王 燕 辛杭書 楊 方 陳常棟 張微微 李 敏 夏 科 張永根＊

飼料瘤胃非降解蛋白質(zhì)（RUP）小腸消化率是影響奶牛的產(chǎn)奶量、生長性能的重要參數(shù)，因此，研究飼料RUP小腸消化率具有非常重要的意義。目前，國外對(duì)于應(yīng)用移動(dòng)尼龍袋法和三步體外法測(cè)定單一飼料蛋白質(zhì)在小腸的消化率參數(shù)已有很多報(bào)道［1－3］，但國內(nèi)研究很少，關(guān)于此方面的研究僅見于岳群等［4］和趙青余［5］的報(bào)道。在反芻動(dòng)物小腸中，可代謝蛋白質(zhì)是由瘤胃合成的微生物蛋白質(zhì)、RUP及少量內(nèi)源性蛋白質(zhì)構(gòu)成的［6］。研究證實(shí)，微生物蛋白質(zhì)的小腸消化率為80%～85%［7］，在英國飼料評(píng)價(jià)系統(tǒng)中，飼料的RUP小腸消化率是90%［8］，而在 NRC（2001）［6］體系中，飼料RUP小腸消化率是80%。而大量試驗(yàn)表明［1－3］，RUP小腸消化率受飼料類型、飼料來源和加工方式等因素的影響很大。目前，反芻動(dòng)物飼料蛋白質(zhì)小腸消化率常用的估測(cè)方法有移動(dòng)尼龍袋法、體外法以及酸性洗滌不溶氮（ADIN）估測(cè)法等。Webester等［9］提出根據(jù)ADIN值預(yù)測(cè)可消化RUP，這種方法簡單快捷，是預(yù)測(cè)RUP小腸消化率最普遍的方法。移動(dòng)尼龍袋法具有良好的重復(fù)性，且操作簡單，目前已被廣泛采用，但其仍依賴于裝有瘤胃瘺管和十二指腸瘺管的試驗(yàn)動(dòng)物，成本較高。近年來，隨著生理生化、酶學(xué)的發(fā)展，體外法也逐漸被人們所接受，雖然不能完全模擬體內(nèi)的消化過程，但不需要試驗(yàn)動(dòng)物，且成本低、易操作、重復(fù)性好。Calsamiglia等［1］建立了綜合瘤胃尼龍袋法和三步體外法相結(jié)合的方法，較好地模擬了動(dòng)物生理?xiàng)l件，省時(shí)省力，但原始三步體外法存在采用的胃蛋白酶（P－7012）價(jià)格昂貴，試驗(yàn)過程中使用三氯乙酸造成環(huán)境污染，不能測(cè)定RUP小腸可消化氨基酸等弊端，因此，Gargallo等［10］建立了測(cè)定RUP小腸消化率的改進(jìn)三步體外法。改進(jìn)三步體外法能否替代移動(dòng)尼龍袋法準(zhǔn)確快速測(cè)定RUP小腸消化率成為本試驗(yàn)研究的重點(diǎn)。本試驗(yàn)應(yīng)用移動(dòng)尼龍袋法、改進(jìn)三步體外法和原始三步體外法測(cè)定飼料RUP小腸消化率，并用ADIN估測(cè)法預(yù)測(cè)RUP小腸消化率，進(jìn)而分別將改進(jìn)三步體外法、原始三步體外法和ADIN估測(cè)法測(cè)定的結(jié)果與移動(dòng)尼龍袋法的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析，研究替代移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定RUP小腸消化率的適宜方法，并對(duì)飼料的常規(guī)營養(yǎng)成分和飼料RUP小腸消化率作回歸分析，找出簡單快速的測(cè)定RUP小腸消化率的方法。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

13種待測(cè)樣品為豆粕（黑龍江）、棉籽粕（新疆）、菜籽粕（山東）、葵花粕（遼寧）、芝麻粕（山東）、玉米胚芽粕（吉林）、玉米（黑龍江）、米糠（黑龍江）、米糠餅（黑龍江）、米糠粕（黑龍江）、大麥（黑龍江）、麥麩（黑龍江）和玉米麩質(zhì)飼料（吉林）。待測(cè)樣品粉碎過40目篩保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試驗(yàn)飼糧及飼養(yǎng)管理

