王衛(wèi)華，盧曉華，徐銳鋒，張慶合

（中國計量科學(xué)研究院化學(xué)所，北京 100013）

醬油中3-氯-1，2-丙二醇檢測實驗室間比對分析

王衛(wèi)華，盧曉華，徐銳鋒，張慶合

（中國計量科學(xué)研究院化學(xué)所，北京 100013）

介紹了由中國計量科學(xué)研究院化學(xué)所負責(zé)實施的醬油中3-氯-1，2-丙二醇檢測實驗室間比對情況，并針對該項目的檢測方法、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)選擇、前處理方法等進行了技術(shù)分析。21家參加比對實驗室對樣品1檢測結(jié)果滿意率85.7%，樣品2結(jié)果滿意率100%。建議實驗人員在檢測中可通過空白加標(biāo)或應(yīng)用質(zhì)控樣品等手段提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度。

3-氯-1，2-丙二醇；醬油；比對

氯丙醇具有致癌、生殖毒性等危害，其中以3-氯-1，2-丙二醇最為常見［1］。3-氯-1，2-丙二醇對食品的污染主要源于添加酸水解植物蛋白（HVP），我國在SB 10338–2000 《酸水解植物蛋白調(diào)味液》［2］中規(guī)定其最大允許限量為1 mg/kg，而在《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中污染物限量》征求意見稿中，擬將3-氯-1，2-丙二醇的限量定為0.4 mg/kg。由于食品中3-氯-1，2-丙二醇的測定涉及到多種前處理手段，操作較為復(fù)雜，中國計量科學(xué)研究院化學(xué)所選擇醬油中3-氯-1，2-丙二醇的測定項目組織了實驗室間比對，用于了解各實驗室在該檢測領(lǐng)域的整體水平，提升檢測能力。

1 參加實驗室

此次比對報名參加的實驗室共25家，每個參加實驗室被賦予唯一實驗室代碼，比對相關(guān)報告均按代碼標(biāo)識參加實驗室。最終收回結(jié)果21家，均為國家級或省級檢測機構(gòu)，具有醬油中氯丙醇測試項目的檢驗資質(zhì)。

2 樣品制備

為考察實驗室在SB10338–2000 《酸水解植物蛋白調(diào)味液》以及征求意見中的食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)GB 2762 《食品中污染物限量》中分別規(guī)定的2個限量水平以及檢測限附近的檢測能力，設(shè)計了本底樣品以及0.4 mg/kg和1.0 mg/kg附近兩個濃度水平的樣品，每個濃度水平配制兩份樣品，最終配制濃度為樣品1：0.36，0.44 mg/kg，樣品2：0.90，1.10 mg/kg，每個濃度水平抽取1份樣品發(fā)放到比對實驗室。

測試樣品的制備采用向釀造醬油中添加3-氯-1，2-丙二醇的方法。經(jīng)過對市場樣品的篩查，選擇質(zhì)量較為穩(wěn)定、未檢出3-氯-1，2-丙二醇的釀造醬油為原料。取足量原料置于潔凈的聚乙烯塑料桶中充分混合，靜置消泡后用于樣品制備。為了保證制備樣品的均勻性，采用3-氯-1，2-丙二醇水溶液進行添加，根據(jù)設(shè)計的樣品濃度向醬油中添加適量溶液，以低速電磁攪拌方式充分混合樣品4 h以上，靜置過夜。最后將添加樣品及本底樣品均分裝至20 mL潔凈安瓿瓶中，于常溫下保存。

抽取樣品進行均勻性測試，經(jīng)檢驗證明制備的樣品均勻性良好。根據(jù)文獻［3］，醬油中3-氯-1，2-丙二醇穩(wěn)定性在兩個月以上，本次比對從發(fā)送樣品到回收結(jié)果報告僅用不到一個月時間，并在收回所有結(jié)果后對留存樣品進行了測定，實驗結(jié)果證明4個濃度添加樣品穩(wěn)定性良好。

3 比對結(jié)果

考慮到此次比對參加實驗室數(shù)量較少，采用中位值、平均值等統(tǒng)計結(jié)果不能很好地反映各實驗室測定結(jié)果的準(zhǔn)確性，同時，比對實施機構(gòu)在完成樣品制備后，也對樣品進行了測定，結(jié)果證明測定值與制備值無明顯偏差，因此確定以樣品制備濃度值為指定參考值進行結(jié)果判定。

由于樣品1和樣品2分別對應(yīng)兩個濃度，為便于數(shù)據(jù)統(tǒng)計，采用相對值進行計算。對實驗室的檢測結(jié)果，按式(1)計算Z值：

式中：x——實驗室檢測結(jié)果；

X——指定參考值；

σ——變動性度量值（目標(biāo)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差）。

以Z值評價實驗室的結(jié)果，若∣Z∣≤2，檢測結(jié)果為滿意；若2＜∣Z∣＜3，檢測結(jié)果為有問題；若∣Z∣≥3，檢測結(jié)果為不滿意或離群值。為了清晰表示各實驗室參加本次考核活動的結(jié)果，繪制了Z比分?jǐn)?shù)柱狀圖，見圖1、圖2。

結(jié)果表明，樣品1的比對結(jié)果中，代碼為9，20的實驗室檢測結(jié)果為可疑；代碼為17的實驗室檢測結(jié)果為不滿意；其余18家實驗室檢測結(jié)果均為滿意，占85.7%；樣品2的檢測結(jié)果均為滿意。

