參芪扶正注射液對癌癥惡病質小鼠血脂的影響

黃立搜，王 真

（1.浙江中醫(yī)藥大學附屬第三醫(yī)院呼吸科，杭州 310005；2.浙江省中醫(yī)院呼吸科，杭州 310006）

參芪扶正注射液對癌癥惡病質小鼠血脂的影響

黃立搜1，王 真2

（1.浙江中醫(yī)藥大學附屬第三醫(yī)院呼吸科，杭州 310005；2.浙江省中醫(yī)院呼吸科，杭州 310006）

[目的]觀察參芪扶正注射液對癌癥惡病質小鼠惡病質狀態(tài)的影響，探討參芪扶正注射液治療癌癥惡病質的作用機制。[方法]建立C57小鼠癌癥惡病質模型，觀察參芪扶正注射液對惡病質小鼠的一般狀況，如體質量、攝食量、飲水量的影響；觀察血清中甘油三酯（TG）和膽固醇（CHOL）的水平變化。[結果]參芪扶正注射液能明顯增加癌癥惡病質小鼠攝食量及飲水量，抑制體質量下降（P＜0.05）；可顯著抑制血清中TG和CHOL的異常升高。[結論]參芪扶正注射液對小鼠的癌癥惡病質有明顯的改善作用，其作用機制可能與其抑制脂肪分解有關。

參芪扶正注射液；癌癥惡病質；甘油三酯；膽固醇

癌癥惡病質（CC）是以體質量下降、肌肉萎縮及脂肪組織消耗等進行性營養(yǎng)消耗為特點，包括厭食、早飽、消瘦、體質量下降、貧血及體內(nèi)代謝異常等的一組多器官綜合征[1]。本實驗通過建立癌癥惡病質動物模型,觀察參芪扶正注射液干預該模型中一般生活狀況，如體質量、攝食量、飲水量及血清甘油三酯和膽固醇的水平變化，探討參芪扶正注射液治療癌癥惡病質的作用機制，為進一步臨床應用提供實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 C57BL/6近交系小鼠60只，均為雄性，6～8周齡，體質量（20±2）g，購于上海醫(yī)學科學院動物實驗中心，飼養(yǎng)于浙江中醫(yī)藥大學動物實驗中心清潔級動物房。小鼠Lewis肺癌瘤株，購于上海醫(yī)學科學院動物實驗中心。參芪扶正注射液，麗珠集團利民制藥廠，批號：1003141。醋酸甲地孕酮片，青島格瑞藥業(yè)有限公司，批號：H20010074。生理鹽水注射液，杭州民生制造廠，批號：41004153。

1.2 方法

1.2.1 動物分組 將60只小鼠按照隨機數(shù)字表法隨機分為5組，每組12只。即非荷瘤空白對照組（NTB）、癌癥惡病質組（CC）、參芪扶正低劑量組（LSQ）、參芪扶正高劑量組（HSQ）、醋酸甲地孕酮治療組（MGA）。

1.2.2 癌癥惡病質動物模型的建立 國外學者采用不同的動物建立了多種惡病質動物模型。筆者在參考國外文獻的基礎上,采用鄭亞兵等[2-3]在國內(nèi)建立的Lewis肺癌小鼠惡病質模型。取Lewis新鮮瘤塊，剪碎，放入細胞勻漿器中勻漿，將勻漿液用200目過濾網(wǎng)過濾，取過濾液顯微鏡下計數(shù)并調(diào)整濃度到1×107瘤細胞（活細胞）。取制好的瘤細胞混懸液接種于CC組、LSQ組、HSQ組及MGA組等4組C57近交系小鼠右上肢腋窩皮下處，每只0.1mL，非荷瘤空白對照組（NTB）同部位注射等量生理鹽水。約接種第7天各荷瘤組出現(xiàn)瘤塊，約接種后第10天荷瘤小鼠進入惡病質狀態(tài)，即攝食、飲水明顯下降及體質量顯著減輕，根據(jù)文獻標準，當荷瘤小鼠攝食量減少，體質量下降至與正常對照組比較差異有統(tǒng)計學意義，即進入惡病質時期。

