東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所 解俊美 王 安＊蘇莉娜 張偉明 王思維 劉肖挺

維生素D是動物體內(nèi)不可缺少的一種脂溶性維生素，在鈣、磷吸收，骨骼發(fā)育，肉品質(zhì)，免疫細(xì)胞的形成等方面均發(fā)揮了十分重要的作用。但在舍飼條件下，動物體內(nèi)合成的維生素D并不能滿足動物機(jī)體的需要，仍需要從飼料中獲得。因此，適宜的維生素D添加量具有重要的生物學(xué)意義。目前，有關(guān)蛋鴨對維生素D需要量的研究較少，在實際生產(chǎn)中使用的維生素D添加量缺乏試驗依據(jù)。因此，本試驗通過飼糧中添加不同水平的維生素D，研究其對1～28日齡蛋雛鴨生產(chǎn)性能及免疫功能的影響，探索正常生產(chǎn)條件下發(fā)揮其最佳生產(chǎn)性能維生素D的適宜添加量，為蛋鴨科學(xué)生產(chǎn)提供試驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物與試驗設(shè)計 試驗選用1日齡健康、體重（39.21±0.47）g的金定蛋鴨 180只，采用單因素完全隨機(jī)試驗設(shè)計，隨機(jī)分成5個處理組（Ⅰ ～Ⅴ組），每個處理6個重復(fù)，每個重復(fù)6只鴨。

1.2 試驗飼糧 采用玉米－豆粕型基礎(chǔ)飼糧，參照NRC（1998）飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)和我國臺灣畜牧學(xué)會標(biāo)準(zhǔn)（1993）建議的蛋鴨營養(yǎng)需要量設(shè)計。維生素D以維生素D3（50萬IU/g）的形式添加。Ⅰ組飼喂基礎(chǔ)飼糧，Ⅱ～Ⅴ組分別飼在基礎(chǔ)糧基礎(chǔ)上添加110、220、550、1000 IU/kg 維生素 D。 試驗期為 4周（1～28日齡）。全期自由采食和飲水，保證足夠的光照時間，常規(guī)飼養(yǎng)管理?；A(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 樣品采集與處理 試驗第28天，從每重復(fù)隨機(jī)選取接近平均體重的健康試鴨1只，經(jīng)過空腹稱重后，頸靜脈采血3～5 mL，靜置后3000 r/min離心15min，將分離出的血清分裝于EP管中，-20℃貯存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 測定指標(biāo)與方法

1.4.1 生長性能指標(biāo) 日增重：在試驗開始時稱試鴨初始重，之后每周稱一次鴨重，并做詳細(xì)記錄，計算試鴨平均日增重。采食量：每周統(tǒng)計一次試鴨耗料量，并回收余料，計算平均日采食量。料重比：即平均日采食量/平均日增重。

1.4.2 血清免疫指標(biāo) 免疫球蛋白的測定在UV-2401紫外可見分光光度計上進(jìn)行，試劑盒由濰坊三維生物工程集團(tuán)有限公司提供。采用放射免疫分析法測量血清生長激素（GH）、三碘甲腺原氨酸（T3）、甲狀腺素（T4）、皮質(zhì)醇（Cort），試劑盒由北京福瑞生物工程公司提供。

1.5 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件的One-way ANOVA進(jìn)行方差分析，用Duncan’s法進(jìn)行多重比較，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。對檢測指標(biāo)采用曲線估計法建立二次回歸模型：Y=aX2+bX+c，當(dāng)獲得顯著性二次效應(yīng)時，確定曲線拐點對應(yīng)的維生素D添加量即為維生素D的適宜添加量。

