趙國紅 柳碩巖 楊 永 Ellen He Sven Skog

（1 福建省腫瘤醫(yī)院胸外科，福州 350014；2 Department of Oncology，Karolinska University Hospital，Stockholm）

食管癌是發(fā)生在食管上皮組織的惡性腫瘤，占所有惡性腫瘤的2%，目前其發(fā)病率仍有逐年升高的趨勢。胸苷激酶（ thymidine kinase，TK）是嘧啶代謝循環(huán)中的關鍵酶之一，它能夠催化脫氧胸苷轉變?yōu)槊撗? 1 - 磷酸胸苷酸，為DNA 的合成提供原料，是衡量細胞增殖活性的重要指標[1]。TK在人類細胞中以2種同工酶的形式存在，即細胞質(zhì)TK（TK1）和線粒體TK（TK2） 。研究證明[2-7]，TK1是一種與細胞周期調(diào)控密切相關的細胞增殖標志物，對腫瘤細胞增殖速度的檢測十分有用，適用于對體格檢查人群惡性腫瘤的風險預測及惡性腫瘤患者的療效監(jiān)測和預后判斷。TK1作為腫瘤細胞的血清學增殖標志物，在乳腺癌、肺癌、膀胱癌等惡性腫瘤中已有相關研究[3,8]。本研究中，我們同時檢測食管癌癌患者和正常健康人群血清中的TK1水平，以探討在食管癌的早期診斷、療效評判、預后評估等方面的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 標本來源

2007年10月至2009年2月我科行根治性食管鱗癌切除手術348例 。其中男性243例，女性105例，男女比例為2.3∶1。平均年齡為59±7歲。腫瘤部位: 胸上段51例，胸中段 217例，胸下段 75例，多發(fā)癌5例。按UICC1997年分期標準，腫瘤浸潤深度T1期25例 ，T2期84例，T3期 202例，T4期 37例。組織分化程度，高分化83例，中分化213例，低分化52例。術后病理均證實為鱗狀細胞癌。所有患者以前均未化療過，均有可測病灶。收集同期福建省腫瘤醫(yī)院健康體檢者41名作為健康對照組，其中男19名，女22名，年齡介于28～79歲，平均年齡（60±6）歲。

1.2 儀器和試劑

CIS-1型化學發(fā)光數(shù)字成像分析儀；硝酸纖維素薄膜，anti-TK1 Ab，TK 標準品，ECL 試劑，生物素化二抗，辣根過氧化物酶標記親和素，封閉劑，抗體稀釋液，抗體洗滌液（ 以上組成TK1 診斷試劑盒） 。試劑及儀器均由深圳華瑞同康生物技術有限公司提供。

1.3 方法

在根治性切除的前提下，結合術前胸、上腹部CT及雙頸彩超所提示的病變部位及淋巴結可疑轉移區(qū)域而采用頸、胸、腹三野淋巴結清掃術及胸、腹二野淋巴結清掃術以及經(jīng)左胸食管癌根治術。其中上、中段食管癌及多發(fā)癌以及上縱隔及氣管旁有可疑淋巴結轉移者行頸、胸、腹三野淋巴結清掃術，中下段食管癌以及上縱隔及氣管旁無可疑淋巴結轉移者選擇性行胸、腹二野淋巴結清掃術及經(jīng)左胸食管癌根治術。有235例行頸、胸、腹三野淋巴結清掃術，78例行胸、腹二野淋巴結清掃術，35例行經(jīng)左胸食管癌根治術?？崭钩槿〗】祵φ战M體檢者靜脈血2mL，并于術前、術后2周和術后隨訪1～3個月期間，分別空腹抽取患者靜脈血2mL，在3h內(nèi)，用離心機離心8～10 min，4000 r/min，分離血清，分裝于2個離心管內(nèi)，進行編號，放在-20℃冰箱里備測（一管用于檢測、另一管用于復檢），標本收集完成后，進行血清TK1值測定。

1.4 統(tǒng)計學方法

計量資料采用均數(shù)±標準差表示，利用SPSS13.0 軟件進行t檢驗，P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 食管癌不同分期與健康者血清TK1水平的比較

健康對照組血清TK1值為0.3～1.1 pmol/L，平均（0.5±0.2）pmol/L。與食管癌患者組（3.34±2.11）比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.001，表1）。根據(jù)分期，T1–T2兩組患者血清TK1值為。1.70 ～12.03 pmol/L，平均值為（4.27±2.57） pmol/L，T3–T4組患者血清TK1值為1.51～9.71 pmol/L，平均值為（3.72±1.43）pmol/L，兩組比較P＜0.05，差異尚無明顯統(tǒng)計學意義。

表1 手術前食管癌患者及健康者血清TK1水平的比較 (pmol/L，±s)

表1 手術前食管癌患者及健康者血清TK1水平的比較 (pmol/L，±s)

與健康對照組比較，*P＜0.05

組 別 n 血清TK1值健康對照組 41 0.50±0.20食管癌患者組 348 3.34±2.11*T1～T2期 109 4.27±2.57 T3～T4期 239 3.72±1.43

