李勝坤 陳緒順

（1.陜西省寧陜縣畜牧獸醫(yī)中心，寧陜 711600；

2.陜西省寧陜縣江口鎮(zhèn)人民政府，寧陜 711602）

黃牛冷配操作要領(lǐng)

李勝坤1陳緒順2

（1.陜西省寧陜縣畜牧獸醫(yī)中心，寧陜 711600；

2.陜西省寧陜縣江口鎮(zhèn)人民政府，寧陜 711602）

黃牛冷配即黃牛冷凍精液人工受精技術(shù)，是指利用器械以人工方法采集種公牛精液，經(jīng)過檢查、稀釋、冷凍保存及解凍等處理后，用器械輸入發(fā)情母牛的生殖器中，使母牛妊娠的一種繁殖技術(shù)。在提高優(yōu)良種公牛的配種效率、加快黃牛品種改良進(jìn)程、提高養(yǎng)牛經(jīng)濟(jì)效益等方面發(fā)揮著重要作用。但是，輸精員在黃牛人工受精的過程中能否規(guī)范而熟練地操作，對于提高母牛的受胎率、縮短胎間距、減少人畜誤傷和母牛生殖疾病，都有密切的關(guān)系。

1 確保冷凍精液的超低溫保存

農(nóng)村養(yǎng)牛專業(yè)戶或縣、鄉(xiāng)鎮(zhèn)輸精站，除了應(yīng)具備輸精器械、消毒藥品外，就是確保冷凍精液的超低溫保存?，F(xiàn)在普遍采用液氮罐保存，冷凍精液劑型常見的是細(xì)管冷凍精液，保存中要特別注意液氮損耗到1/3時(shí)及時(shí)補(bǔ)充液氮，保證精細(xì)管切實(shí)的沉沒于液氮中。取放貯存冷凍精液的提筒，只允許上提至液氮罐的罐頸段之下，嚴(yán)禁提出罐外；在罐內(nèi)脫離液氮的時(shí)間不得超過10 s。在向另一個(gè)液氮貯存罐內(nèi)轉(zhuǎn)移冷凍精液時(shí)，精液提筒脫離液氮不得超過5 s。取放冷凍精液后，應(yīng)及時(shí)蓋上罐塞，以減少液氮消耗。如需移動(dòng)液氮貯存罐時(shí)，應(yīng)提握罐柄，輕拿輕放，防止傾倒。液氮罐貯存在僻靜、陰涼的室內(nèi)，罐底加防震軟墊。對長期用作貯存冷凍精液的液氮罐要定期的清理和洗刷。

2 掌握母牛發(fā)情鑒定方法和最佳輸精時(shí)間

正確掌握母牛的發(fā)情表現(xiàn)和排卵時(shí)間是人工受精成功與否的關(guān)鍵，一般從粘液的顏色、黏度、流量、卵泡等方面判定。

2.1 發(fā)情表現(xiàn)

興奮不安，經(jīng)常叫，眼光銳利，反應(yīng)敏感，頻頻排尿，食欲減少，體溫略高，放牧中常四處游蕩。

2.2 外陰及陰門變化

外陰部稍微紅腫，陰部粘膜充血潮紅，光滑濕潤，子宮頸松軟開張，排出大量清亮透明牽縷粘性液（吊線）；發(fā)情初期的粘液清亮如水，隨后逐漸變稠，量也由多到少，到發(fā)情后期粘液渾濁間或帶有淡黃的細(xì)胞碎屑。

2.3 直腸檢查

卵巢上的卵泡發(fā)育程度。檢查者將指甲剪短、磨光，手臂上涂潤滑劑；先用手撫摩肛門，然后將手指收攏成錐形，以緩慢的旋轉(zhuǎn)動(dòng)作伸入肛門，排出糞便；再將手伸入肛門，掌心向下，按壓撫摩，在骨盆腔底部，可摸到一個(gè)長圓形質(zhì)地的較硬的棒狀物，即子宮頸；再向前摸，在正前方可摸到一個(gè)淺溝，即為角尖溝；溝的兩旁為向前向下彎曲的2側(cè)子宮角，沿著子宮角大彎向下稍向外側(cè)，可摸到卵巢。發(fā)情母牛子宮頸稍大，子宮收縮反應(yīng)比較明顯；不發(fā)情母牛子宮頸硬而細(xì)，子宮較松弛，觸摸反應(yīng)不那么明顯，收縮反應(yīng)也差。

2.4 最佳輸精時(shí)機(jī)

母牛的排卵時(shí)間是在母牛發(fā)情結(jié)束后4～16 h，同時(shí)也是輸精最為有利的時(shí)間；民間還總結(jié)有“老配早，少配晚，不老不少配中間”的經(jīng)驗(yàn)值得參考。一般情況下直腸檢查卵泡發(fā)育到1.5～2.0 cm，卵泡頂端很薄、很脹，如熟葡萄粒的波動(dòng)感，且陰門黏液減少，呈黃色黏稠狀時(shí)，就是最佳輸精時(shí)機(jī)。

