中藥杭白芷的發(fā)芽條件研究△

文萌，沈曉霞，沈宇峰，王志安

（1.浙江中醫(yī)藥大學(xué)，浙江 杭州 310053；2.浙江省中藥研究所，浙江 杭州 310023）

中藥杭白芷的發(fā)芽條件研究△

文萌1，沈曉霞2*，沈宇峰2，王志安2

（1.浙江中醫(yī)藥大學(xué)，浙江 杭州 310053；2.浙江省中藥研究所，浙江 杭州 310023）

目的：研究不同發(fā)芽條件對杭白芷種子發(fā)芽的影響。方法：以杭白芷種子為材料，比較前處理方法、光照條件、發(fā)芽床、溫度對杭白芷種子萌發(fā)的影響。結(jié)果：（1）75%乙醇浸泡1 min為最佳前處理方法。（2）黑暗狀態(tài)下更有利于杭白芷種子的萌發(fā)。（3）紙上（TP）發(fā)芽床的發(fā)芽率高于紙間（BP）、砂上（TS）、砂床（S）3種發(fā)芽床。（4）15℃（16 h）～25℃（8 h）變溫條件有利于杭白芷種子發(fā)芽。結(jié)論：杭白芷種子發(fā)芽的最優(yōu)條件是：75%乙醇前處理1 min，15℃（16 h）～25℃（8 h）變溫條件下，在紙上（BP）發(fā)芽床上暗培養(yǎng)。

杭白芷；種子；發(fā)芽率

白芷始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，為傘形科植物白芷Angelica dahurica（Fisch.ex Hoffm.）Benth.et Hook.f.或杭白芷Angelica dahurica（Fisch.ex Hoffm.）Benth.et Hook.f.var.formosana（Boiss.）Shan et Yuan的干燥根，其性溫，味辛，具有解表散寒，祛風(fēng)止痛，宣通鼻竅，燥濕止帶，消腫排膿的功能。應(yīng)用于感冒頭痛，眉棱骨痛，鼻塞流涕，鼻鼽，鼻淵，牙痛，帶下，瘡瘍腫痛［1］。近年來，應(yīng)用白芷的制劑配合黑光照射治療白癜風(fēng)、銀屑病也取得了較好效果，同時白芷也成為很好的香料及美容產(chǎn)品在日常生活中廣泛使用。

中藥杭白芷以種子繁殖為主，但隔年陳種發(fā)芽率不高，甚至不發(fā)芽，一般不采用［2］，通常選用當(dāng)年新收的種子。但由于杭白芷種子萌發(fā)率低，發(fā)芽時間長，使生產(chǎn)、實驗受到很大的限制，故認(rèn)為杭白芷的發(fā)芽條件需要進(jìn)一步的優(yōu)化，以更有利于杭白芷的規(guī)范化生產(chǎn)。

本文采用不同發(fā)芽條件處理杭白芷種子，探討影響杭白芷種子發(fā)芽的關(guān)鍵因素，建立杭白芷種子快速發(fā)芽和提高種子發(fā)芽率的有效方法，為杭白芷的種苗繁育提供參考。現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 材料與儀器

1.1 材料

成熟的杭白芷種子，于2009年9月采自浙江省金華市磐安縣尚湖鎮(zhèn)種植基地，保存于4℃冰箱。

1.2 儀器及試劑

ZGP-250型光照培養(yǎng)箱（上海精宏實驗設(shè)備有限公司）；赤霉素（GA，上海伯奧生物科技有限公司）。

2 方法

2.1 種子的前處理

杭白芷種子經(jīng)過45℃、6 h浸種后，篩選75%乙醇處理1min、2%次氯酸鈉溶液中處理15min、沸水處理5 s、10 mg·L－1赤霉素處理10 min、1%甲醛處理1 min和空白處理等6種前處理方法，以空白組為對照，其他條件為25℃恒溫，暗培養(yǎng)，TP發(fā)芽床。每種前處理方法設(shè)3次重復(fù)，每次重復(fù)50粒種子。

2.2 光照條件的選擇

篩選1 000 Lx光照培養(yǎng)和暗培養(yǎng)兩種光照條件，其他試驗條件為75%乙醇前處理1min，25℃恒溫，TP發(fā)芽床。每種光照條件設(shè)3次重復(fù)，每次重復(fù)50粒種子。

