顏春華 魏清榕

（1 丹東市食品藥品檢驗(yàn)所，遼寧 丹東 118002；2 鞍山市食品藥品檢驗(yàn)所，遼寧 鞍山 114006）

補(bǔ)腎強(qiáng)身片具有補(bǔ)腎強(qiáng)腎的功效，用于治療腰酸足軟，頭暈耳鳴，眼花心悸，陽(yáng)萎遺精，由淫羊藿、菟絲子、金櫻子、女貞子、狗脊五味中藥組成。該中成藥收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第十五冊(cè)[1]，標(biāo)準(zhǔn)中無定量指標(biāo)，不能有效控制其質(zhì)量。淫羊藿為方中的君藥，其主要成分為淫羊藿苷，我們采用HPLC法[2]對(duì)方中淫羊藿苷進(jìn)行含量測(cè)定。方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

日本Shimadzu公司LC-10ATVP高效液相色譜儀；檢測(cè)器：SPD-M10AVP；Class-vp工作站；CSF-1A超聲波發(fā)生器（上海超聲波儀器廠）。

1.2 試藥

淫羊藿苷對(duì)照品：由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，批號(hào)為110737-200319（供含量測(cè)定用）；甲醇為色譜純；水為二次蒸餾水；其它試劑均為分析純；補(bǔ)腎強(qiáng)身片為市售品（批號(hào)為060101，060102，060103）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱為Diamonsil?（鉆石）C18（5μm，250×4.6mm）；流動(dòng)相：乙睛-水（30∶70）；檢測(cè)波長(zhǎng)：270nm；柱溫：室溫；流速：1.0mL/min；理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算不低于3000。

2.2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取淫羊藿苷對(duì)照品10.40mg，置100mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取此液2mL，置5mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得（每1mL含淫羊藿苷41.6μg）。

圖1 HPLC色譜圖

表1 淫羊藿苷回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.3 供試品溶液的制備

取本品20片，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取約1g，精密稱定，置50mL量瓶中，加稀乙醇30mL，超聲處理1h，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測(cè)定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μL，按上述色譜條件測(cè)定，結(jié)果見圖1A、B。

2.4 線性關(guān)系考察

精密吸取對(duì)照品溶液2、4、5、6、8mL，分別置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。分別吸取各濃度溶液10μL注入液相色譜儀中，測(cè)定峰面積，以淫羊藿苷進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸。得回歸方程為：Y=45186.35+6455486.779X，r=0.9999，表明淫羊藿苷在0.0832～0.3328μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.5 陰性對(duì)照試驗(yàn)

按處方比例配制不含淫羊藿的陰性對(duì)照樣品，按供試品溶液的制備方法制備，測(cè)定，結(jié)果在淫羊藿苷對(duì)照品吸收峰位置處無干擾（見圖1C）。

2.6 精密度試驗(yàn)

分別精密吸取41.6μg/mL的淫羊藿苷對(duì)照品溶液10μl，按正文含量測(cè)定項(xiàng)下色譜條件，連續(xù)進(jìn)樣5次，測(cè)定峰面積，結(jié)果平均峰面積為1328978，RSD=1.03%。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一份供試品溶液分別放置2、4、8、12、16、20、24h測(cè)定供試品中淫羊藿苷的峰面積，測(cè)得其峰面積的平均值為1385511，RSD為1.23%，表明供試品溶液至少在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.8 重現(xiàn)性試驗(yàn)

取同一批號(hào)的供試品適量，精密稱定6份，按含量測(cè)定項(xiàng)下的方法操作，制備供試品溶液，測(cè)定供試品中淫羊藿苷的含量，結(jié)果平均含量為0.89mg/片，RSD=1.16%。

2.9 回收率試驗(yàn)

取已知淫羊藿苷含量的補(bǔ)腎強(qiáng)身片樣品（批號(hào)為060103，淫羊藿苷含量為0.90mg/片，平均片重為0.3995g）約1g，精密稱定，共計(jì)6份，分別精密加入淫羊藿苷對(duì)照品溶液（0.1514mg/mL）15mL，按含量測(cè)定項(xiàng)下方法操作，制備供試品溶液，測(cè)定補(bǔ)腎強(qiáng)身片中淫羊藿苷的含量，計(jì)算回收率，測(cè)定結(jié)果見表1。

2.10 樣品含量測(cè)定

按本質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)含量測(cè)定項(xiàng)下方法操作，制備供試品溶液，測(cè)定三批補(bǔ)腎強(qiáng)身片中淫羊藿苷的含量，測(cè)定結(jié)果分別為0.89、0.92、0.90mg/片。

3 討 論

流動(dòng)相的篩選與確定，曾采用不同比例的乙睛-0.05%磷酸溶液，乙睛-水為流動(dòng)相，進(jìn)行了試驗(yàn)，結(jié)果乙睛-水體積比為30∶70時(shí)，供試品中淫羊藿苷與相鄰組分分離度良好，故確定為含量測(cè)定項(xiàng)下色譜條件。

[1]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn).中藥.中藥成方制劑[S].第十五冊(cè).1997.

[2]中華人民共和國(guó)國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典:一部[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:6.