3 輸精前的準(zhǔn)備

3.1 器械清洗和消毒

所有器械先用肥皂水洗刷，清水沖凈，再用75%酒精涂擦消毒，開腔器、搪瓷盤等金屬器械用酒精火焰消毒，潤滑劑、稀釋液、橡膠、棉簽、玻璃器械用高壓蒸氣滅菌。

3.2 配種準(zhǔn)備

發(fā)情母牛在六柱欄內(nèi)保定后，將牛尾拉向一側(cè)系好；母牛的陰門、會(huì)陰部要用溫水清洗消毒并擦凈，再用0.1%新潔爾滅消毒。然后用消毒后的毛巾擦干。

3.3 精液的解凍與準(zhǔn)備

細(xì)管凍精解凍方法，用鑷子取出（從液氮罐取出細(xì)管凍精時(shí)，不能把細(xì)管袋拉出液氮罐口），放入38℃～40℃溫水杯中輕輕搖動(dòng)10～15 s，使之升溫均勻。再用紙巾擦干細(xì)管，檢查確認(rèn)所取精液的品種及型號；裝入輸精槍，精液溫度控制在10℃以下，并保證在1 h內(nèi)輸精。

4 輸精

4.1 清除直腸余糞

輸精員要剪短、磨光指甲，手臂徹底清洗干凈后用消毒過的毛巾擦干，再用酒精涂擦消毒；確保做到無菌操作。待酒精揮發(fā)后涂上潤滑劑或肥皂沫準(zhǔn)備輸精。將手指并成錐形，緩慢旋轉(zhuǎn)進(jìn)入肛門，掏出直腸余糞。

4.2 左手把握子宮頸

用左手并攏成錐形伸入肛門內(nèi)，再展開手掌，掌心向下，按壓撫摸，隔著直腸在骨盆底部能觸摸到一個(gè)長圓形，質(zhì)地較硬的棒狀物，即子宮頸，將子宮頸后端輕輕固定在手中。

4.3 插入輸精槍

右手持輸精槍（裝好細(xì)精管的輸精槍嚴(yán)防受到污染，插入陰道時(shí)輸精槍前端套嘴盡量不要接觸到陰門口四壁）呈45°角向上插入陰道逐步擰轉(zhuǎn)輸精槍，之后呈水平沿陰道壁向前移動(dòng)，這樣可避免進(jìn)入尿道口，繼續(xù)使輸精槍向前，直到槍尖到達(dá)子宮頸口，2手相互配合調(diào)整方向，左手將子宮頸前段稍作抬高并配合右手向輸精槍上套，使輸精槍緩慢穿越子宮頸管的皺壁輪，進(jìn)入子宮頸深部和子宮體。

4.4 輸精

確認(rèn)輸精槍進(jìn)入子宮體時(shí)，先插入10 cm左右，再向后抽退一點(diǎn)，然后徐徐注入精液。注完精液后，先輕輕地抽出輸精槍，在緩慢抽回手臂。

5 輸精注意事項(xiàng)

5.1 輸精深度

一般要求輸精槍插入子宮頸深部輸精，即在子宮的5～8 cm處，輸精槍不要盲目插得太深，不能將精液送到超過子宮角彎曲部，以免影響精子獲能和損傷子宮內(nèi)膜，影響受精。

5.2 輸精量

冷凍精液在子宮體內(nèi)輸精量較新鮮精液輸精量少，大約在0.25 ml，精子活力在3級以上，有效精子數(shù)在1 500萬～2 000萬個(gè)即可。

5.3 輸精時(shí)間與次數(shù)

母牛接受公牛爬跨站立不動(dòng)時(shí)再向后推遲12～18 h配種；從陰門流出粘液由稀薄透明轉(zhuǎn)為粘稠渾濁狀即可配種，早晚輸精較好，為了更有把握，可間隔10 h后再重復(fù)輸精1次。

5.4 防止精液倒流

輸精完成后，用左手輕輕揉捏子宮頸數(shù)次，防止精液倒流，然后拉出左手。必要時(shí)還應(yīng)檢查輸精槍套嘴中是否有過多的殘留精液，以判定輸精是否成功。輸精母牛須做好配種記錄，主要記錄授配時(shí)間、授配母牛的牛號、品種及年齡、授配凍精的品種及型號等內(nèi)容，各項(xiàng)記錄必須按時(shí)、準(zhǔn)確、詳實(shí)，以備定期進(jìn)行檢查分析。

5.5 輸精器械清潔消毒

用后要及時(shí)清洗晾干，分類消毒，妥善保存?zhèn)溆谩?/p>