2.3 發(fā)芽床的選擇

溫度為25℃，75%乙醇浸泡1 min前處理種子后，篩選紙上（TP）、紙間（BP）、砂上（TS）、砂中（S）4種發(fā)芽床，暗培養(yǎng)。每種發(fā)芽床設(shè)3次重復(fù)，每次重復(fù)50粒種子。

2.4 發(fā)芽溫度的選擇

篩選15，25，30℃3個恒溫條件和15℃（16 h）、25℃（8 h），15℃（16 h）、30℃（8 h）兩個變溫條件，共5個溫度處理，其他試驗條件為75%乙醇前處理1 min，TP發(fā)芽床，25℃恒溫，暗培養(yǎng)。每個溫度處理設(shè)3次重復(fù)，每次重復(fù)50粒種子。

2.5 數(shù)據(jù)分析

記錄種子發(fā)芽始期、播種20 d（初次統(tǒng)計）和40 d（發(fā)芽試驗終期）的正常發(fā)芽種子數(shù)。

種子的發(fā)芽率按下列公式計算：

發(fā)芽率＝規(guī)定日期時全部發(fā)芽種子粒數(shù)/供試種子粒數(shù)）×100%。

發(fā)芽啟動時間為播種到種子開始萌發(fā)所需天數(shù)；發(fā)芽持續(xù)時間為種子開始萌發(fā)到發(fā)芽后連續(xù)5 d平均發(fā)芽粒數(shù)不足供試粒數(shù)的1%時所需天數(shù)［3］。

統(tǒng)計分析用SPSS 18.0軟件包處理，采用單因素方差分析，P＜0.05為統(tǒng)計學(xué)檢驗有顯著性差異。

3 結(jié)果與分析

3.1 前處理方法對杭白芷種子萌發(fā)的影響

結(jié)果見表1。

表1 杭白芷前處理試驗結(jié)果 /%

表1結(jié)果顯示：75%乙醇浸泡1 min、2%次氯酸鈉浸泡15 min、沸水浸泡5 s和1%甲醛浸泡1 min均對杭白芷種子的萌發(fā)有影響，其中，75%乙醇浸泡1 min為最佳前處理方法，與其他各試驗組比較均有明顯差異（P＜0.05）；2%次氯酸鈉浸泡15 min和沸水浸泡5 s比較，統(tǒng)計學(xué)上無明顯差異（P＞0.05）。10 mg·L－1赤霉素浸泡 10 min和空白對照組所得杭白芷種子發(fā)芽率為0，表明赤霉素或不做前處理均不利于杭白芷種子的萌發(fā)。

3.2 光照對杭白芷種子萌發(fā)的影響

黑暗組杭白芷發(fā)芽率為18.33%，1 000 Lx光照組的杭白芷發(fā)芽率為6.67%，在黑暗的條件下，杭白芷種子的發(fā)芽率高，表明黑暗條件更有利于杭白芷種子的萌發(fā)。

3.3 發(fā)芽床設(shè)定對杭白芷種子萌發(fā)的影響

結(jié)果見表2。

表2 杭白芷發(fā)芽床試驗結(jié)果 /%

從表2可以看出，杭白芷種子在TP發(fā)芽床、BP發(fā)芽床、TS發(fā)芽床和S發(fā)芽床兩兩均比較有明顯差異（P＜0.05），其中TP發(fā)芽床杭白芷種子的發(fā)芽率最高。3.4發(fā)芽最適溫度對杭白芷種子萌發(fā)的影響

結(jié)果見表3。

表3 杭白芷發(fā)芽溫度試驗結(jié)果 /%

從表3可以看出，杭白芷種子在15～30℃均能萌發(fā)，其中15～25℃變溫處理時杭白芷的發(fā)芽率最高，與其他各試驗組比較，均有明顯差異（P＜0.05）；25℃和15～30℃變溫處理比較，無明顯差異（P＞0.05）。30℃處理不利于杭白芷種子的萌發(fā)。因此，確定杭白芷種子發(fā)芽的最適溫度為15～25℃變溫。