1.2.3 藥物干預 接種瘤細胞后第11天給予各組小鼠灌胃，連續(xù)14d。NTB和CC組：生理鹽水，40mL/kg。LSQ組：參芪扶正注射液，40 mL/kg。HSQ組：參芪扶正注射液，80 mL/kg。MGA組：醋酸甲地孕酮，120mg/kg（醋酸甲地孕酮片用蒸餾水配置成濃度為3mg/m L）。

1.3 觀察指標

1.3.1 體質量 每3 d稱小鼠體質量1次，精確到0.1 g，稱體質量時間選在上午 8：00～10：00。

1.3.2 攝食量及飲水量 每組小鼠同籠喂養(yǎng),提供同一飼料和自來水,每日上午 9：00～11：00，記錄每組小鼠攝食總量和飲水總量。

1.3.3 小鼠血清標本收集 末次給藥后24 h每組小鼠摘眼球取血0.5～1.0mL，置于離心管內(nèi)，4℃、3 000 r/min離心15min，取血清置于-20℃凍存?zhèn)錂z。

1.3.4 甘油三酯（TG）與膽固醇（CHOL）測定 采用全自動生化分析儀測定，采血前12 h禁食，不禁水。

1.4 統(tǒng)計學方法 數(shù)據(jù)分析采用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件完成，計量資料用均數(shù)±標準差（±s）表示，正態(tài)分布計量資料用單因素方差分析（One-WayANOVA）進行比較，偏態(tài)分布計量資料采用秩和檢驗。

2 結果

2.1 體質量變化 小鼠荷瘤后各組體質量較NTB組均明顯降低（P<0.01），給藥治療后LSQ、HSQ及MGA組體質量降低與CC組比較有所改善（P<0.05或P<0.01），但LSQ、HSQ、MGA 3組間比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表1。

表1 各組小鼠體質量的變化（±s，n=12）Tab.1 Change of body weightofm ice in each group（±s，n=12）g

表1 各組小鼠體質量的變化（±s，n=12）Tab.1 Change of body weightofm ice in each group（±s，n=12）g

注：與NTB比較，*P<0.05，**P<0.01；與CC比較，△P<0.05，△△P<0.01。

組別 給藥前第7天給藥前第10天給藥后第7天 給藥后第14天NTB 23.36±1.99 23.48±2.01*23.54±1.93 23.76±2.07 CC 23.84±1.67 21.73±1.90*19.23±1.29** 17.75±1.19**LSQ 23.70±2.34 21.58±2.13*20.93±1.91**△ 19.77±2.06**△HSQ 23.34±2.37 21.35±2.36*21.22±2.40**△△20.35±2.38**△△MGA 23.01±2.32 21.24±1.92*21.06±1.80**△△20.69±1.84**△

2.2 攝食量與飲水量的變化 見表2、表3。荷瘤后CC攝食量和飲水量明顯下降，而LSQ、HSQ、MGA 3組用藥后攝食量和飲水量較同期CC組均有明顯改善（P<0.05或 P<0.01），但 LSQ、HSQ、MGA 3組間差異無統(tǒng)計學意義。

2.3 各組小鼠血清TG和CHOL的測定 見表4。小鼠荷瘤后各組TG較NTB均明顯升高（P<0.01），給藥治療后LSQ、HSQ及MGA組TG水平較CC降低，其中HSQ、MGA與CC比較有統(tǒng)計學意義（P<0.01或P<0.05），但HSQ及MGA兩組間比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），LSQ與HSQ兩組間比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。荷瘤后各組CHOL較NTB均有不同程度升高，CC升高最明顯（P<0.01），但經(jīng)給藥后LSQ、HSQ及MGA 3組與CC組比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），且 LSQ、HSQ 及 MGA 3組間兩兩比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），但給藥后LSQ、HSQ及MGA與CC組比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

