鄧 兵張金鳳文江鋒錢運(yùn)國(guó)高 輝王麗霞喻 婷周 華杜康裕冉志平

(1.武漢市畜牧獸醫(yī)科學(xué)研究所，湖北武漢 430065；2.武漢多寶微生物技術(shù)有限公司，湖北武漢430312；3.松滋市第三人民醫(yī)院，湖北荊州434200；4.黃陂區(qū)畜禽品種改良站，湖北武漢432200)

我國(guó)具有悠久的養(yǎng)鴨歷史，早在公元前500年就有大群養(yǎng)殖蛋鴨和肉鴨的記載。進(jìn)入20世紀(jì)80年代，我國(guó)養(yǎng)鴨業(yè)不斷發(fā)展，逐漸由小規(guī)模家庭飼養(yǎng)方式走向集約化生產(chǎn)，飼養(yǎng)量平均每年以5%～8%的速度遞增。在育種工作者的努力下，幾十年來鴨的生產(chǎn)性能大幅提高，主要表現(xiàn)為生長(zhǎng)速度快、料肉比低、產(chǎn)蛋率高。但隨著鴨生產(chǎn)性能的提高，養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大，養(yǎng)鴨業(yè)也面臨著各種疾病的威脅，如禽流感、鴨病毒性肝炎、傳染性漿膜炎等，鴨的成活率大幅降低（毛小鴻，2010）。據(jù)統(tǒng)計(jì)顯示，疾病給養(yǎng)鴨業(yè)帶來的經(jīng)濟(jì)損失約占總產(chǎn)值的12%～15%。通過提高生產(chǎn)管理水平或使用藥物和抗生素可在一定程度上減少損失，但并不能從根本上解決問題，同時(shí)藥物和抗生素的使用容易引起獸藥殘留、增加食品安全風(fēng)險(xiǎn)，以該方式來解決鴨養(yǎng)殖生產(chǎn)中的疾病問題越來越受到人們的質(zhì)疑。通過提高鴨自身的抗病力，培育出適應(yīng)當(dāng)前生產(chǎn)環(huán)境，能抵御疾病的鴨品種將具有廣闊的市場(chǎng)前景。

1 疾病發(fā)生過程及抗病力的遺傳基礎(chǔ)

疾病的發(fā)生是動(dòng)物的遺傳背景和環(huán)境共同作用的結(jié)果。當(dāng)機(jī)體受到病原侵染時(shí)，會(huì)遇到三道防御機(jī)制，即上皮防御機(jī)制、非特異性防御機(jī)制和特異性的防御機(jī)制。畜禽在此過程中是否發(fā)病取決于侵染和防御機(jī)能相互作用的結(jié)果，防御機(jī)能在此過程中加強(qiáng)的個(gè)體表現(xiàn)出自然抗病力（劉定發(fā)，2004）。

抗病力又稱抗病性，是指機(jī)體抵抗病原體并表現(xiàn)出健康狀況的能力，它分特殊抗病性和一般抗病性（張先波，2010）。特殊抗病情是指動(dòng)物對(duì)某種特定疾病的抗性。這種抗性主要受一個(gè)主基因位點(diǎn)控制。其內(nèi)在機(jī)理在于宿主體內(nèi)存在或缺少某種分子或其變體，這種分子有3種作用：一是決定異體識(shí)別及特異性異體反應(yīng)；二是決定病原體的特殊附著力；三是病原體進(jìn)入體內(nèi)后在體內(nèi)增殖，決定能否導(dǎo)致宿主發(fā)病。

而一般抗病性是指在現(xiàn)有的飼養(yǎng)條件下，畜禽對(duì)不良外界環(huán)境、病原菌、寄生蟲等的抵抗能力，它并不局限于抵抗某一種特定的病原體，而體現(xiàn)的是機(jī)體對(duì)疾病的整體防御功能。它受多個(gè)基因和環(huán)境的綜合影響，病原體的抗原性差異對(duì)一般抗病力影響極小，甚至根本沒有影響，這種抗病力體現(xiàn)了機(jī)體對(duì)疾病的整體防御功能（劉定發(fā)等，2004）。

