鄭淑君 賈喜花 王運(yùn)良 郭建美

[摘要] 目的：通過觀察晚期腫瘤患者外周血淋巴細(xì)胞亞群特點(diǎn)，探討其免疫功能狀況及臨床意義。方法：應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)56例晚期腫瘤患者（腫瘤組）及42例健康體檢者（健康組）外周血淋巴細(xì)胞亞群計(jì)數(shù)，并對(duì)其作比較。結(jié)果：腫瘤組較健康組T細(xì)胞亞群CD8+比值上升，CD4+、CD4+/CD8+比值下降，差值有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），CD3+比值升高，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），B細(xì)胞亞群下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），NK比值下降，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論：晚期腫瘤患者的細(xì)胞免疫及體液免疫功能均低于健康人，其中體液免疫下降較明顯，對(duì)臨床應(yīng)用提高免疫力藥物也具有指導(dǎo)意義。

[關(guān)鍵詞] 淋巴細(xì)胞亞群；免疫功能；流式細(xì)胞術(shù)

[中圖分類號(hào)] R730.43 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B[文章編號(hào)]1673-7210（2011）11（c）-094-02

Clinical characteristics and significance of lymphocyte subsets in patients with advanced cancer

ZHENG Shujun1, JIA Xihua2, WANG Yunliang2, GUO Jianmei2

1.Chengde Medical College, Hebei Province, Chengde 067000, China; 2.Department of Medical Oncology, the First Central Hospital of Baoding City, Hebei Province, Baoding 071000, China

[Abstract] Objective: To observe the clinical characteristics of lymphocyte subsets in the peripheral blood of patients with advanced cancer in order to evaluate immune function and clinical significance of lymphocyte subsets. Methods: Lymphocyte subsets counted in peripheral blood of 56 patients with advanced cancer and 42 cases of healthy people were compared by the flow cytometry. Results: CD8+ ratio of patients with advanced cancer was significantly higher than that of the healthy people, CD4+, CD4+/CD8+ ratio and B cell subgroup were significantly lower in cancer patients than that of the healthy people (all P<0.05). CD3+ ratio was higher in cancer patients and NK ratio was lower, but the differences were not statistically significant (P>0.05). Conclusion: Cellular immune function and humoral immune function of patients with advanced cancer are lower than that of healthy people, and the humoral immune function dropped significantly, this finding is instructive on how to improve the clinical application of immunity drugs.

[Key words] Lymphocyte subsets; Immune function; Flow cytometry

近年來，腫瘤發(fā)病率逐年增加，研究表明惡性腫瘤患者普遍存在免疫功能低下[1]，其發(fā)生是多因素、多階段的，與機(jī)體免疫系統(tǒng)間的相互作用機(jī)制十分復(fù)雜[2]，本文運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)的方法，檢測(cè)并分析惡性腫瘤患者和健康人淋巴細(xì)胞亞群的特點(diǎn)，探討腫瘤對(duì)患者免疫功能的影響，對(duì)臨床具有指導(dǎo)作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2009年1月～2010年12月我院健康體檢者和腫瘤患者，總共98例。其中，健康體檢者（健康組）42例，男24例，女18例；年齡45~64歲，平均53.2歲。腫瘤患者（腫瘤組）56例，均經(jīng)過病理或細(xì)胞學(xué)確診且臨床分期為Ⅳ期；其中，男30例，女26例；年齡43~67歲，平均54.5歲；肺癌22例，大腸癌18例，乳腺癌14例，其他2例。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 試劑和儀器

美國Beckman Coulter 公司四色數(shù)字化流式細(xì)胞儀及其相應(yīng)配套試劑。

1.3 標(biāo)記和檢測(cè)

采集腫瘤患者及健康體檢者血標(biāo)本，取標(biāo)記抗體各10 μl 分別加入TruCOUNT試管管底，然后加入乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝血100 μl，充分混勻，室溫避光染色20 min，再加入溶血素500 μl，充分混勻，室溫避光15 min，再加500 μl的磷酸鹽緩沖液（PBS），室溫避光10 min，后進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

全部數(shù)據(jù)用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件處理。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組T淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)水平比較

腫瘤組與健康組比較，T淋巴細(xì)胞亞群中CD3+比值升高，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），CD8+比值上升，CD4+、CD4+/CD8+比值下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。見表1。

2.2 兩組B細(xì)胞亞群與NK細(xì)胞表達(dá)水平比較

腫瘤組與健康組比較，B細(xì)胞亞群比值下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），NK細(xì)胞活性下降，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