選擇3頭體重約560 kg的帶有永久瘤胃瘺管和十二指腸T型瘺管的奶牛作為試驗(yàn)動(dòng)物，每天09：00和17：00飼喂，每次飼喂5 kg精料，自由飲水。參照 NRC（2001）［6］標(biāo)準(zhǔn)配制精料，每千克精料包含235 g玉米、200 g干酒糟、150 g菜籽粕、140 g葵花粕、110 g米糠粕、60 g糖蜜、55 g甜菜粕、20 g礦物質(zhì)和維生素。粗飼料自由采食。

1.3 試驗(yàn)方法

根據(jù)Hvelplund［11］的方法獲得瘤胃培養(yǎng)16 h的非降解飼料殘?jiān)瑧?yīng)用移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定RUP小腸消化率。原始三步體外法參照Calsa miglia等［1］的原理和方法，其中選用的胃蛋白酶（P－7012，美國Sig ma公司）活力≥2 500 U／mg prot，效價(jià)100%；選用的胰蛋白酶（P－7545，美國Sig ma公司）活力是8 USP U，效價(jià)100%。改進(jìn)三步體外法步驟參照Gargallo等［10］的原理和方法，具體步驟如下：稱1 g殘?jiān)湃肽猃埓ˋnko m R510，孔徑50μm）里，熱封。在每個(gè)培養(yǎng)瓶內(nèi)放入3個(gè)袋子，在瓶內(nèi)放入預(yù)培養(yǎng)的鹽酸胃蛋白酶溶液［p H＝1.90，每升溶液中含有1 g胃蛋白酶（P－7000，美 國 Sigma 公 司），活 力 是 800～2 500 U／mg prot，效價(jià)是1∶10 000］，在39℃培養(yǎng)箱內(nèi)振蕩培養(yǎng)1 h。培養(yǎng)后，沖掉所有的液體，用自來水沖至澄清為止。把袋子放入培養(yǎng)瓶中，加入2 L預(yù)熱的胰蛋白酶溶液［p H＝7.75，KH2PO4緩沖溶液，每升溶液中含有50μg的百里香酚和3 g的胰蛋白酶（P－7545，美國Sig ma公司，參數(shù)同上）］，在39℃培養(yǎng)箱內(nèi)振蕩培養(yǎng)24 h，轉(zhuǎn)速為150 r／min。培養(yǎng)后，清洗小尼龍袋，直到水清為止。在55℃烘箱內(nèi)烘48 h，分析袋內(nèi)的氮含量。

1.4 計(jì)算公式

1.4.1 移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定RUP小腸消化率［4］

1.4.2 原始三步體外法和改進(jìn)三步體外法測(cè)定RUP小腸消化率［1］

1.4.3 ADIN估測(cè)法預(yù)測(cè)RUP小腸消化率［6］

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)處理用SAS 6.12軟件包進(jìn)行，以PROC REG過程對(duì)4種方法所測(cè)RUP小腸消化率數(shù)據(jù)進(jìn)行線性回歸分析，方差分析采用one－way ANOVA過程進(jìn)行，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。以Step wise Multiple Regression過程對(duì)營養(yǎng)成分與RUP小腸消化率之間的關(guān)系進(jìn)行回歸分析。

2 結(jié) 果

2.1 3種實(shí)測(cè)法測(cè)定的飼料RUP小腸消化率及相關(guān)性分析的結(jié)果

由表1可知，在蛋白質(zhì)飼料中，移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定的豆粕RUP小腸消化率最高，依次是菜籽粕、棉籽粕、芝麻粕和葵花粕，最低的是玉米胚芽粕。在能量飼料中，移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定的玉米R(shí)UP小腸消化率最高，依次是米糠粕、大麥、玉米麩質(zhì)飼料、米糠餅、麥麩和米糠，這說明玉米的蛋白質(zhì)在瘤胃內(nèi)不易降解，卻易被小腸消化利用。移動(dòng)尼龍袋法測(cè)得的豆粕、玉米、米糠粕和大麥RUP小腸消化率較高，均在90%以上。玉米胚芽粕、麥麩、玉米麩質(zhì)飼料、米糠RUP小腸消化率較低，在80%以下，其中米糠RUP小腸消化率最低（69.27%），加工后米糠（米糠餅和米糠粕）RUP小腸消化率提高，其中米糠粕RUP小腸消化率提高至90%以上。

