梁 丹，曹保利，李繼坤，季 萍，田 甜

（1.天津中醫(yī)藥大學(xué)2009級碩士研究生，天津 300193;2.天津市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院·南開醫(yī)院，天津 300192）

中藥周期療法對卵巢早衰大鼠性激素和抑制素B的影響

梁 丹1，曹保利2，李繼坤2，季 萍1，田 甜1

（1.天津中醫(yī)藥大學(xué)2009級碩士研究生，天津 300193;2.天津市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院·南開醫(yī)院，天津 300192）

目的:觀察探討中藥周期療法治療卵巢早衰的療效及作用機制。方法:24只大鼠分空白組、模型組、中藥組各8只，模型組和中藥組用腹腔注射順鉑法制備卵巢早衰動物模型，造模后中藥組用促排卵湯和調(diào)助湯按動情周期灌胃，以放免法檢測大鼠血清性激素水平、酶聯(lián)免疫法檢測抑制素B。結(jié)果:中藥組大鼠雌二醇、血清抑制素B升高，促卵泡生成素下降。結(jié)論:中藥周期療法可使卵巢早衰大鼠受損卵巢的內(nèi)分泌功能恢復(fù)。

卵巢早衰;大鼠模型;中藥周期療法;性激素;抑制素B

卵巢早衰（premature ovarian failure，POF）指女性在40歲以前自然絕經(jīng)，以閉經(jīng)、不育、雌激素缺乏，以及促性腺激素水平升高為特征的一種疾病。我們從性激素水平、抑制素B研究了中藥周期療法對卵巢功能的影響，報道如下。

1 材料和方法

1.1 實驗材料

實驗動物:健康成熟未曾交配過的雌性Wistar大鼠24只，鼠齡8～10周，體重（200±10）g，購自天津市山川紅實驗動物科技有限公司，合格證號為SCXK（津）2011。動物購入后服習(xí)2～3天，連續(xù)5～10天做陰道涂片，有動情周期的大鼠納入實驗組。

實驗藥品:促排卵湯（當(dāng)歸10g，紅花10g，赤芍10g，續(xù)斷10g，女貞子15g，枸杞子10g），調(diào)助湯（何首烏10g，枸杞子10g，菟絲子30g，熟地15g，附子6g，肉桂6g）。由天津市急腹癥研究所藥物研究室提供，水煎并濃縮，相當(dāng)于生藥2g/mL，-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

儀器和試劑:血清E2、FSH定量檢測試劑盒，購自北京北方生物技術(shù)研究所，INH-B試劑盒為美國寶特800酶標(biāo)儀。

1.2 實驗方法

分組:將納入實驗組的動物隨機分為空白組（正常組）、模型組、中藥組，每組8只。

造模:模型組與中藥組均用順鉑以0.9%生理鹽水溶解成1mg/mL，進行腹腔內(nèi)注射，劑量 2.0mg/（kg·d），連續(xù)7天。

給藥:中藥組大鼠按人鼠體質(zhì)量比換算后給藥，每只大鼠以4mL/d劑量連續(xù)灌胃。按照動情周期，前2天（大鼠動情間期，動情前期約2天）予促排卵湯，后3天（大鼠動情期，動情后期約3天）予調(diào)助湯，連續(xù)灌胃10天?？瞻捉M和模型組予每天生理鹽水2ml/d灌胃。

連續(xù)灌胃10天后，予水合氯醛麻醉，腹主動脈取血，靜置15min后，離心（3000r/min）20min，取上清液送檢。

1.3 觀測指標(biāo)

大鼠血清性激素（FSH、E2）水平檢測、血清抑制素B（INH-B）檢測。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

表1 大鼠血清性激素水平檢測結(jié)果（±s）

表1 大鼠血清性激素水平檢測結(jié)果（±s）

注:與空白組比較，*P ＜0.05;與模型組比較，△P＜0.05。

組別 樣本量 FSH（m IU/mL）E2（Pmol/L）INH-B（ng/L）空白組15.28 ±0.28 131.59 ±5.2736.76 ±1.20模型組 818.92 ±2.91*115.15 ±3.64*25.90 ±0.60*中藥組 817.18±0.84 124.16±5.75＊△32.48±0.12＊△8