3 討論

腫瘤的發(fā)生和發(fā)展是一個(gè)非常復(fù)雜的過程，研究表明，腫瘤的發(fā)生和發(fā)展與機(jī)體免疫功能具有密切的關(guān)系，免疫力低下的人群腫瘤發(fā)生率高，而腫瘤發(fā)生后又能產(chǎn)生免疫抑制因子抑制宿主的免疫功能[3]。腫瘤發(fā)生后機(jī)體抗腫瘤免疫的效應(yīng)機(jī)制以由T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫為主，根據(jù)是否表達(dá)CD4或CD8分子，T細(xì)胞可分為CD4+ T細(xì)胞或CD8+ T細(xì)胞，CD4+ T淋巴細(xì)胞具有細(xì)胞毒性作用及輔助B細(xì)胞產(chǎn)生抗體等作用，CD8+ T淋巴細(xì)胞可特異性殺傷靶細(xì)胞。本實(shí)驗(yàn)晚期腫瘤患者T細(xì)胞亞群中CD8+比值上升，CD4+、CD4+/CD8+比值下降，T 淋巴細(xì)胞亞群比例失調(diào)，可以說明晚期惡性腫瘤患者的細(xì)胞免疫在一定程度上受到抑制，與相關(guān)報(bào)道一致[4]，機(jī)體通過T淋巴細(xì)胞調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)抗原引起的免疫應(yīng)答及清除細(xì)胞表面抗原或細(xì)胞內(nèi)微生物的效應(yīng)作用減弱。

近年來，關(guān)于腫瘤患者的體液免疫實(shí)驗(yàn)報(bào)道不一，對(duì)B淋巴細(xì)胞亞群的研究也較少[5]，腫瘤的體液免疫是B細(xì)胞及抗體依賴的殺傷作用，同時(shí)誘導(dǎo)T細(xì)胞對(duì)腫瘤的應(yīng)答，發(fā)揮抗腫瘤作用。本實(shí)驗(yàn)通過腫瘤患者及健康體檢者比較可以看出腫瘤患者B細(xì)胞亞群明顯下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），可以提示晚期腫瘤患者的體液免疫功能受到抑制，使其通過激活補(bǔ)體系統(tǒng)溶解腫瘤細(xì)胞，抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用、抗體的調(diào)理作用等減弱，從而使機(jī)體免疫功能下降，同時(shí)，T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞在免疫過程中是相互影響、相互制約的，但B細(xì)胞亞群有可能較T細(xì)胞亞群更加靈敏地反映機(jī)體的免疫功能狀況。

NK細(xì)胞是正常機(jī)體中對(duì)腫瘤細(xì)胞具有高度細(xì)胞毒性作用的淋巴樣細(xì)胞，主要通過穿孔素依賴和穿孔素非依賴的機(jī)制控制腫瘤生長(zhǎng)及其轉(zhuǎn)移。NK細(xì)胞又是不同于T、B淋巴細(xì)胞的淋巴細(xì)胞群。它們?cè)隗w內(nèi)相對(duì)較少，來源于骨髓的大顆粒細(xì)胞。它們不需預(yù)先致敏即能分泌細(xì)胞毒因子，從而殺傷腫瘤細(xì)胞[6]，在抗腫瘤免疫中發(fā)揮著重要作用。大量研究工作已證實(shí)，宿主對(duì)機(jī)體內(nèi)發(fā)生的腫瘤組織有自發(fā)性抵抗現(xiàn)象[7]，而生物應(yīng)答調(diào)節(jié)劑可逆轉(zhuǎn)腫瘤誘導(dǎo)的對(duì)NK細(xì)胞的抑制作用。但在本實(shí)驗(yàn)結(jié)果中，NK活性沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，尚不能體現(xiàn)晚期腫瘤患者機(jī)體NK細(xì)胞發(fā)揮殺傷腫瘤細(xì)胞作用。

結(jié)合本研究，晚期腫瘤患者細(xì)胞免疫和體液免疫均受到不同程度的抑制，與相關(guān)報(bào)道結(jié)果一致[8]，體液免疫較細(xì)胞免疫下降明顯，提示B細(xì)胞亞群有可能較T細(xì)胞亞群更早地反映機(jī)體的免疫功能狀況，晚期腫瘤患者體液免疫可能優(yōu)于細(xì)胞免疫顯示患者的免疫功能狀況。同時(shí)，惡性腫瘤患者免疫功能如果能夠提高，可能有利于腫瘤的控制，這也給臨床醫(yī)生應(yīng)用提高免疫力藥物提供了依據(jù)。由于本研究病例數(shù)少，筆者將增加樣本進(jìn)一步深入研究。

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（收稿日期：2011-07-26）

[作者簡(jiǎn)介] 鄭淑君（1984-），女，碩士，醫(yī)師，主要從事腫瘤內(nèi)科的診斷和治療。