在蛋白質(zhì)飼料中，改進(jìn)三步體外法測(cè)定結(jié)果除豆粕外，其余5種蛋白質(zhì)飼料測(cè)定結(jié)果與移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定結(jié)果差異不顯著（P＞0.05）；在能量飼料中，改進(jìn)三步體外法測(cè)定結(jié)果均顯著低于移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定結(jié)果（P＜0.05）。原始三步體外法的測(cè)定結(jié)果均顯著低于移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定結(jié)果（P＜0.05），除麥麩外，原始三步體外法測(cè)定結(jié)果也顯著低于改進(jìn)三步體外法測(cè)定結(jié)果（P＜0.05）。

表1 3種實(shí)測(cè)法測(cè)定的飼料RUP小腸消化率Table 1 Small intestinal digestibility of RUP measured by the three measured methods %

如圖1和圖2所示，在蛋白質(zhì)飼料中，移動(dòng)尼龍袋法的測(cè)定結(jié)果與改進(jìn)三步體外法的測(cè)定結(jié)果存在顯著相關(guān)（R2＝0.991 0，P＜0.05），在能量飼料中，這2種方法的測(cè)定結(jié)果也存在顯著相關(guān)（R2＝0.813 9，P＜0.05）；如圖3所示，在所測(cè)飼料中，2種方法的測(cè)定結(jié)果相關(guān)系數(shù)為0.838 3（P＜0.05）。如圖4和圖5所示，蛋白質(zhì)飼料的移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定結(jié)果與原始三步體外法測(cè)定結(jié)果存在顯著相關(guān)（R2＝0.809 5，P＜0.05），能量飼料的移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定結(jié)果與原始三步體外法測(cè)定結(jié)果也存在顯著相關(guān)（R2＝0.807 7，P＜0.05）；如圖6所示，在所測(cè)飼料中，移動(dòng)尼龍袋法與原始三步體外法的測(cè)定結(jié)果相關(guān)系數(shù)為0.789 9（P＜0.05）。

圖1 蛋白質(zhì)飼料移動(dòng)尼龍袋法與改進(jìn)三步體外法測(cè)定結(jié)果的相關(guān)性分析Fig.1 Correlation analysis bet ween MBT and MTSP measured results of pr otein f eed

圖2 能量飼料移動(dòng)尼龍袋法與改進(jìn)三步體外法測(cè)定結(jié)果的相關(guān)性分析Fig.2 Correlation analysis bet ween MBT and MTSP measured results of energy feed

圖3 所測(cè)飼料移動(dòng)尼龍袋法與改進(jìn)三步體外法測(cè)定結(jié)果的相關(guān)性分析Fig.3 Correlation analysis bet ween MBT and MTSP measured results of all feeds

2.2 ADIN估算法預(yù)測(cè)的飼料RUP小腸消化率結(jié)果及其與移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定結(jié)果的相關(guān)性

由表2可知，ADIN估測(cè)法預(yù)測(cè)的蛋白質(zhì)飼料RUP小腸消化率中，最高的是豆粕，依次是芝麻粕、葵花粕、棉籽粕、菜籽粕，最低的是玉米胚芽粕。ADIN估測(cè)法預(yù)測(cè)的能量飼料RUP小腸消化率中，最高的是大麥，依次是玉米麩質(zhì)飼料、玉米、米糠餅、米糠和麥麩，最低的是米糠粕。ADIN估測(cè)法預(yù)測(cè)結(jié)果與移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定結(jié)果相比，2種方法得到葵花粕、米糠餅、麥麩、玉米麩質(zhì)飼料的結(jié)果無顯著差異（P＞0.05），表明ADIN估算法能預(yù)測(cè)葵花粕、米糠餅、麥麩和玉米麩質(zhì)飼料RUP小腸消化率。ADIN估測(cè)法得到的芝麻粕和米糠RUP小腸消化率顯著高于移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定的RUP小腸消化率（P＜0.05），得到的豆粕、棉籽粕、菜籽粕、玉米胚芽粕、玉米、米糠粕、大麥RUP小腸消化率均顯著低于移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定的RUP小腸消化率（P＜0.05）。

圖4 蛋白質(zhì)飼料移動(dòng)尼龍袋法與原始三步體外法測(cè)定結(jié)果的相關(guān)性分析Fig.4 Correlation analysis bet ween MBT and TSP measured results of pr otein feed

圖5 能量飼料移動(dòng)尼龍袋法與原始三步體外法測(cè)定結(jié)果的相關(guān)性分析Fig.5 Correlation analysis bet ween MBT and TSP measured results of energy f eed