結果顯示：參芪扶正注射液可明顯改善癌癥惡病質小鼠體質量、飲食量及飲水量，對惡病質所導致的高甘油三酯血癥具有顯著修復作用。

表2 各組小鼠攝食量的變化（±s，n=12）Tab.2 Change of food intake ofm ice in each group（±s，n=12）g

表2 各組小鼠攝食量的變化（±s，n=12）Tab.2 Change of food intake ofm ice in each group（±s，n=12）g

注：與NTB比較，**P<0.01；與CC比較，△P<0.05，△△P<0.01。

組別 給藥前第7天 給藥前第10天給藥后第7天 給藥后第14天NTB 3.00±0.18 3.08±0.21 3.04±0.06 3.04±0.13 CC 2.88±0.16 2.58±0.28** 2.05±0.13** 1.90±0.06**LSQ 3.13±0.80 2.56±0.09** 2.25±0.18**△ 2.28±0.13**△△HSQ 3.00±0.37 2.53±0.20** 2.32±0.16**△△ 2.37±0.17**△△MGA 2.89±0.85 2.55±0.11** 2.35±0.15**△△ 2.43±0.15**△△

表3 各組小鼠飲水量的變化（±s，n=12）Tab.3 Changeofwater intakeofm ice in each group（±s，n=12）g

表3 各組小鼠飲水量的變化（±s，n=12）Tab.3 Changeofwater intakeofm ice in each group（±s，n=12）g

注：與NTB比較，**P<0.01；與CC比較，△△P<0.01。

組別 給藥前第7天 給藥前第10天給藥后第7天 給藥后第14天NTB 4.84±0.43 4.85±1.07 4.98±1.09 4.74±0.56 CC 4.83±0.35 3.88±0.08** 2.09±0.11** 1.69±0.19**LSQ 4.87±0.32 4.16±0.20** 3.16±0.07**△△ 3.12±0.31**△△HSQ 4.95±0.57 4.02±0.13** 3.15±0.24**△△ 3.33±0.24**△△MGA 4.96±0.43 4.07±0.24** 3.20±0.38**△△ 3.38±0.29**△△

表4 各組小鼠血脂的變化（±s，n=12）Tab.4 Com parison ofblood fatofm ice in each group（±s，n=12）mmol/L

表4 各組小鼠血脂的變化（±s，n=12）Tab.4 Com parison ofblood fatofm ice in each group（±s，n=12）mmol/L

注：與 NTB 比較，*P<0.05，**P<0.01；與 CC 比較，△P<0.05，△△P<0.01。

組別 TG CHOL NTB 1.29±0.49 2.56±0.20 CC 4.77±2.52** 3.15±0.47**LSQ 4.56±1.56** 3.07±0.37**HSQ 3.34±1.80**△ 2.92±0.37*MGA 2.31±1.40**△△ 2.89±0.64

3 討論

脂肪代謝異常，表現(xiàn)為脂肪動員增加，體脂丟失是癌癥惡病質的典型特征之一，其原因可能為攝入減少和利用障礙、當脂肪分解和脂肪酸氧化率均增加時即出現(xiàn)體質量丟失，僅有脂肪分解代謝加快而無脂肪酸氧化率的同步升高時，由脂肪分解產(chǎn)生的脂肪酸將再酯化為甘油三酯，即甘油三酯脂肪酸循環(huán)增強，該循環(huán)過程需消耗能量。促使血清甘油三酯升高的原因之一可能是脂蛋白脂酶（LPL）活性下降，其下降程度與體質量丟失程度相關。現(xiàn)代醫(yī)學認為癌癥惡病質與糖、脂肪和蛋白質的異常代謝有關，癌癥惡病質患者的脂肪代謝變化包括體內(nèi)脂肪構成變化和脂肪動員增加，甘油和脂肪酸轉化增加,儲存在脂肪細胞的脂肪分子分解成游離脂酸和甘油濃度較高,即使在血糖濃度較高的情況下，某些腫瘤優(yōu)先選擇脂質作為其功能物質,且無論在動物模型還是在癌癥患者臨床中均證實,荷瘤機體脂肪明顯減少，且多數(shù)動物實驗提示脂類動員及脂肪氧化通常在體質量明顯喪失以前即出現(xiàn)了明顯升高。