2.2 術后1周患者血清TK1的變化情況

術后1周，食管癌患者組血清TK1為（1.97～14.51）pmol/L，平均值為 （7.76±3.55） pmol/L，較術前水平明顯提高（P＜0.05）。

2.3 術后1～3個月TK1水平變化情況

完成臨床跟蹤1～3個月的患者103例，術前的血清TK1計數(shù)值為（1.92 ～ 8.37） pmol/L，平均值為（3.21±1.88）pmol/L；術后1-3個月血清TK1值為（0.82 ～5.93） pmol/L，平均值為（1.91±1.31）pmol/L，前后差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05，表2）。其中71例TK1水平在術后1～3個月后出現(xiàn)下降12% ～76%。另32例患者TK1水平在術后出現(xiàn)上升，升幅為115% ～187%。下降組和上升組具有明顯統(tǒng)計學差異（P＜0.005，表2）。

表2 食管癌術后隨訪103例患者血清TK1水平的比較 (pmol/L，±s)

表2 食管癌術后隨訪103例患者血清TK1水平的比較 (pmol/L，±s)

與手術前比較，*P＜0.05；與TK1 降低組比較，**P＜0.005

組 別 n 血清TK1值手術前 103 3.21±1.88隨訪1-3個月 103 1.91±1.31*TK1降低 71 1.47±0.97 TK1升高 32 3.12±1.43**

2.4 跟蹤12個月復發(fā)情況

103例患者中，完成隨訪12個月病例45例，期間均接受過化療。其中術后1～3個月血清TK1下降組有34人，平均值為（1.51±1.05）pmol/L； 術后1～3個月血清TK1上升組11人，平均值為（3.13±2.01） pmol/L；兩組差異仍有統(tǒng)計學意義（P ＜0.05）。上升組中有7例（63.64%）復發(fā)，而下降組中有1例（2.94%）復發(fā)病例，有明顯統(tǒng)計學差異（P＜0.001）。

3 討 論

TK1的活性與細胞周期緊密關聯(lián)，增殖周期中的TKl 含量從G 期、S 期、G2 期不斷增加，G2 期達到最高，而腫瘤患者處于S 期、G2 期的細胞比例高。TK1 與DNA 合成呈正相關，TK1 活力增加會促進細胞DNA 合成速度提高，使腫瘤細胞急劇增殖，因此腫瘤惡性程度越高，TK1 的含量也相應升高，TK1可作為惡性腫瘤患者的治療效果的監(jiān)控和預后的評估，及對健康人群進行早期篩查中的參考指標[8,9]。

目前，食管癌常用的診斷方法X線鋇餐造影檢查，電子胃鏡檢查以及CT診斷不能進行大規(guī)模篩查。本研究結果表明，食管癌患者血清TK1表達水平顯著高于健康人群。目前有許多腫瘤標志具有輔助診斷的作用，如AFP 用于肝癌、CA15-3 用于乳腺癌、PSA 用于前列腺癌等，但特異性和靈敏度不是非常理想。TK1 檢測在腫瘤篩查中特異性很高，Chen等[7]研究表明，87% 的TK1 陽性患者存在惡性腫瘤相關的疾病，并與疾病的輕重程度有關。郭林等[10]認為血清TK1檢測在診斷胃癌、判斷預后和監(jiān)測療效等方面具有重要意義。本研究結果認為，TK1檢測在食管癌的早期篩查、輔助診斷中具有較大的應用價值。

本研究觀察到，術后1周患者血清TK1水平的暫時升高，與之前報道結果一致[12]，這可能與手術引發(fā)的復雜因素，如貧血和感染/發(fā)炎等引起的細胞增殖與壞死，導致大量TK1入血有關，具原因需要進一步研究。術后一個月患者血清TK1水平回落，比較術前有明顯統(tǒng)計學意義，與之前報道結果一致[10,11]，提示TK1可監(jiān)測手術療效。我們建議在患者手術前和手術后一個月測STK1濃度，而不建議在術后一周內(nèi)進行，以避免因非腫瘤性疾病引起的STK1濃度升高而引起的誤導。

本研究在完成12個月跟蹤的45例中發(fā)現(xiàn)，11例TK1水平在1-3個月隨訪中上升的病例中，有7例出現(xiàn)復發(fā)，而下降的34例中僅1例發(fā)生復發(fā)情況。這與之前的研究結果相似[13,14]。提示，當治療有效時，在臨床跟蹤的1～3個月內(nèi)TK1水平會出現(xiàn)顯著性降低；并可以通過比較期間TK1水平的變化狀況（升高或降低），判斷復發(fā)風險，但需大樣本研究進一步證實。

綜上所述，TK1在食管癌患者血清中呈高表達。血清TK1 濃度監(jiān)測對食管癌的診斷、療效監(jiān)測和復發(fā)風險評估等均有一定意義，值得臨床推廣。

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