益氣滋陰法治療慢性特發(fā)性血小板減少性紫癜的臨床療效及對FAS影響的研究

孫鳳，郝晶，王金環(huán)，尚溪瀛，雍彥禮，田飛，孫瑩

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150040)

特發(fā)性血小板減少性紫癜(Idiopathic thrombocytopenic purpura，ITP)是一因血小板免疫性破壞，導(dǎo)致外周血中血小板減少的出血性疾病。以皮膚粘膜及內(nèi)臟出血、血小板減少、骨髓巨核細(xì)胞發(fā)育成熟障礙、血小板生存時間縮短及抗血小板抗體出現(xiàn)為特征，臨床上分為急性型和慢性型。近年來研究認(rèn)為，CITP發(fā)病機制可能與T細(xì)胞凋亡異常有關(guān)，進而導(dǎo)致B細(xì)胞分泌抗體過多所致［1］。CITP以起病隱襲，癥見皮膚紫斑，鼻衄，齒衄，月經(jīng)淋漓不斷為特點，常表現(xiàn)為氣陰兩虛之征象［2］，因而我們以益氣滋陰法為治則，自擬中藥方劑治療CITP，取得了較好的臨床療效，并應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)測定CITP患者治療前后Fas的表達水平，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 所有患者皆來源于2008年1月～2010年4月在黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院血液科門診和住院的CITP患者，共30例，均符合CITP的診斷標(biāo)準(zhǔn)。30例CITP患者中男10例，女20例;年齡在11～61歲，中位年齡(29.23±18.14)歲，病程在0.5年～15年之間，血小板計數(shù)在2×109個/L～27×109個/L，平均(10.83±8.33)×109個/L。正常對照組15例。

1.2 治療方法 給予自擬益氣滋陰為主中藥方劑，每日1劑，水煎服，早晚分服。藥物組成為:黃芪、黨參、生地黃、旱蓮草、女貞子、紫草、茜草、赤芍、雞血藤、當(dāng)歸、鎖陽、白花蛇舌草、連翹、甘草等，并隨癥加減。2個月為1個療程，2個療程后判斷療效。

1.3 觀察指標(biāo)

將CITP患者的癥狀和體征根據(jù)《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》，按無、輕、中、重分級，并給予量化處理。無癥狀記0分，輕度記1分，中度記2分，重度記3分。外周血血小板計數(shù)。觀察CITP患者治療前后外周血Fas的表達水平。

2 療效判定標(biāo)準(zhǔn)

臨床痊愈:中醫(yī)臨床癥狀、體征消失或基本消失，證候積分減少≥95%;顯效:中醫(yī)臨床癥狀、體征明顯改善，證候積分減少≥70%;有效:中醫(yī)臨床癥狀、體征均有好轉(zhuǎn)，證候積分減少≥30%;無效:中醫(yī)臨床癥狀、體征均無明顯改善，甚或加重，證候積分減少不足30%。

計算公式(尼莫地平法)為:［(治療前積分－治療后積分)÷治療前積分］×100%

3 試驗方法

應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)測定CITP患者治療前后Fas的表達水平。

4 統(tǒng)計學(xué)處理

組內(nèi)比較采用配對t檢驗，兩樣本比較采用獨立樣本t檢驗，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(s)表示，采用SPSS 16.0分析試驗結(jié)果，并以P＜0.05為差異具有顯著性。

5 結(jié)果

5.1 益氣滋陰法治療CITP的臨床療效

CITP組30例，臨床痊愈4例，顯效11例，有效11例，無效4例，CITP組總有效率86.7%。

5.2 CITP患者治療前后Fas的表達水平 結(jié)果見表1。

表1 CITP患者與正常對照組外周血Fas表達水平的比較(s)

表1 CITP患者與正常對照組外周血Fas表達水平的比較(s)

注:與正常組比較，△P＜0.05;組內(nèi)治療前后比較，*P＜0.05。

組別 n 治療前 治療后治療組 30 10.41 ±3.76△ 32.78 ±8.05△＊15 56.36 ±10.76 56.36 ±10.76對照組

由表1可以看出，治療前治療組Fas表達水平低于對照組，與對照組相比有顯著性差異(P＜0.05);治療后治療組Fas的表達水平升高，與治療前比較有顯著性差異(P＜0.05);治療后治療組與對照組相比仍有顯著性差異(P＜0.05)。