參芪扶正注射液是采用補氣藥黨參、黃芪為主的純中藥制劑，意在補氣扶正。黨參健脾益氣，補中氣以資生化之源；黃芪為補氣藥之長，補氣作用全面，既可以內(nèi)補臟腑之氣，又能益衛(wèi)固表，黨參、黃芪并用應具有較好的扶正功效及免疫調(diào)節(jié)作用。現(xiàn)代藥理研究顯示，黃芪、黨參含有多糖及皂苷等多種成分，具有廣泛的生物活性、免疫調(diào)控及免疫增強作用，能激活免疫細胞，提高機體非特異性免疫與特異性免疫功能[4]。本研究表明參芪扶正注射液能改善癌癥惡病質小鼠的惡病質狀態(tài)，改善食欲，提高體質量，抑制脂肪分解，與臨床研究一致[5-6]。其如何通過調(diào)節(jié)免疫功能來達到抑制脂肪分解，改善惡病質狀態(tài)有待進一步研究。

[1]Fearon KC,Voss AC,Hustead DS,etal.Definition of cancer cachexia:effect of weight loss,reduced food intake,and systemic inflammationon functional status and prognosis[J].Am JClin Nutr,2006,83(6):1345-1350.

[2]鄭亞兵,馬勝林,周衛(wèi)民,等.參附注射液抗Lewis肺癌小鼠癌性惡液質的實驗研究[J].中華中醫(yī)藥雜志,2009,24(3):380-382.

[3]鄭亞兵,馬勝林,周衛(wèi)民,等.沙利度胺抗Lewis肺癌小鼠癌性惡病質的實驗研究[J].北京醫(yī)學,2010,32(7):559-561.

[4]賈英杰，李小江，陳 亮，等.中醫(yī)藥在治療癌性疼痛中的研究進展[J].天津中醫(yī)藥大學學報，2011，30（4）：58-60.

[5]張 航,錢科卿,姜 藻.參芪扶正注射液聯(lián)合化療治療惡性腫瘤的臨床觀察[J].實用臨床醫(yī)藥雜志,2009,13(1):64.

[6]楊紅衛(wèi).參芪扶正注射液配合化療治療惡性腫瘤的臨床療效觀察[J].中國現(xiàn)代藥物應用,2009,3(13):124.

Influenceof Shenqi Fuzheng injection on blood lipidsinmice with cancer cachexia

HUANGLi-sou1,WANGZhen2
（1.Respiratory Department,The Third Affiliated Hospitalof Zhejiang University of TCM,Hangzhou 310005,China;2.Respiratory Department,TCM Hospitalof Zhejiang Province,Hangzhou 310006,Chin a）

[Objective]To observe the effect of Shenqi Fuzheng injection in mice with cancer cachexia and study itsmechanism.[Methods]Themodelof cancer caxhexiawasestablished in C57miceand the changesofphysiologicalconditions(bodyweight,food and water intake)and the levels of triglyceride(TG)and cholesterol(CHOL)were observed.[Results]Shenqi Fuzheng injection could significantly increasewaterand food intake ofmicewith cancer cachexia and inhibit the loss ofbodyweight(P<0.05)and the abnormal increasing of TG and CHOL.[Conclusion]ShenqiFuzheng injection can significantly improve the cancer caxhexia in cancermice,and itsmechanismmay be related to the inhibition of lipolysis.

ShenqiFuzheng injection;cancer cachexia;triglyceride;cholesterol

R285.5

A

1672-1519（2012）03-0281-03

黃立搜（1984-），男，碩士，住院醫(yī)師，主要從事呼吸系統(tǒng)疾病的防治。

2012-01-26）