4 討論和結(jié)論

本實驗研究了不同前處理方法對杭白芷種子萌發(fā)的影響，試驗結(jié)果表明，杭白芷種子在經(jīng)過45℃（6 h）浸種處理后直接進(jìn)行發(fā)芽試驗時，杭白芷種子發(fā)霉情況嚴(yán)重，因此必須進(jìn)行前處理。75%乙醇浸泡1 min、2%次氯酸鈉浸泡15min、1%甲醛浸泡1min和沸水浸泡5 s 4種前處理方法均有一定的滅菌作用，其中，以75%乙醇浸泡1 min杭白芷的發(fā)芽率最高。且此方法較其他3種前處理方法操作簡單、精確、殘留小，對杭白芷種子的傷害最小。故確定75%乙醇浸泡1 min為杭白芷種子的最佳前處理方法。

試驗結(jié)果表明，杭白芷種子在15～25℃變溫時發(fā)芽率最高。溫度低于15℃或者高于25℃對杭白芷種子的發(fā)芽均有抑制作用，發(fā)芽率大幅下降，且變溫更有利于杭白芷種子的萌發(fā)。這與文獻(xiàn)［7］研究杭白芷生長環(huán)境的結(jié)論基本相符。

杭白芷種子在TP發(fā)芽床的發(fā)芽率高于其他3種發(fā)芽床，故選擇TP發(fā)芽床為最佳發(fā)芽床。適量的水分是保證杭白芷種子發(fā)芽的重要條件，接種后在培養(yǎng)皿中加入剛好能充分潤濕發(fā)芽紙的滅菌水，培養(yǎng)過程中適當(dāng)加水，以保證杭白芷種子萌發(fā)所需水量，提高發(fā)芽率。

本研究考察了不同發(fā)芽條件對杭白芷種子萌發(fā)的影響，建立了75%乙醇浸泡1 min前處理后，播種于TP發(fā)芽床的培養(yǎng)皿中，進(jìn)行夜間15℃（16 h）、白天25℃（8 h）變溫，黑暗培養(yǎng)的方法，有利于提高杭白芷種子的發(fā)芽率。研究結(jié)果對建立杭白芷的種子質(zhì)量分級標(biāo)準(zhǔn)、制定種子檢驗規(guī)程和杭白芷規(guī)范化生產(chǎn)提供了科學(xué)依據(jù)。

［1］國家藥典委員會.中國藥典［S］.一部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：97-98.

［2］王愛平.栽培技術(shù)［J］.南陽農(nóng)業(yè)科技，2003，（5）：25.

［3］高峰，陳敏，汪付田，等.荊芥及其混淆品的種子比較研究［J］.中國中藥雜志，2008，33（5）：577.

［4］苑軍，殷霈瑤，李紅莉.白芷的生物學(xué)特性及規(guī)范化栽培技術(shù)［J］.中國林副特產(chǎn)，2010，（1）：43-44.

Study on Germ ination Experiments of Angelica Dahurica Seeds

WEN Meng1，SHEN Xiao-xia2，SHEN Yu-feng2，WANG Zhi-an2
（1.Zhejiang Chinese Medical University，Hangzhou 310053，China；2.Zhejiang Research Institute of Traditional Chinese Medicine，Hangzhou 310023，China）

Objective：To observe the effect of culture condition on the germination of Angelica dahurica seeds.Methods：The effect of pre-treatmentmethods，illumination condition，germination bed and culture temperature on the germination ofAngelica dahuricaseedswas compared.Results：（1）75%ethanol for1min soak is the best pre-treatmentmethods.（2）Dark conditions priming accelerated seeds germination significantly.（3）The germination rate of the seeds onmoist sterile germination special paperwas higher than it on other germination beds.（4）The optimal temperature for the seeds germination was at15℃ （16 hours），during the day and 25℃ （8 hours）.Conclusion：Angelica dahuricacan improve conditions for seed germination rate is 75%ethanol pre-treatment，15～25℃temperature，sterilemoist germination paper in darkness for special.

Angelica dahuricaBenth.；Seeds；Germination rate

國家科技重大專項（2009ZX09308-002）

*沈曉霞，E-mail：xiaoxiashen＠sina.com

2010-12-20）