張洪友，唐曉艷，李徐延，夏 成，李修明，徐 闖

（1.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，黑龍江 大慶 163319；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)生物學(xué)院，北京 海淀 100193；3.黑龍江省農(nóng)墾九三分局畜牧獸醫(yī)局，黑龍江 黑河 161441）

隨著奶牛生產(chǎn)水平的提高，隱性酮病的發(fā)病率也逐年上升，給奶牛業(yè)的發(fā)展造成嚴(yán)重影響。目前，針對(duì)該病缺乏有效、實(shí)用的預(yù)防為主的藥物。因此，本試驗(yàn)采用組方藥物-“酮病制劑1號(hào)”防治隱性酮病，通過(guò)血液一些指標(biāo)的變化，研究探討其作用機(jī)制，為該藥防治奶牛隱性酮病提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試奶牛的選擇、分組和飼養(yǎng)管理 選擇年齡、胎次相近，產(chǎn)后10～30d，305d個(gè)體產(chǎn)奶量大于6000kg的奶牛24頭，分為4組，每組6頭。其中Ⅰ組、Ⅳ組為隱性酮病組，Ⅱ組、Ⅲ組為健康組。其中，Ⅰ組、Ⅱ組將10g“酮病制劑1號(hào)”分早晚兩次混于精料中任其自由采食，飼喂期8d，Ⅲ組、Ⅳ組奶牛不給藥。四組奶牛管理?xiàng)l件相同，試驗(yàn)期為12d。各組奶牛均飼喂按NRC標(biāo)準(zhǔn)配制的產(chǎn)奶日糧。

1.2 “酮病制劑1號(hào)”：組方藥物。

1.3 樣品的采集 試驗(yàn)?zāi)膛７謩e于試驗(yàn)前0d和投喂藥物后第4、8、12天清晨尾根靜脈采血，肝素抗凝，分離血漿，液氮中保存待測(cè)。

1.4 檢測(cè)項(xiàng)目與方法 葡萄糖（GLU，氧化酶法）；β-羥丁酸（BHBA，酶速率法）；谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT，比色法）；谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT，酶試劑法）；甘油三酯（TG，酶試劑法）；乙酸、丙酸、丁酸（高效液相色譜）；胰島素（Ins，放免法）；胰高血糖素（Gn，放免法）。

1.5 數(shù)據(jù)處理 數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用SPSS 11.5軟件進(jìn)行分析，組間差異顯著性用ONE-WAY ANOVA（方差分析）統(tǒng)計(jì)分析。組間不同大寫(xiě)字母（A、B、C、D）表示差異極顯著（P＜0.01），不同小寫(xiě)字母（a、b、c、d）表示差異顯著（P＜0.05）。列間不同大寫(xiě)字母（E、F、G、H）表示差異極顯著（P＜0.01），不同小寫(xiě)字母（e、f、g、h）表示差異顯著（P＜0.05）。

2 結(jié)果與分析

2.1 “酮病制劑1號(hào)”對(duì)血漿生化指標(biāo)的影響 從表1可見(jiàn)：試驗(yàn)期間，Ⅰ組血漿GLU濃度升高，血漿BHBA濃度降低，與Ⅳ組差異極顯著（P＜0.01），Ⅱ組血漿GLU濃度呈現(xiàn)升高趨勢(shì)，試驗(yàn)后12d與與Ⅳ組差異極顯著（P＜0.01）；Ⅰ組GOT在投藥期間呈下降趨勢(shì)，試驗(yàn)后12d上升至最高（P＜0.01），與健康組差異顯著或極顯著（P＜0.05或P＜0.01）；Ⅰ組TG在投藥期間呈下降趨勢(shì)，試驗(yàn)前0d與Ⅱ組差異顯著（P＜0.05）。

2.2 “酮病制劑1號(hào)”對(duì)血漿揮發(fā)性脂肪酸的影響從表2可見(jiàn)，Ⅰ組血漿乙酸濃度呈下降趨勢(shì)，試驗(yàn)后8d，Ⅲ組與Ⅰ組、Ⅱ組差異顯著（P＜0.05）；試驗(yàn)后12d，Ⅱ組與Ⅳ組差異顯著（P＜0.05）。Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組間血漿丙酸濃度呈上升趨勢(shì)（P＜0.01或P＜0.05），試驗(yàn)后8d、12d，Ⅰ組與Ⅳ組差異極顯著（P＜0.01）；試驗(yàn)后8d、12d，Ⅱ組與Ⅲ組差異顯著（P＜0.05或P＜0.01）。Ⅰ組血漿丁酸濃度呈現(xiàn)下降趨勢(shì)（P＜0.05或P＜0.01）；Ⅱ組試驗(yàn)后4d、8d、12d與試驗(yàn)前差異顯著或極顯著（P＜0.05或P＜0.01）；試驗(yàn)后12d，Ⅳ組與Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組間差異顯著（P＜0.05）。

