超聲波輔助萃取-氣相色譜法同時(shí)測(cè)定蔬菜中5種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留*

趙永福，鄒堂斌，羅楊合

（賀州學(xué)院化學(xué)與生物工程系，廣西賀州 542800）

超聲波輔助萃取-氣相色譜法同時(shí)測(cè)定蔬菜中5種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留*

趙永福，鄒堂斌，羅楊合

（賀州學(xué)院化學(xué)與生物工程系，廣西賀州 542800）

建立超聲波輔助萃取-氣相色譜法同時(shí)分離測(cè)定蔬菜中5種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的方法。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，采用超聲波加速提取有機(jī)磷農(nóng)藥殘留，樣品提取效果好，干擾物少，檢測(cè)快速；在DB-1701色譜柱中，供試的5種有機(jī)磷農(nóng)藥分離良好；以FPD為檢測(cè)器，選擇性較好。方法的檢出限為0.004～0.01 μg／mL，5種農(nóng)藥在2個(gè)添加水平下的回收率為78.9%～105.9%，測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.6%～7.6%(n=6)。該方法具有測(cè)定有機(jī)磷農(nóng)藥種類(lèi)多、快速等優(yōu)點(diǎn)，能滿足農(nóng)藥多殘留分析的要求。

超聲波輔助萃??；氣相色譜法；有機(jī)磷農(nóng)藥殘留

我國(guó)是世界上施用農(nóng)藥量最大的國(guó)家之一，其中有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥用量接近農(nóng)藥用量的70%［1］。有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥屬于高效、廣譜殺蟲(chóng)劑，應(yīng)用于水果、蔬菜等的病蟲(chóng)害防治。國(guó)內(nèi)外經(jīng)常報(bào)道關(guān)于有機(jī)磷急性中毒的事件，而且人類(lèi)通過(guò)飲食攝入還會(huì)將殘留農(nóng)藥蓄積于體內(nèi)，從而給人體造成慢性傷害，因此食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留問(wèn)題一直受到人們關(guān)注。歐洲、日本等國(guó)家和地區(qū)不斷修改進(jìn)口水果、蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的限制規(guī)定，因此有關(guān)蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法的研究也變得十分迫切與必要。目前，蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法有氣相色譜法［2-9］、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法［10，11］等。其中大多數(shù)需要經(jīng)過(guò)提取、凈化和檢測(cè)等步驟，方法前處理過(guò)程繁瑣、耗時(shí)較長(zhǎng)，不適合蔬菜產(chǎn)品多批次快速檢驗(yàn)。筆者利用超聲波輔助萃取方法，提高有機(jī)磷農(nóng)藥殘留提取率，并且減少了提取時(shí)間，可實(shí)現(xiàn)快速分析。綜合采用GC-FPD法檢測(cè)，干擾減小，對(duì)于有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的檢測(cè)效果令人滿意。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與試劑

氣相色譜儀：GC-17A型，配火焰光度檢測(cè)器(FPD)，日本島津公司；

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：RE52-99型，上海亞榮生化儀器廠；

超聲波清洗器：KQ-300DB型，昆山市超聲儀器有限公司；

甲胺磷、氧化樂(lè)果、敵敵畏、馬拉硫磷、對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液：農(nóng)藥殘留級(jí)，均為100 μg／mL，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)檢測(cè)所；

甲胺磷、氧化樂(lè)果、敵敵畏、馬拉硫磷、對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：均為10 μg／mL，分別準(zhǔn)確吸取甲胺磷、氧化樂(lè)果、敵敵畏、馬拉硫磷、對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液1 mL于10 mL容量瓶中，用丙酮稀釋到刻度，配制成各自的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，使用時(shí)以丙酮逐級(jí)稀釋至所需濃度；

丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯：農(nóng)藥殘留級(jí)；

無(wú)水硫酸鈉：分析純，北京化工廠。

1.2 樣品處理

稱取10 g蔬菜樣品在組織搗碎機(jī)上制成勻漿，加入丙酮20 mL，超聲提取5 min，減壓抽濾，濾渣用丙酮超聲提取5 min，減壓抽濾。合并兩次濾液，搖勻，轉(zhuǎn)移至100 mL分液漏斗中，待凈化。

在分液漏斗中加二氯甲烷50 mL，緩慢振搖2 min，靜置，待清晰分層后，收集有機(jī)相(下層)于100 mL三角瓶中。加25 mL二氯甲烷于分液漏斗水相中，重復(fù)操作1次后棄去水相。在有機(jī)相中，加入20 g無(wú)水硫酸鈉，脫水；加3 g酸洗活性炭，脫色素等雜質(zhì)，振搖，靜置。待溶液澄清透亮后過(guò)濾，加2 mL乙酸乙酯于濾液中，真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮濾液至2 mL，待測(cè)。

1.3 色譜條件

色譜柱：DB-1701石英毛細(xì)管柱(30 m×0.32 mm， 0.25 μm)，美國(guó) Agilent公司；進(jìn)樣口溫度：240℃；FPD檢測(cè)器溫度：250℃；柱溫：從l10℃以10℃／min升至200℃，保持8 min，最后以20℃／min升至260℃，保持5 min；載氣：氮?dú)?；柱流量?.5 mL／min；進(jìn)樣量：1 μL，不分流模式進(jìn)樣。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜圖

按照1.3色譜條件，5種供試有機(jī)磷農(nóng)藥在DB-1701柱上有很好的分離效果和較低檢出限。分別對(duì)5種有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行保留時(shí)間的定性，5種有機(jī)磷農(nóng)藥在此條件下實(shí)現(xiàn)基線完全分離。0.2 μg／mL混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖見(jiàn)圖1。

2.2 提取條件

甲胺磷、氧化樂(lè)果、敵敵畏、馬拉硫磷、對(duì)硫磷5種有機(jī)磷農(nóng)藥在丙酮中有良好溶解性，在超聲波輔助下，用丙酮從蔬菜樣品中提取殘留農(nóng)藥具有良好的效果。色素干擾物用活性炭除去。

圖1 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

比較3，5，8，l2 min不同萃取時(shí)間對(duì)萃取效果的影響。試驗(yàn)表明，在超聲波輔助下，萃取5 min可保證良好的萃取效果，回收率高，重復(fù)性好。延長(zhǎng)萃取時(shí)間回收率沒(méi)有明顯提高，分析時(shí)間增加了，而且重現(xiàn)性受到影響，因此本實(shí)驗(yàn)選擇萃取時(shí)間為5 min。因此按照實(shí)驗(yàn)選擇1.2樣品處理方法，既能保證良好的提取效果和較少的共萃物干擾，又節(jié)省處理時(shí)間。

2.3 線性方程、線性范圍與檢出限

準(zhǔn)確配制0.0l～1 μg／mL不同濃度的各種有機(jī)磷農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液系列，按照1.3色譜條件進(jìn)行測(cè)定，以峰面積A對(duì)濃度c進(jìn)行線性回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。按3倍信噪比計(jì)算方法檢出限，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 5種有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥的線性方程、相關(guān)系數(shù)、線性范圍和檢出限

由表1可知，5種有機(jī)磷農(nóng)藥在0.01～1 μg／mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，檢出限滿足出口水果、蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)要求。

2.4 回收率及精密度試驗(yàn)

分別對(duì)農(nóng)藥添加水平為1.0，0.5 mg／kg的黃瓜、香菇空白樣品進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，每個(gè)添加水平做6次平行試驗(yàn)，計(jì)算平均回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)，結(jié)果見(jiàn)表2。由表2可知，方法測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.6%～7.6%，回收率為78.9%～105.9%，說(shuō)明該方法具有較高的精密度和準(zhǔn)確度。

3 結(jié)語(yǔ)