2 結(jié)果與分析

2.1 維生素D對蛋雛鴨生長性能的影響 由表2可知，Ⅳ組平均日增重顯著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ組（P＜ 0.05），但Ⅲ、Ⅳ組間差異不顯著（P ＞ 0.05），除Ⅳ組外，其余各組與Ⅰ組差異均不顯著 （P＞0.05）；平均日采食量各組間均差異不顯著 （P＞0.05），其中以Ⅰ組最高。Ⅲ、Ⅳ組料重比與Ⅰ組差異顯著 （P＜0.05），分別較Ⅰ組降低18.29%和25.61%，但與其他各組間差異均不顯著 （P＞0.05）。

表2 不同維生素D添加水平對蛋雛鴨生長性能的影響

2.2 維生素D對蛋雛鴨免疫球蛋白的影響 由表3可知，在飼糧中添加維生素D對蛋雛鴨血清IgG和IgA含量影響明顯，其中，Ⅳ組IgG顯著高于Ⅰ、Ⅴ組 （P＜0.05），分別較Ⅰ組和Ⅴ組高9.19%和6.40%，各添加組IgA含量均顯著高于Ⅰ組（P＜0.05），但各添加組間差異均不顯著（P＞0.05）。各維生素D添加水平對IgM含量影響均不顯著（P＞0.05），但Ⅳ組含量最高。

表3 不同維生素D添加水平對蛋雛鴨免疫球蛋白的影響 g/L

2.3 維生素D對蛋雛鴨血清免疫相關(guān)激素的影響 由表4可知，血清GH濃度隨著飼糧維生素D水平的增高有先上升后下降的趨勢，但各組間差異均不顯著（P＜0.05），Ⅳ組濃度最高。Ⅲ、Ⅳ組T3濃度顯著高于Ⅰ、Ⅴ組（P＜0.05），且以Ⅳ組最高，較對照組提高109.62%。Ⅳ組T4濃度顯著高于Ⅰ、Ⅴ組 （P＜0.05），分別較Ⅰ組和Ⅴ組高36.22%和21.96%，與其他組差異均不顯著（P＞0.05）。Cort濃度最低的是Ⅳ組，且與其他各組差異顯著（P＜0.05），含量最高的是Ⅰ、Ⅴ組，且與Ⅱ、Ⅲ組差異顯著（P＜0.05）。

表4 不同維生素D添加水平對蛋雛鴨免疫相關(guān)激素的影響 ng/mL

2.4 回歸模型估測飼糧維生素D的適宜添加量通過二次曲線回歸模型，建立維生素D添加水平與各敏感指標(biāo)的二次曲線回歸方程，式中：X為飼糧維生素D水平；Y分別為各個敏感指標(biāo)（表5）。根據(jù)回歸方程，維生素D的適宜添加量為523.1～560.6 IU/kg。

表5 二次回歸模型估測飼維生素D的適宜添加量 IU/kg

3 討論

蛋雛鴨的生長性能是衡量蛋雛鴨飼養(yǎng)經(jīng)濟(jì)效益的直接指標(biāo)和重要指標(biāo)。由于目前的規(guī)?；曫B(yǎng)追求的是成本最低化和利潤最大化的結(jié)合。因此，生長性能的高低成為判斷籠養(yǎng)蛋雛鴨飼養(yǎng)成敗的關(guān)鍵參考指標(biāo)。本試驗結(jié)果表明，飼糧中添加不同水平的維生素D可對1～28日齡蛋雛鴨日增重、料重比產(chǎn)生不同程度的影響，但對日采食量影響不顯著。賈紅閣（2007）研究表明，在日糧中分別添加 25（OH）D3和維生素 D，隨著添加水平的升高肉仔雞的體重出現(xiàn)先升高后下降的趨勢。楊曉丹（2008）研究表明，飼糧添加 1α（OH）D3可提高 21 d肉雞體重、體增重、采食量、飼料轉(zhuǎn)化率，降低死亡率。Atencio等（2005）研究發(fā)現(xiàn)，維生素D可改善畜禽生長性能，可提高肉雞體增重、采食量，和飼料效率，并能增加脛骨灰分，降低雛雞死亡率。石天虹等（2011）研究發(fā)現(xiàn)，隨日糧維生素D3添加水平的增加，肉仔雞體增重、耗料量、存活率均顯著增加，綜合考慮生產(chǎn)性能和經(jīng)濟(jì)效益，認(rèn)為0～3周齡和4～6周齡肉仔雞維生素D3添加量均以800 IU/kg較為適宜。由此可見，調(diào)節(jié)維生素D的添加量可使動物獲得較好的日增重、日采食量和降低料重比，過高或過低均會降低其生長性能。本試驗從生長性能角度分析，飼糧添加523.1～560.6 IU/kg維生素D可使蛋雛鴨生長達(dá)到最佳效果。