圖6 所測(cè)飼料移動(dòng)尼龍袋法與原始三步體外法測(cè)定結(jié)果的相關(guān)性分析Fig.6 Correlation analysis bet ween MBT and TSP measured results of all f eeds

如圖7、圖8和圖9所示，蛋白質(zhì)飼料、能量飼料及所測(cè)飼料的ADIN估測(cè)法預(yù)測(cè)結(jié)果與移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定結(jié)果均無顯著的相關(guān)（P＞0.05）。

2.3 所測(cè)飼料的常規(guī)營養(yǎng)成分含量與RUP小腸消化率的回歸關(guān)系

所測(cè)飼料的常規(guī)營養(yǎng)成分含量及移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定的RUP小腸消化率，如表3所示，將二者進(jìn)行遞推回歸分析，得到回歸方程，如表4所示。由表4第5個(gè)方程可知，RUP小腸消化率與粗蛋白質(zhì)（CP）、可溶性蛋白質(zhì)（SP）、中性洗滌纖維（NDF）、粗脂肪（EE）、凈能（NE）呈顯著相關(guān)，飼料的RUP小腸消化率與CP的含量呈正相關(guān)，與SP、NDF、EE和NE含量呈負(fù)相關(guān)，當(dāng)引入的變量越多，回歸方程系數(shù)越大，當(dāng)引入CP、SP、NDF、EE、NE這5個(gè)變量時(shí)，回歸方程：RUP小腸消化率（y）＝121.44 ＋ 0.40 CP －0.69SP－ 0.58 NDF －1.04EE－11.20 NE（R2＝0.801 1，P＝0.010 0）。

表2 移動(dòng)尼龍袋法和ADIN估測(cè)法得出的RUP小腸消化率（干物質(zhì)基礎(chǔ)）Table 2 Small intestinal digestibility of RUP measured by MBT and ADIN （DM basis） %

圖7 蛋白質(zhì)飼料移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定結(jié)果與ADIN估測(cè)法預(yù)測(cè)結(jié)果的相關(guān)性分析Fig.7 Correlation analysis bet ween MBT measured results and ADIN esti mated results of pr otein feed

圖8 能量飼料移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定結(jié)果與ADIN估測(cè)法預(yù)測(cè)結(jié)果的相關(guān)性分析Fig.8 Correlation analysis bet ween MBT measured results and ADIN esti mated results of energy feed

圖9 所測(cè)飼料移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定結(jié)果與ADIN估測(cè)法預(yù)測(cè)結(jié)果的相關(guān)性分析Fig.9 Correlation analysis bet ween MBT measured results and ADIN esti mated results of all feeds

3 討 論

3.1 3種實(shí)測(cè)法測(cè)定的不同飼料RUP小腸消化率的比較與分析

在蛋白質(zhì)飼料中，除豆粕外，移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定的RUP小腸消化率與改進(jìn)三步體外法測(cè)定的RUP小腸消化率無差異，表明改進(jìn)三步體外法完全能替代移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定棉籽粕、菜籽粕、葵花粕、芝麻粕和玉米胚芽粕的RUP小腸消化率。對(duì)所測(cè)大多數(shù)飼料來說，2種體外法測(cè)定值普遍低于移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定值，這一方面是由于移動(dòng)尼龍袋法經(jīng)過了大腸消化的緣故［4］，另一方面可能是由于體內(nèi)的復(fù)合酶能分解部分不易消化的蛋白質(zhì)的緣故。

表3 所測(cè)飼料的常規(guī)營養(yǎng)成分含量及RUP小腸消化率 （干物質(zhì)基礎(chǔ)）Table 3 Conventional nutrient contents of measured feeds and small intestinal digestibility of RUP（DM basis） %

表4 預(yù)測(cè)RUP小腸消化率的回歸方程 （干物質(zhì)基礎(chǔ)）Table 4 The regression equation of esti mated small intestinal digestibility of RUP（DM basis）

