李自華 胡 振 方玉蓉 易 麗 孫朝文

CD64即FcY-I，是IgG的Fc段受體，屬免疫球蛋白超家族的成員。CD64是一個(gè)高親和力的受體，起連接體液免疫和細(xì)胞免疫的橋梁作用。正常情況下CD64在外周血中性粒細(xì)胞表面低水平表達(dá)，當(dāng)受到細(xì)菌細(xì)胞壁的脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)和粒細(xì)胞集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor，GCSF)、γ 干擾素(interferon-γ，IFN-γ)等因子刺激時(shí)，CD64 在中性粒細(xì)胞表面大量表達(dá)，急性感染時(shí)CD64激活被認(rèn)為在中性粒細(xì)胞吞噬和殺菌中起重要作用［1］。C-反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)是在急性肺炎患者的血液中首先發(fā)現(xiàn)的一種可以結(jié)合肺炎球菌細(xì)胞壁的C－多糖。CRP第一個(gè)被認(rèn)為是急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，急性創(chuàng)傷和感染時(shí)血液濃度急劇升高［2］。IL-6是誘導(dǎo)B細(xì)胞分泌免疫球蛋白和T細(xì)胞激活增殖的主要因子，在新生兒抗細(xì)胞感染中起重要作用［3］。在兒科感染性疾病中CD64、CRP、IL-6水平都會(huì)不同程度的升高，為進(jìn)一步提高兒科感染性疾病的早期診斷率，探討一種快速可靠的方法，我們對(duì)116例感染患兒進(jìn)行了中性粒細(xì)胞表面標(biāo)志物CD64、CRP、白介素-6(interleukin-6，IL-6)水平測(cè)定，并進(jìn)行了比較分析，報(bào)道如下。

資料和方法

一、研究資料

將2007年10月～2011年10月兒科病房(包括NICU住院)住院患兒116例，分重癥感染組49例(其中結(jié)核合并肺炎9例，細(xì)菌感染40例)，感染組36例(其中感染性肺炎13例，腸炎7例、膿皰瘡3例，臍炎8例，尿路感染5例);非感染組31例(包括溶血病、濕肺、早產(chǎn)、缺氧缺血性腦病等)。上述所有疾病的診斷都參照第7版《兒科學(xué)》［4］。三組進(jìn)行CD64、CRP、IL-6水平測(cè)定和比較。

二、研究方法

患兒入院48 h內(nèi)抽血進(jìn)行CD64、CRP、IL-6血培養(yǎng)檢測(cè)，并進(jìn)行局部分泌物培養(yǎng)和血常規(guī)檢查。CD64水平測(cè)定方法:全血50μl+20μl CD64PE/CD45Percp抗體(美國(guó)BD公司產(chǎn)品)混勻，暗處放置1 h后加FACS溶血?jiǎng)? ml，暗處放置20 min后用流式細(xì)胞儀(美國(guó)BD公司FACS Calibur)檢測(cè)。CRP水平測(cè)定方法:采用免疫比濁法(Beckmancoulter公司生產(chǎn)的 IMMage儀)，≥8.0 mg/L為陽(yáng)性。IL-6水平測(cè)定方法:采用雙抗體夾心ELISA法，試劑盒為美國(guó)MR公司產(chǎn)品，臨界值為9.71 pg/ml。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件，CD64水平測(cè)定采用秩和檢驗(yàn);CRP、IL-6計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)。

結(jié) 果

一、三組血清CD64、CRP、IL-6水平測(cè)定結(jié)果比較，見表1。

三組血清CD64水平測(cè)定結(jié)果比較:重癥感染組(6262.24±3776.43)、感染組CD64(3727.24±1276.32)均高于非感染組(2176.19±946.32)，但重癥感染組CD64水平明顯高于其他兩組，三組間兩兩比較，重癥感染組CD64水平與非感染組、一般感染組與非感染組間差異均有著性差異(H=35.02，P＜0.01)。CRP、IL-6水平測(cè)定結(jié)果比較:三組血清CRP，IL-6水平測(cè)定陽(yáng)性率差異有顯著性(P ＜0.05)，重癥感染組 CRP 水平測(cè)定結(jié)果與感染組、非感染組比較(χ2=85.0、75.0，P=2.60 ×10－18、9.11 ×10－11均 ＜0.05)，IL-6 水平測(cè)定結(jié)果比較(χ2=57.0、54.28，P=1.63 ×10－12、9.74 ×10－22均 ＜0.05)。

二、血清CD64、CRP、IL-6水平測(cè)定結(jié)果在診斷兒科感染中的敏感性和特異性，見表2。

三組數(shù)據(jù)資料中以(receiver operating characteristic curve，簡(jiǎn)稱ROC)曲線計(jì)算得出CD64診斷患兒感染的最佳臨界值285分子數(shù)/細(xì)胞，其診斷重癥感染的敏感度為89.21%，特異度為78.35%;對(duì)所有感染的診斷敏感度為67.51%，特異度為82.45% 。CRP檢測(cè)以常規(guī)8.00 mg/L為臨界值，診斷重癥感染的敏感度60.24%，特異度為67.56%;對(duì)所有感染診斷敏感度53.21%，特異度74.62%。IL-6檢測(cè)結(jié)果以9.71 pg/ml為臨界值，診斷重癥感染的敏感度9.98%，特異度為71.02%;對(duì)所有感染診斷敏感度為58.89%，特異度80.23%。