免疫球蛋白通常也稱為抗體，廣泛存在動物的血液、組織液、淋巴液中，是由B細(xì)胞接受抗原刺激后增殖分化為漿細(xì)胞所產(chǎn)生的介導(dǎo)體液免疫的重要免疫分子。郭玉華（2005）研究表明，維生素D有一定的提高機(jī)體抗體水平的功能。曹榮等（2007）研究發(fā)現(xiàn)，在圍產(chǎn)奶牛日糧中額外添加維生素D3，細(xì)胞亞群的數(shù)量極顯著增加，IgG、IgM和IgA與對照組相比有升高趨勢，但差異不顯著。Vander Stede等（2004）研究發(fā)現(xiàn)，給豬肌肉注射HSA 后再肌注 1，25-（OH）2D3，顯著提高了血清中HSA特異的IgA抗體應(yīng)答。Chou等（2009）研究報道，維生素D3能夠增加小腸絨毛長度、腸壁厚度及腺窩深度，提高抗體水平，增強(qiáng)機(jī)體免疫力。本試驗結(jié)果表明，維生素D對血清IgA、IgG影響均顯著，對IgM影響不顯著，但維生素添加量550 IU/kg的D組IgA、IgM、IgG的含量最高。說明機(jī)體抗菌、抗病毒，抗毒素等的免疫學(xué)活性增強(qiáng)，動物處于良好的生長狀態(tài)。經(jīng)過分析，IgG含量與維生素D水平呈顯著二次曲線相關(guān)。當(dāng)維生素D的添加量為527.8 IU/kg時IgG的含量達(dá)到最大值，此時，免疫機(jī)能最強(qiáng)。

動物的免疫系統(tǒng)在執(zhí)行免疫功能的過程中，不僅存在內(nèi)部的自我調(diào)控，還受神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的調(diào)控，其中最重要的是甲狀腺激素和生長激素。T3、T4可與GH協(xié)同促進(jìn)動物的生長發(fā)育，對免疫應(yīng)答均有一定的調(diào)節(jié)、促進(jìn)作用。GH是一種生長調(diào)節(jié)素，具有促進(jìn)抗體合成、MΦ活化和IL-2的調(diào)節(jié)作用。Cort可抑制淋巴組織的功能，與動物淋巴細(xì)胞數(shù)量呈線性負(fù)相關(guān)，可減少抗體的合成。本試驗發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加不同水平的維生素D對蛋雛鴨T3、T4和Cort影響顯著，對GH影響不顯著，但添加220、550 IU/kg維生素D可使血清GH、T3和T4含量升高，使Cort含量降低，這與王麗等（2009）報道結(jié)果基本一致。經(jīng)過分析，T4、Cort含量與水平呈顯著二次曲線相關(guān)，維生素D添加量為525.6～546.4 IU/kg維生素D可使蛋雛鴨的免疫水平達(dá)到最佳狀態(tài)。

4 結(jié)論

玉米－豆粕型基礎(chǔ)飼糧中添加適宜水平的維生素D能夠提高1～28日齡蛋雛鴨機(jī)體的生長性能和免疫功能。通過二次回歸模型估測的維生素D適宜添加水平為523.1～560.6 IU/kg。

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