3 討論

中藥治療卵巢早衰，卵泡期以補腎陰為主，黃體期以補腎陽為主。卵泡期為陰長期，即陰精積累期。促排卵湯方中枸杞子、女貞子、續(xù)斷、補腎益天癸，養(yǎng)血調(diào)沖任，使精血充盈、氣血和調(diào)以促使卵發(fā)育。女貞子、當(dāng)歸助陰化陽，佐紅花、赤芍活血，促發(fā)排卵。黃體期陰充陽長，腎陽之氣漸旺，為宮腔待孕階段。調(diào)助湯方中何首烏、枸杞子、菟絲子、熟地滋補腎陰，附子、肉桂溫補腎陽，以維持黃體的正常生理功能。我們用促排卵湯、調(diào)助湯為基礎(chǔ)方臨證加減，治療卵巢早衰100例效果肯定，較西醫(yī)人工周期療效好［1］。

性激素與卵巢儲備功能的關(guān)系越來越引起重視，其中較為肯定的是基礎(chǔ)FSH與卵巢儲備的關(guān)系。月經(jīng)周期第3天的血清FSH水平隨年齡增長升高，表明卵巢的儲備功能減低。INH-B為卵巢顆粒細胞分泌，其主要生理作用是反饋性抑制垂體FSH的分泌，還可以通過調(diào)節(jié)增加E底物來調(diào)節(jié)E2的產(chǎn)生。因而可作為卵巢儲備功能的直接指標(biāo)。研究結(jié)果也證實了此理論［2，3］?；A(chǔ)血清INH-B水平模型組及中藥組與空白組相比均有差異，且模型組小于中藥組、中藥組小于空白組。INH-B與E2呈正相關(guān)、與FSH呈負相關(guān)，與文獻報道相符［3，4］。因而推測基礎(chǔ) INH-B水平與卵巢儲備功能相關(guān)，可作為預(yù)測卵巢儲備功能的依據(jù)。

研究提示，中藥能增加E2的分泌，抑制垂體FSH的分泌，升高INH-B水平。中藥周期療法的作用機制可能為從整體上調(diào)節(jié)下丘腦-垂體-卵巢性腺軸的功能，中藥雌激素樣作用對卵巢的影響。

［1］孟慶芳，曹保利.中藥周期療法對卵巢儲備功能的影響［J］.吉林中醫(yī)藥，2011.7（31）:644-646.

［2］VladimirovIK，TachevaDM，KalinovKB，et al.Prognosticvalue of some ovarian reserve tests in poor responders［J］.Arch GynecolObstet，2005，272（1）:74-79.

［3］陳穎，郁琦，張以文，等.血清抑制素水平在體外授精-胚胎移植超排卵周期中預(yù)測卵巢反應(yīng)性的價值［J］.中華婦產(chǎn)科雜志，2006，41（6）:368-371

［4］FawzyM，LambertA，Harrison RF，etal.Day 5 inhibin B levels in a treatment cycle are predictive of IVF outcome［J］.Hum Reprod，2002，17（6）:1535-1543.

Objective:To observe and study the therapeutic effect and mechanism of TCM periodic therapy in treating premature ovarian failure.Method:24 ratswere divided into 3 groups，blank group，model group and TCM group，8 rats in each group.The rats in model group and TCM group were taken Cisplatin Injection by peritoneal injection to be the animalmodels of premature ovarian failure.After themodelsweremaken，the rats in TCM group were taken Cupainuan Decoction and Tiaozhu Decoction by intragastric administration，then the serum sex hormone level of the ratswas determined by radio-immunitymethod and INH-B was determined by enzyme linked immunoassay.Result:E2and INH-B of rats in TCM group increased while FSH of rats in TCM group decreased.Conclusion:TCM periodic therapy could recover endocrine function ofhurted ovary of premature ovarian failure rats.

premature ovarian failure;ratmodel;TCM periodic therapy;E2;INH-B;FSH

R285.5

B

1004-2814（2012）06-446-02

2012-02-08