超聲波輔助萃取-氣相色譜法同時(shí)分離測(cè)定蔬菜中5種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留，加速了萃取過(guò)程，具有提取快速、回收率高的特點(diǎn)。單批樣品可在90 min內(nèi)完成檢測(cè)，檢測(cè)效果滿足蔬菜農(nóng)藥殘留分析要求。該方法可以實(shí)現(xiàn)蔬菜中多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)。

表2 樣品加標(biāo)回收率與精密度(n=6)

［1］李冬梅.利用加速溶劑萃取儀測(cè)定食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留方法探討［J］.首都公共衛(wèi)生，2007，1(5)： 235-236.

［2］張婷，張虹.脈沖式火焰光度檢測(cè)器(PFPD)分析蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留［J］.食品科學(xué)，2008，29(2)： 302-306.

［3］汪娌娜，徐軍.氣相色譜法測(cè)定蔬菜中15 種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2009，19(1)： 63-64.

［4］陳明，梁春穗，黃偉雄，等.廣東省蔬菜水果中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留監(jiān)測(cè)與評(píng)價(jià)［J］.中國(guó)食品衛(wèi)生雜志，2009，21(2)： 117-119.

［5］孔祥虹，葉宏，李建華，等.毛細(xì)管氣相色譜法快速測(cè)定辣椒中7種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留［J］.化學(xué)分析計(jì)量，2007，16(6)： 25-26.

［6］萬(wàn)益群，陳燕清，占春瑞，等.毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定芝麻中多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量［J］.分析實(shí)驗(yàn)室，2004，23(7)： 10-12.

［7］蔣合舉.氣相色譜法測(cè)定蔬菜中7種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2007，17(8)： 1 419-1 450.

［8］蔡曦，鐘良康，丁堅(jiān)強(qiáng)，等.固相萃?。瓪庀嗌V法快速測(cè)定蔬果中 23 種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2011，21(3)：566-568.

［9］單美娜，徐曉楓，蒲云霞，等.毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定蔬菜中19種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志2011，21(9)： 2 157-2 159.

［10］蘇建峰，趙建暉，熊剛，等.超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速測(cè)定蔥、姜、蒜與辣椒醬中的66種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留［J］.分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2011，25(10)： 85-88.

［11］王玉健，黃惠玲，林正鋒，等.超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定水果中吡菌磷等9種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量［J］.分析實(shí)驗(yàn)室，2011，30(10)： 88-91.

Simultaneous Determination of 5 Organophosphorus Pesticide Residues in Vegetables by Gas Chromatography with Ultrasonic Wave Extraction

Zhao Yongfu，Zou Tangbin，Luo Yanghe
(Department of Chemistry and Biology Engineering of Hezhou University，Hezhou 542800, China)

A method of simultaneous separating and determining 5 organophosphorus pesticides residues in vegetables by gas chromatography with ultrasonic wave extraction was established. The result showed that this method had good performance of extraction，less interference and rapid determining for the organophosphorus pesticide residues.Five organophosphorus residues were separated well in DB-1701 column. Samples were determined by FPD with good selectivity. The detection limits were 0.004-0.0l μg／mL. The average recovery rates of the 5 pesticides with 2 level additions ranged from 78.9%to 105.9%and the relative standard deviations were 2.6%-7.6%(n=6).This method has the merits of rapid detection, it can meet the needs of the determination of pesticide residue.

ultrasonic wave extraction; gas chromatography; organophosphorus pesticide residue

O657.7

A

1008-6145(2012)04-0031-03

10.3969／j.issn.1008-6145.2012.04.009

*廣西教育廳項(xiàng)目(200911MS254)；賀州學(xué)院2009科研項(xiàng)目（2009KYYB03）；廣西桂東資源開(kāi)發(fā)利用重點(diǎn)建設(shè)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目（2009SYS［2］03）

聯(lián)系人：趙永福；E-mail： zhaoyongfu2008@163.com

2012-04-05