Woods等［12］采用移動(dòng)尼龍袋法和原始三步體外法對(duì)棉籽粕、菜籽粕、葵花粕、大麥等飼料的RUP小腸消化率進(jìn)行了測(cè)定，得出移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定的豆粕、棉籽粕的結(jié)果與本試驗(yàn)的結(jié)果接近，而大麥和葵花粕的測(cè)定結(jié)果比本試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果偏低，這可能與飼料的品種及產(chǎn)地來源等因素有關(guān)。米糠加工后，RUP小腸消化率提高，其中米糠粕的RUP小腸消化率提高至90%以上，表明米糠加工后易于被小腸吸收利用，從而提高飼料的轉(zhuǎn)化效率。由此可知，飼料的RUP小腸消化率受飼料品種及加工方式等因素的影響很大。反芻動(dòng)物中，飼料在瘤胃內(nèi)被降解是一種低效的過程，Chalpua等［13］指出，飼糧蛋白質(zhì)應(yīng)盡量避免瘤胃降解，為小腸的消化利用供應(yīng)充足的氨基酸。根據(jù)飼料蛋白質(zhì)、瘤胃降解蛋白質(zhì)和RUP對(duì)產(chǎn)奶量、乳蛋白質(zhì)含量的回歸方程得出，產(chǎn)奶量和乳蛋白質(zhì)含量會(huì)隨著RUP含量的增加而增加。

改進(jìn)三步體外法測(cè)定的米糠粕的結(jié)果比移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定結(jié)果低12.17%，原始三步體外法測(cè)定值比移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定值低19.17%，這與米糠在加工過程中產(chǎn)生抗?fàn)I養(yǎng)因子有關(guān)，也可能是由于飼料原料的特性（CP、NDF、ADF等的含量）不同及操作方法細(xì)節(jié)（瘤胃內(nèi)預(yù)培養(yǎng)的時(shí)間、移動(dòng)尼龍袋的孔徑）不同引起的。本試驗(yàn)所測(cè)得的試驗(yàn)數(shù)據(jù)除菜籽粕偏高外，其余飼料的測(cè)定結(jié)果與NRC（2001）［6］所列出的試驗(yàn)的結(jié)果（包括48個(gè)移動(dòng)尼龍袋測(cè)定結(jié)果和6個(gè)三步體外法測(cè)定結(jié)果）的平均值接近，這可能由于菜籽粕的加工工藝不同導(dǎo)致抗?fàn)I養(yǎng)因子發(fā)揮的作用不同所致。

由圖1和圖2所示，移動(dòng)尼龍袋法和改進(jìn)三步體外法測(cè)定能量飼料的相關(guān)系數(shù)（0.813 9）明顯低于蛋白質(zhì)飼料的相關(guān)系數(shù)（0.991 0），這表明改進(jìn)三步體外法替代移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定蛋白質(zhì)飼料的RUP小腸消化率比測(cè)定能量飼料的RUP小腸消化率效果更好。如圖4和圖5所示，移動(dòng)尼龍袋法和原始三步體外法測(cè)定能量飼料的相關(guān)系數(shù)（0.807 7）低于蛋白質(zhì)飼料的相關(guān)系數(shù)（0.809 5），這表明采用原始三步體外法替代移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定蛋白質(zhì)飼料的RUP小腸消化率比測(cè)定能量飼料的RUP小腸消化率效果要好。如圖3和圖6所示，在所測(cè)飼料中，移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定結(jié)果與改進(jìn)三步體外法測(cè)定結(jié)果的相關(guān)系數(shù)（0.838 3）也高于移動(dòng)尼龍袋法與原始三步體外法測(cè)定結(jié)果的相關(guān)系數(shù)（0.789 9），這表明改進(jìn)三步體外法比原始三步體外法能更好地替代移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定飼料RUP小腸消化率。Antoniewicz等［14］測(cè)定了不同來源的4種蛋白質(zhì)補(bǔ)充料，得出移動(dòng)尼龍袋法和三步體外法測(cè)定值有較強(qiáng)的相關(guān)（R2＝0.810 0，P＜0.05）。Van Straalen等［15］也報(bào)道了這2種方法有很強(qiáng)的相關(guān)（R2＝0.900 0）。Woods等［12］測(cè)定了豆粕、葵花粕、菜籽粕、棉籽粕、棕櫚粕、大麥等12種飼料的RUP小腸消化率，得出這2種方法的測(cè)定結(jié)果有很強(qiáng)的相關(guān)（R2＝0.910 2）。岳群等［4］和趙青余［5］均認(rèn)為體外法測(cè)定的小腸消化率與移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定的小腸消化率存在顯著的相關(guān)性。