2 抗病力的選擇

選育在遺傳上具有抗病能力的畜禽，關(guān)鍵是通過科學(xué)合理的方法對(duì)機(jī)體的抗病力進(jìn)行合理評(píng)估，然后對(duì)具有較強(qiáng)抗病能力的個(gè)體進(jìn)行選留。一般來說它包括直接選擇和間接選擇。直接選擇是指在相同感染條件下，將不發(fā)病的個(gè)體選出進(jìn)行繁殖，從而使抗性個(gè)體增多，抗病基因頻率增高。該方式直觀簡(jiǎn)便，但由于抗病性的遺傳力通常較低，直接選擇效果一般較差，且在未發(fā)病情況下，抗病性無法表現(xiàn)，無法選擇。通常可利用致病原直接攻擊畜禽或其同胞和后裔等，通過對(duì)不發(fā)病個(gè)體選留進(jìn)行繁殖，該方式直觀、準(zhǔn)確，但存在以下一些問題：第一，疾病性狀的遺傳力較低，且部分性狀是閾性狀，直接選擇的準(zhǔn)確性差；第二，對(duì)選留的后裔進(jìn)行測(cè)定難度大，世代間隔較長(zhǎng)；第三，有些疾病性狀呈雜合陽性，有的甚至不表現(xiàn)特定特征，難以進(jìn)行準(zhǔn)確選擇；第四，難以確定不同疾病所攻擊的程度和標(biāo)準(zhǔn)；第五，有些抗病性狀和生產(chǎn)性狀存在負(fù)相關(guān)，難以進(jìn)行選擇。

間接選擇是指通過疫苗攻擊、體外試驗(yàn)、遺傳標(biāo)記等方式，對(duì)反映動(dòng)物機(jī)體抗病力的免疫指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。具有較強(qiáng)一般抗病力的個(gè)體，當(dāng)遇到病源侵害時(shí)，一般不表現(xiàn)病癥，但機(jī)體的免疫系統(tǒng)已發(fā)生變化，因此可通過免疫指標(biāo)來反映機(jī)體的一般抗病能力大小。免疫指標(biāo)具有遺傳穩(wěn)定、易于度量測(cè)定、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，并且這些免疫指標(biāo)大多屬中等遺傳力，在實(shí)際生產(chǎn)中以通過免疫指標(biāo)對(duì)個(gè)體進(jìn)行間接選擇為主，直接選擇為輔，對(duì)群體進(jìn)行抗病選育可能更具有實(shí)際意義。

3 選擇方法

抗病育種工作開展的關(guān)鍵是選擇與抗性關(guān)系密切的指標(biāo)，而這些指標(biāo)并不像生長(zhǎng)性狀、繁殖性狀可直接測(cè)定，抗病性狀大多需要進(jìn)行攻毒試驗(yàn)或者動(dòng)物發(fā)病時(shí)才表現(xiàn)。如有研究者通過對(duì)家禽接種球蟲卵囊選育抗球蟲病的雞群、接種馬立克氏病病毒培育抗馬立克氏病的雞群（左天榮，2005）。通過該攻毒的方法簡(jiǎn)捷直觀但存在選擇成本高、危險(xiǎn)性大等缺點(diǎn)。因此，現(xiàn)較常用的方法是對(duì)其后代進(jìn)行后裔測(cè)定，選留較強(qiáng)抗性的親本，對(duì)親本進(jìn)行擴(kuò)繁選育。

畜禽的免疫指標(biāo)大部分可通過對(duì)血液參數(shù)進(jìn)行測(cè)定。這些免疫指標(biāo)包括白細(xì)胞總數(shù)、紅細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞總數(shù)、巨噬細(xì)胞等(張先波，2010)。這些細(xì)胞大多參與機(jī)體免疫功能，如白細(xì)胞是天然免疫的一個(gè)組成部分；紅細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)平衡和穩(wěn)定自身免疫系統(tǒng)的重要基礎(chǔ)，除具有清除抗原免疫作用外，還具有促進(jìn)淋巴細(xì)胞的免疫功能等作用；血小板可激活補(bǔ)體，參與機(jī)體的免疫反應(yīng)。在雞中有研究表明，A、B血型系統(tǒng)與抗馬立克氏病有關(guān)系，且凡屬A614因子的肉雞在去血重、屠宰重、半凈膛重和全凈膛重等指標(biāo)上高于群體平均值，因此該指標(biāo)是極有前景的抗病力選擇指標(biāo)(李中平，1996)。

當(dāng)機(jī)體受到病原體入侵時(shí)，血液中的淋巴細(xì)胞會(huì)下降，異嗜性粒細(xì)胞會(huì)增加，因此異嗜性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比率（H/L值）在血液中的含量會(huì)升高。在獸醫(yī)臨床上常用作動(dòng)物是否感染疾病的間接指標(biāo)（王存波等，2009）。在雞中有學(xué)者通過對(duì)H/L值做主選性狀，H/L值較低的雞有較高的抗應(yīng)激能力，且表現(xiàn)對(duì)新城疫等疾病的耐受。

綿羊紅細(xì)胞（SRBC）是一種非病原性的多價(jià)抗原，可用于刺激機(jī)體的體液免疫應(yīng)答。SRBC的免疫抗體水平可代表機(jī)體產(chǎn)生抗體總量的能力。在雞中對(duì)該性狀進(jìn)行選擇發(fā)現(xiàn)，SRBC抗體與雞新城疫病毒感染、雞毒支原體感染、金黃色葡萄球菌感染成正相關(guān)，表明該指標(biāo)可用于反映雞的一般抗病力(吳春梅，2007)。