表1 三組血清CD64、CRP、IL-6水平測(cè)定結(jié)果比較Table 1 Comparison of serum CD64，CRP and IL-6 levels in three groups

表2 血清CD64、CRP、IL-6水平測(cè)定結(jié)果診斷兒科感染疾病中的敏感性和特異性比較Table 2 Comparison of sensibility and specificity of diagnosis of pediatric infectious diseases with serum CD64，CRP and IL-6 results

討 論

有關(guān)研究表明CD64是一個(gè)高親和力的受體，CD64的表達(dá)在急性感染后24 h內(nèi)大量表達(dá)，其敏感性和特異性分別為88% ～97%，88% ～90%［5］。這說(shuō)明CD64在感染性疾病早期表達(dá)增高。在非感染性的炎癥反應(yīng)和病毒感染均不可能會(huì)引起CD64的高度表達(dá)。表明CD64在診斷早期患兒急性感染有很高的特異性。根據(jù)本研究資料統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，重癥感染組CD64值高于感染組和非感染組，三組間CD64值比較(P＜0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。可認(rèn)為CD64是人體一種敏感的細(xì)菌感染標(biāo)志物。

C-反應(yīng)蛋白是Tiltet和Francis于1930年在急性肺炎患者的血液中首先發(fā)現(xiàn)的一種可以結(jié)合肺炎球菌細(xì)胞壁的C-多糖，CRP是一種急性期時(shí)相蛋白，是非特異性炎癥指標(biāo)［6］。本組資料CRP檢測(cè)以診斷重癥感染的敏感度60.24%，特異度為67.56%;對(duì)所有感染診斷敏感度53.21%，特異度74.62%。對(duì)協(xié)助診斷患兒感染性疾病有一定意義。CRP第一個(gè)被認(rèn)為是急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，急性創(chuàng)傷和感染時(shí)血液濃度急劇升高。這與急性期時(shí)相蛋白在體內(nèi)受影響因素較多有關(guān)，表明CRP可用來(lái)診斷急性感染性疾病，但其對(duì)重度感染性疾病的診斷特異性敏感度較低［7］。這可能與患兒的肝臟功能、CRP出現(xiàn)時(shí)間及其他影響因素有關(guān)

IL-6是誘導(dǎo)B細(xì)胞分泌免疫球蛋白和T細(xì)胞激活增殖的主要因子，本組資料中IL-6檢測(cè)以診斷重癥感染的敏感度9.98%，特異度為71.02%;對(duì)所有感染診斷敏感度為58.89%，特異度80.23%。有研究顯示IL-6在感染后3h達(dá)到高峰，以后逐漸在血循環(huán)中消失［8］。受血標(biāo)本采集時(shí)間的影響，會(huì)出現(xiàn)IL-6檢測(cè)敏感度和特異性降低，從而影響疾病的診斷。

綜上所述，兒科感染性疾病中血清CD64、CRP、IL-6水平測(cè)定對(duì)診斷疾病有一定的幫助，通過CD64、CRP、IL-6水平測(cè)定比較，CD64診斷患兒感染的敏感度為67.51%，特異度為82.45%，特別是對(duì)重癥感染的患兒診斷敏感度89.21%，特異度78.35%，明顯高于CRP(60.24%、67.56%)，IL-6(9.98%、71.02%)，因此CD64水平測(cè)定可作為臨床兒科感染性疾病的診斷敏感指標(biāo)。

1 周 宓，潘柏申.C-反應(yīng)蛋白在臨床應(yīng)用中的進(jìn)展［J］.國(guó)外醫(yī)學(xué)(臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè))，2005，26(1):F003-F004.

2 Yeh ET，Willerson JT.Coming of age of C-reactive protein using inflammation markers in cardiology［J］.Circulation，2003，107:370-372.

3 程顯芬，郝軼梅.高敏C反應(yīng)蛋白在兒科感染性疾病中的應(yīng)用［J］.北京醫(yī)學(xué)，2005，27(12):736-737.

4 李 耿.三種感染標(biāo)記物在新生兒早發(fā)感染診斷中的比較［J］.實(shí)用兒科臨床雜志，2007，22(16):1252-1253.

5 Ng PC，Li K，Wong RP，et al.Neutrophils CD64 expression a sensitive diagnostic marker for late-onset nosocomial infection in very low birth weight infants［J］.Pediatr Res，2002，51(3):296-303.

6 Jaye DL，Waites KB.Clinical applications of C-reactive protein in pediatrics［J］.Pediatr Infect Dis J，1997，16(8):735-746.

7 Enguix A，Rey C，Concha A，et al.Comparison of pro-calcit ion with C-react ion protein and serum a myloid for the early diagnosis of bacterial sepsis in critically ill neonates and children［J］.Int Care Med，2001，27:211-215.

8 Okayama Y，Kirshaum AS，Metcalfe DD.Expression of a functional high-affinity IgG receptor，F(xiàn)c gamma RI，on human mast cells upregulation by IFN-gamma［J］.J Immunol，2000，164(8):4332-4339.