圖2 樣品2測定結(jié)果Z比分分布圖

4 技術(shù)分析

本次比對結(jié)果表明，大部分參加的實驗室均具備3-氯-1，2-丙二醇檢測能力，但仍有少量實驗室對較低濃度樣品的測定結(jié)果不滿意。從國際限量來看，歐盟對調(diào)味品中氯丙醇的限量為0.02 mg/kg［4］，對實驗室的檢測水平提出更為嚴(yán)格的要求?，F(xiàn)根據(jù)比對信息進行技術(shù)分析，以供相關(guān)檢測人員參考。

4.1 檢測方法

此次比對除代碼為003，024，025三家實驗室采用了GB/T 18782–2002 《調(diào)味品中3-氯-1，2-丙二醇的測定》中規(guī)定的GC/MS外標(biāo)法測定外，其余實驗室均采用GB/T 5009.191–2006 《食品中氯丙醇含量的測定》中規(guī)定的第一法——內(nèi)標(biāo)法進行測定，此次比對中兩種檢測方法得到的檢測結(jié)果無顯著性差異。根據(jù)實驗經(jīng)驗，采用外標(biāo)法測定醬油中氯丙醇對實驗操作要求較高，容易出現(xiàn)回收率不穩(wěn)定，導(dǎo)致結(jié)果偏差，而內(nèi)標(biāo)法可以對因?qū)嶒?、操作條件波動對檢測結(jié)果造成的影響起到很好的校正作用，定量結(jié)果相對穩(wěn)定，方法更為可靠。

4.2 選用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

參加比對實驗室使用的3-氯-1，2-丙二醇純品分別來自Dr. E，SIGMA–ALDRICH，West-Chester，Chem. Service，純度標(biāo)稱值均在98%以上，3-氯-1,2-丙二醇溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)來自中國計量科學(xué)研究院。內(nèi)標(biāo)純品分別來自Cambrige，CDNISOTOPES，SIGMA–ALDRICH，CIL，Dr. E，純度標(biāo)稱值均在98%以上，內(nèi)標(biāo)溶液來自中國計量科學(xué)研究院。從結(jié)果看不同來源的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對本次考核結(jié)果無影響，但從實驗室使用便利性以及成本方面來考慮，使用溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)更有優(yōu)勢。

4.3 樣品前處理方法

前處理主要使用國標(biāo)方法中自制Extrelut NT填料玻璃層析柱，少量實驗室使用了固相萃取柱。根據(jù)實驗經(jīng)驗，自制的層析柱由于每次填料力度不同，無法保證穩(wěn)定性和重現(xiàn)性，導(dǎo)致樣品的回收率不穩(wěn)定；而商品化的固相萃取柱，柱子間差異不大，理論上回收率應(yīng)較穩(wěn)定。但是目前在測定醬油中氯丙醇時使用固相萃取柱進行前處理的相關(guān)研究及文獻報道較少，不同的固相萃取柱在實驗條件、結(jié)果準(zhǔn)確性、重復(fù)性等方面的差別還須進一步研究和考察，以形成可推廣的前處理方法。

從衍生化條件來看，比對中各實驗室使用的衍生化時間有20 min和30 min，衍生溫度為70℃和75℃，從結(jié)果看上述條件變化對本次考核結(jié)果無影響。七氟丁?；[唑衍生試劑在使用和保存過程中易受潮，可能對實驗結(jié)果產(chǎn)生影響，而層析柱中無水硫酸鈉的添加量若不足會導(dǎo)致除水不完全，不僅影響洗脫速度，多余的水分也會影響衍生效果。

5 結(jié)論

在即將頒布的GB 2762食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)《食品中污染物限量》中，擬將3-氯-1，2-丙二醇的限量定為0.4 mg/kg，本次考核活動中，在該限量水平，仍有個別實驗室出現(xiàn)檢測結(jié)果可疑或不滿意結(jié)果，應(yīng)分析檢測結(jié)果不確定度來源，加強該項目質(zhì)量控制，通過空白加標(biāo)實驗或應(yīng)用質(zhì)控樣品等手段，加強對前處理和測定環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制。

［1］ 劉紅麗，李永利，解魁，等.市售醬油中3-氯-1，2-丙二醇的測定［J］.中國衛(wèi)生檢驗雜志，2004，14(3): 342.

［2］ SB 10338–2000 酸水解植物蛋白調(diào)味液［S］.

［3］ 佟克興.醬油中3-氯-1，2-丙二醇檢測能力驗證［J］.理化檢驗：化學(xué)分冊，2008，44(4): 380–383.

［4］ 秦紅梅，金一和，黃飚，等.食品中3-氯丙醇的污染狀況及其毒性研究進展［J］.中國公共衛(wèi)生，2002，18(12): 1 519–1 521.

Interlaboratory Comparison for Test Result on 3-chloro-1,2-propanediol in Soy Sauce

Wang Weihua， Lu Xiaohua， Xu Ruifeng， Zhang Qinghe
(National Institute of Metrology， P. R. China， Beijing 100013, China)

An interlaboratory comparison on 3-chloro-1，2-propanediol determination in soy sauce was performed by National Institute of Metrology. Result was discussed, and technical analysis was proceeded aim at the determination method，reference standard selection and pretreatment method. The satis fi ed rate of sample 1 was 85.7%, and sample 2 was 100% among 21 laboratories. Proceeding recovery rate experiments or using quality control samples were suggested in order to improve the accuracy of the test.

3-chloro-1,2-propanediol; soy sauce; interlaboratory comparison

O656.32

A

1008–6145(2012)03–0089–03

10.3969/j.issn.1008–6145.2012.03.025

聯(lián)系人：王衛(wèi)華；E-mail: wangwh@nim.ac.cn

2012–03–08