在所測(cè)飼料中，改進(jìn)三步體外法測(cè)定的結(jié)果與移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定結(jié)果的相關(guān)系數(shù)顯著高于原始三步體外法與移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定結(jié)果的相關(guān)系數(shù)，這說明改進(jìn)三步體外法能更準(zhǔn)確地模擬小腸環(huán)境，從而更準(zhǔn)確地測(cè)定RUP小腸消化率。另外改進(jìn)三步體外法主要有以下優(yōu)點(diǎn)：1）改進(jìn)三步體外法使用的胃蛋白酶（P－7000）與原始三步體外法使用的胃蛋白酶（P－7012）相比，價(jià)格降低22倍［11］，大大降低了成本；2）原始三步體外法采用三氯乙酸終止蛋白質(zhì)反應(yīng)，三氯乙酸具有強(qiáng)腐蝕性和強(qiáng)氧化性，造成環(huán)境污染，改進(jìn)三步體外法取消了三氯乙酸的使用；3）改進(jìn)三步體外法能測(cè)定過瘤胃氨基酸的小腸消化率，而原始三步體外法不能。

3.2 移動(dòng)尼龍袋法與ADIN估測(cè)法的比較分析

ADIN估測(cè)法預(yù)測(cè)的葵花粕、米糠餅、麥麩和玉米麩質(zhì)飼料的結(jié)果與移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定結(jié)果無顯著差異，表明ADIN估測(cè)法能替代移動(dòng)尼龍袋法得到葵花粕、米糠餅、麥麩和玉米麩質(zhì)飼料的RUP小腸消化率。如圖7、圖8和圖9所示，在蛋白質(zhì)飼料、能量飼料及所測(cè)飼料中，ADIN估測(cè)法預(yù)測(cè)結(jié)果與移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定結(jié)果無顯著相關(guān)，這表明ADIN估測(cè)法只針對(duì)某種特定的飼料，而不能替代移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定所有飼料RUP小腸消化 率。Naka maur等［16］和 Rogers等［17］研 究 提出，非牧草類植物來源的蛋白質(zhì)在加熱處理后ADIN和氮的消化率之間存在弱相關(guān)，試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，飼料經(jīng)過加工后會(huì)誘發(fā)美拉德反應(yīng)，從而使ADIN含量增加，然而飼料原料中ADIN部分可以被消化。因此，目前分辨不出ADIN消化的具體位置（瘤胃、小腸）以及其消化程度，也不清楚熱損害吸收的氮是否利于奶牛的生長，因此，ADIN估測(cè)法對(duì)于測(cè)定RUP小腸消化率不一定適用［6］。

3.3 飼料常規(guī)營養(yǎng)成分含量與RUP小腸消化率的回歸關(guān)系分析

ADIN估測(cè)法顯然不能代替移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定飼料RUP小腸消化率，三步體外法測(cè)定RUP小腸消化率也存在酶價(jià)格高、周期長等弊端，因此，需要找到一種能快速準(zhǔn)確預(yù)測(cè)RUP小腸消化率的方法。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼料RUP小腸消化率與CP、SP、NDF、EE、NE含量呈顯著相關(guān)，與CP的含量呈正相關(guān)，而與SP、NDF、EE和NE含量呈負(fù)相關(guān)，且NE的系數(shù)絕對(duì)值最大，表明NE的大小直接影響著飼料RUP小腸消化率的高低。飼料的RUP小腸消化率與飼料的常規(guī)營養(yǎng)成分含量顯著相關(guān)，引入的常規(guī)營養(yǎng)成分指標(biāo)越多，回歸方程的R2越大，當(dāng)引入CP、SP、NDF和EE時(shí)，R2已達(dá)到0.750 3，當(dāng)引入 CP、SP、NDF、EE和 NE時(shí)，R2達(dá)到0.801 1，能準(zhǔn)確快速預(yù)測(cè)RUP小腸消化率。而 Woods等［12］也得出營養(yǎng)成分與體外法相關(guān)方程的相關(guān)系數(shù)為0.78。因此，在沒有瘺管動(dòng)物或三步體外法條件不允許的情況下，采用此種方法預(yù)測(cè)RUP小腸消化率比采用ADIN估測(cè)法得到的RUP小腸消化率準(zhǔn)確得多。

4 結(jié) 論

① 應(yīng)用原始三步體外法和改進(jìn)三步體外法均可替代移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定飼料RUP小腸消化率，其中改進(jìn)三步體外法替代移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定RUP小腸消化率效果更好，并且應(yīng)用體外法替代移動(dòng)尼龍袋法測(cè)定蛋白質(zhì)飼料RUP小腸消化率比測(cè)定能量飼料RUP小腸消化率效果更好。

②ADIN估測(cè)法具有局限性，用飼料的常規(guī)營養(yǎng)成分含量可較好地預(yù)測(cè)RUP小腸消化率。

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