6 討論

根據(jù)CITP的發(fā)病特點和臨床表現(xiàn)，該病病機以氣陰兩虛為主，故治療時應(yīng)以益氣滋陰為主，選用黃芪、黨參補氣健脾，攝血止血;選用生地黃、旱蓮草、女貞子滋補肝腎之陰，滋陰以降火;選用紫草、茜草、赤芍藥涼血寧血，化瘀止血。此外在藥物的選擇上還結(jié)合了現(xiàn)代藥理研究:黃芪對機體的免疫機能具有雙向調(diào)節(jié)作用，可促進淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化，增強細(xì)胞免疫功能，還能激活NK細(xì)胞。黨參及其多糖可使巨噬細(xì)胞的數(shù)量增加，細(xì)胞體積增大，偽足增多，吞噬能力增強。生地黃對下丘腦－垂體－腎上腺皮質(zhì)系統(tǒng)具有較明顯的保護作用，能減輕激素副作用并有止血功能。旱蓮草即可增強免疫，又具止血作用。女貞子又增強網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬能力，增強細(xì)胞免疫和體液免疫作用。紫草、茜草具有調(diào)節(jié)免疫能力，提高機體免疫功能。

ITP是發(fā)病機制尚未完全明確的自身免疫病，近年來研究認(rèn)為其發(fā)病機制與T細(xì)胞凋亡異常有關(guān)。目前認(rèn)為T淋巴細(xì)胞凋亡異常是引發(fā)自身免疫病的一種重要機制。Fas表達在淋巴細(xì)胞凋亡中起非常重要作用，當(dāng)Fas與FasL結(jié)合時，F(xiàn)asL可向胞內(nèi)傳遞“死亡信號”，通過啟動FADD(死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白)及Caspase(天冬氨酸特異性的半胱氨酸蛋白水解酶)家族在數(shù)小時內(nèi)引起細(xì)胞凋亡［3］。伍昌林［4］等采用流式細(xì)胞儀檢測ITP患兒血T細(xì)胞Fas/FasL蛋白表達，結(jié)果ITP患兒外周血T細(xì)胞Fas蛋白表達與正常對照相比明顯降低，而FasL表達升高，提示ITP患兒外周血T細(xì)胞不能通過Fas/FasL途徑正常凋亡，患兒體內(nèi)活性T細(xì)胞增多，可能導(dǎo)致血小板大量損傷。盛光耀［5］等認(rèn)為，臨床上可考慮通過誘導(dǎo)外周血淋巴細(xì)胞凋亡，消除過多激活的淋巴細(xì)胞來治療ITP。

在本次試驗研究中，我們通過對正常組和CITP組療前療后外周血Fas表達水平的比較發(fā)現(xiàn)，治療前CITP患者Fas表達水平明顯低于正常人，提示CITP患者外周血T細(xì)胞不能通過Fas/FasL途徑正常凋亡，導(dǎo)致T淋巴細(xì)胞亡不足和血小板破壞增多，表明CITP患者存在細(xì)胞免疫異常。而以益氣滋陰法為主方劑可能是通過上調(diào)Fas的表達水平，促進CITP患者外周血T細(xì)胞通過Fas/FasL途徑正常凋亡，以減少血小板的破壞，從而達到治療CITP的目的。

［1］尹艷，王若暉，郝晶，等.桑椹三仙膠治療慢性特發(fā)性血小板減少性紫癜患者前后調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及GITR表達的變化［J］.中醫(yī)藥學(xué)報，2011，39(4):58 －60.

［2］李海昌，溫成平，謝志軍，等.特發(fā)性血小板減少性紫癜激素治療不同階段證型特點的研究［J］.中醫(yī)藥學(xué)報，2009，37(6):59－61.

［3］Denecker G，Vercammen D，Declercq W，et al.Apoptosic and necrotic cell death induced by death domain receptors［J］.Cell MolLife Sci，2001，58(3):256 －370.

［4］伍昌林，劉仿，肖紅，等.特發(fā)性血小板減少性紫癜患兒外周血T細(xì)胞凋亡信號蛋白表達的臨床意義［J］.實用兒科臨床雜志，2005，20(9):885 －887.

［5］盛光耀，王春美.特發(fā)性血小板減少性紫癜發(fā)病機制研究進展［J］.實用兒科臨床雜志，2010，25(3):157 －159.