2.3 “酮病制劑1號(hào)”對(duì)血漿激素水平的影響 從表2可見(jiàn)：投藥期間，Ⅰ組和Ⅱ組血漿Ins濃度呈上升趨勢(shì)，試驗(yàn)后12d，Ⅰ組與Ⅲ組、Ⅳ組差異顯著或極顯著（P＜0.05或P＜0.01）；Ⅰ組和Ⅱ組血漿Gn濃度呈上升趨勢(shì)，Ⅰ組試驗(yàn)后8d、12d均顯著高于試驗(yàn)前0d（P＜0.05）。

3 討論

3.1 “酮病制劑1號(hào)”對(duì)血漿生化指標(biāo)和揮發(fā)性脂肪酸的影響 血漿GLU和BHBA濃度呈顯著的負(fù)相關(guān)［1］，本試驗(yàn)中，Ⅰ組奶牛血漿BHBA濃度顯著下降，血漿GLU濃度顯著上升并達(dá)到正常水平，提示能量正平衡狀態(tài)，隱性酮病得以治愈。Ⅰ組、Ⅱ組血漿乙酸和丁酸濃度下降，丙酸濃度升高，可能是煙酸提高了瘤胃中丙酸鹽的濃度，煙酸還可誘導(dǎo)生糖氨基酸轉(zhuǎn)化為糖，提高血漿GLU濃度［2］。此外，高錳酸鉀可明顯抑制瘤胃中易利用糖的降解，使大量淀粉在瘤胃后消化道吸收，提高了利用效率［3］，從而使血漿GLU濃度升高，減少丙酸的利用，使血漿中丙酸含量增加。試驗(yàn)后12d，Ⅰ組血漿GOT濃度升高可能與酮病本身對(duì)肝臟代謝不利有關(guān)，即使酮病癥狀有所緩解，酮病對(duì)肝臟代謝仍會(huì)產(chǎn)生一定的影響。試驗(yàn)前Ⅰ組血漿TG濃度較高，并高于健康奶牛血漿中TG濃度［4］，這可能是肝細(xì)胞受損害，肝臟轉(zhuǎn)化過(guò)多攝入的能量并加以儲(chǔ)存的能力有限，使

得血中TG濃度明顯增高［5］。

表1 “酮病制劑1號(hào)”對(duì)血漿生化指標(biāo)的影響

表2 “酮病制劑1號(hào)”對(duì)血漿揮發(fā)性脂肪酸的影響

表3 “酮病制劑1號(hào)”對(duì)血漿激素水平的影響

3.2 “酮病制劑1號(hào)”對(duì)血漿激素水平的影響 能量負(fù)平衡時(shí)，Gn可激活脂肪酶，促進(jìn)脂肪分解，同時(shí)又能加強(qiáng)脂肪酸氧化，使酮體生成增多。體脂動(dòng)員使血漿GLU濃度升高，而血漿GLU濃度升高會(huì)引起lns分泌增多，從而使血漿GLU濃度維持穩(wěn)定。本試驗(yàn)中，Ⅰ組、Ⅱ組血漿lns、Gn及GLU濃度均呈上升趨勢(shì)，Ⅰ組血漿Gn濃度顯著上升（P＜0.05），表明在試驗(yàn)期間，Gn的生糖作用處于主導(dǎo)地位，因此血漿GLU濃度升高。

綜上所述，“酮病制劑1號(hào)”通過(guò)對(duì)奶牛血漿lns、Gn、乙酸、丙酸、丁酸濃度的調(diào)控，起到降低血漿BHBA濃度，提高血漿GLU濃度的作用。

［1］Bruss，M L，Lipids and ketones.In：J J.Kaneko，J W.Harvey and M L.Bruss，Clinical Biochemistry of Domestic Animals［M］.London：Academic Press，1997：83-113.

［2］李新建.煙酸和煙酸鉻對(duì)奶牛熱應(yīng)激和犢牛斷奶應(yīng)激的影響［D］.鄭州：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2003.

［3］傅啟高，梁其英，焦勇.高精料日糧條件下高錳酸鉀對(duì)綿羊消化代謝的影響［J］.八一農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，1995，18（3）：88-92.

［4］肖定漢主編.奶牛疾病監(jiān)控［M］.北京：北京農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，1994：90-103.

［5］薛瑞益.圍產(chǎn)期奶牛血中某些生化指標(biāo)與脂類代謝病關(guān)系的研究［D］.呼和浩特：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，2006.