明顯;氯仿提取液中華西忍冬在284 nm處次高峰明顯,而山銀花不明顯。實驗結果證實,山銀花與華西忍冬的中藥紫外譜線組法圖像及吸收峰均具有顯著差異,可以作為鑒定山銀花與其偽品華西忍冬的主要依據(jù)之一。因此,采用4種固定溶劑紫外光譜組法鑒別山銀花與華西忍冬,在一定程度上豐富了中藥山銀花的鑒別方法。
[1] 中國藥典.一部,2010:28-29.
[2] 劉天慰,岳建英.山西省植物志.第4卷.北京:中國科學技術出版社,2004:286-289
[3] 徐炳聲,胡嘉琪,王漢津.中國植物志.第72卷.北京:科學出版社,1988:143-259.
[4] 劉來正,趙桂珍,王滿恩,等.山銀花與偽品華西忍冬的生藥學比較研究.農業(yè)與技術,2009,29(6):46-49.
[5] 袁久榮.中藥鑒別紫外譜線組法及應用.人民衛(wèi)生出版社,1999:82-83.
[6] 黃婕,靳鳳云,王祥培,等.威靈仙類藥材的紫外譜線組法鑒別研究.時珍國醫(yī)國藥,2009,20(7):1074-1075.
[7] 左堅,紀從蘭.紫外譜線組法鑒別和改良聚類分析木通主要品種.醫(yī)藥導報,2007,26(7):761-762.
[8] 王水生,姜大成,白雪媛,等.紫外譜線組法在蛤蟆油偽品鑒別中的應用.中成藥,2006,28(9):1336-1339.
[9] 張麗妍,尹海波,王卓.老鸛草類藥材的紫外譜線組法鑒別.遼寧中醫(yī)藥大學學報,2009,11(4):185-186.
[10] 滕建北,萬德光,朱意麟,等.紫外光譜法鑒別金釵石斛和黑毛石斛.華西藥學雜志,2009,24(6):680-681.
[11] 鄒登峰,朱華,肖劍波,等.地錢、拳卷地錢和粗裂地錢的紫外譜線組法鑒別.天然產物研究與開發(fā),2005,17(4):463-464.
[12] 許臘英,魯湘鄂,唐駿,等.紫外光譜法鑒別柴胡和醋柴胡.湖北中醫(yī)學院學報,2005,7(1):44-45.
[13] 田連起,石延榜,李波,等.牽牛子(黑丑、白丑)生熟飲片的紫外譜線組法鑒別研究.中國民族民間醫(yī)藥,2010,19(17):23-24.
[14] 李志勇,孫冬梅.高良姜的紫外譜線組法鑒別研究.時珍國醫(yī)國藥,2010,21(3):672-673.
[15] 趙建國,曲偉紅,石向群.紫外光譜法鑒別芡實的研究.九江醫(yī)學,2009,24(1):40-42.
[16] 孔強,呂文海.13批不同產地杜仲藥材質量分析.中成藥,2010,32(5):803-805.