IgG和IgM作為選擇指標(biāo)，免疫球蛋白Ig是血液和組織液中的一類糖蛋白，由B細(xì)胞受到抗原刺激后增殖分化為漿細(xì)胞時(shí)所產(chǎn)生，是介導(dǎo)體液免疫的免疫分子。IgG是血清和胞外液中主要的抗體成分（宋詠梅，2010）。IgM是先天性免疫的重要指標(biāo)。

4 對(duì)抗病基因選擇

抗性基因是指當(dāng)動(dòng)物遭受外界環(huán)境的刺激時(shí)，能使機(jī)體產(chǎn)生抵抗外界疾病物質(zhì)的基因。這些基因是在長(zhǎng)期進(jìn)化中逐漸形成的。通過選擇抵抗某種特定疾病的基因，可培育出抗某種特定疾病的品種（劉紅等，2006）。在雞上已鑒定了一些抗性基因。如主要組織相容性復(fù)合體（MHC）抗原在細(xì)胞免疫和體液免疫中均有作用（李尚民等，2007）。它的單倍型與雞的抗腫瘤、免疫缺陷、微生物感染、寄生蟲、傳染性疾病等有關(guān)，隨著MHC單倍型不同感染率存在一定的差異。林常有等已克隆了鴨的MHC I類分子α2區(qū)基因。阮小飛等克隆了鴨MHCⅠ輕鏈cDNA。毛小鴻分析了莆田黑鴨的MHC基因的結(jié)構(gòu)。上述學(xué)者對(duì)鴨MHC基因的相關(guān)信息分析，為該基因在鴨的抗病育種中應(yīng)用提供了基礎(chǔ)。

Elleder D等研究表明，禽白血病病毒ALV可通過特定膜蛋白作為受體位點(diǎn)吸附進(jìn)入細(xì)胞。ALV-A型受體為Tva，ALV-B、ALV-D、ALV-E亞型的受體為Tvb，ALV-C亞型的受體Tvc。因此，這幾個(gè)基因可作為抗禽白血病病毒基因，通過尋找這幾個(gè)受體基因的突變體，從而阻斷ALV進(jìn)入細(xì)胞。通過分子育種選擇能抵抗禽白血病病毒的受體基因,從而培育抗禽白血病病毒的群體。

[1]Elleder D,Stepanets V,Melder D C,et al.The receptor for the subgroup C avian sarcoma and leukosis viruses,Tvc,is related to mammalian butyrophilins,members of the immunoglobulin superfamily[J].J.Virol.,2005,16:10408-10419.

[2]李尚民.雞主要組織相容性復(fù)合體與抗病育種 [J].豬與禽,2007,27(2):70-72.

[3]李中平.肉雞抗病力與生產(chǎn)性能關(guān)系的研究[J].吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1996，18（4）：66-68.

[4]阮小飛,蔣一男,夏春,等.鴨MHCⅠ輕鏈cDNA克隆及其蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)分析[J].農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào),2007,15(1):41-45.

[5]林常有.鴨MHCⅠ類分子cDNA克隆及其基因組結(jié)構(gòu)[D].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué),2004.

[6]劉定發(fā).家禽抗病育種研究進(jìn)展[J].動(dòng)物育種,2004,21(9):39-41.

[7]劉紅.抗性基因在雞抗病育種中的研究進(jìn)展[J].中國(guó)家禽,2006,28(17):55-57.

[8]毛小鴻.莆田黑鴨MHC基因遺傳多態(tài)性研究[D].福建:福建農(nóng)林大學(xué),2010.

[9]宋詠梅.雞TLR4信號(hào)通路與腸炎沙門氏菌感染關(guān)系的研究[D]北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué),2010.

[10]王存波,常國(guó)斌,包文斌,等.利用H/L值分析雞抗應(yīng)激能力差異[J].畜牧與獸醫(yī)，2009，41(7)：8-11.

[11]吳春梅.雞MHC B-F區(qū)基因SNPs分子標(biāo)記與免疫性狀關(guān)系的研究[D].揚(yáng)州:揚(yáng)州大學(xué)，2007.

[12]張先波.一個(gè)大白豬群血液參數(shù)健康標(biāo)準(zhǔn)的制度及BCL10基因多態(tài)性與部分血液參數(shù)的關(guān)聯(lián)分析[D].武漢:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2010.

[13]左天榮.廣西三黃雞抗馬立克氏病相關(guān)基因篩選的初步研究[D].南寧:廣西大學(xué)，2005.